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2020
07-20

在實驗時怎樣挑選到適合自己試驗的抗體呢？
一、關(guān)于特異性的選擇：特異性的選擇首要需求考慮四個方面：蛋白特異性、種屬特異性、實驗方法特異性、符號物的特異性。?1、蛋白特異性：針對需求檢測的蛋白查找抗體，幾個細(xì)節(jié)要差異，重組表達(dá)的蛋白和內(nèi)源性蛋白的檢測，對抗體的要求是不相同的，留心檢查抗體闡明書的檢測闡明。假定重組蛋白不是全長表達(dá)，則需求留心抗體的免疫原區(qū)域是否在重組蛋白區(qū)域內(nèi)。2、種屬特異性：同種蛋白不同物種，有著或大或小的差異。現(xiàn)在大部分商品化抗體都是以人源蛋白序列為模板重組蛋白或規(guī)劃多肽抗原的，根據(jù)蛋白的同源性的情況與其他種屬發(fā)作穿插
2020
07-14

關(guān)于免疫球蛋白的各種提取與鑒定
各類免疫球蛋白及其與其它血清蛋白間，根據(jù)它們的分子大小、電離密度、等電點以及在水溶液中的溶解度不同等，得以相互鑒別與分類。利用上述特性，還可以從液體中分離和提取各種免疫球蛋白。免疫球蛋白的分離提?。?．鹽析法（Saltfractionation）：蛋白質(zhì)在不同濃度的鹽溶液中相對溶解度不同。血清γ球蛋白在一定濃度鹽溶液中易于沉淀，而白蛋白則不易沉淀，據(jù)此可將二者分離。其方法步驟如下：（1）配制飽和硫酸銨溶液：取500ml蒸餾水加熱至70~80℃，將400g硫酸銨溶于其中，攪拌20分鐘，冷卻。待硫酸
2020
07-14

豬細(xì)小抗體檢測卡的四個操作步驟
豬細(xì)小抗體檢測卡采用免疫膠體金層析技術(shù)制成，可快速檢測豬血清中的豬細(xì)小病毒抗體。將豬細(xì)小病毒抗原包被在硝酸纖維素膜的檢測線（T）上，抗豬細(xì)小病毒抗體包被在硝酸纖維素膜的質(zhì)控線（C）上，用膠體金標(biāo)記的豬細(xì)小病毒抗原干燥后置于玻璃纖維素膜下端。當(dāng)血清加入加樣孔內(nèi)，由于層析的原理，血清開始沿紙條移動，當(dāng)遇上干燥的金標(biāo)抗原，將其溶解，并帶著金標(biāo)抗原繼續(xù)往上移動，至硝酸纖維素膜的檢測線。如果樣品中有豬細(xì)小病毒抗體存在時，包被在檢測線上的豬細(xì)小病毒抗原和金標(biāo)豬細(xì)小病毒抗原與樣品中的豬細(xì)小病毒抗體將會在檢測線
2020
07-10

口蹄疫O型液相阻斷試劑盒評價免疫效果的標(biāo)準(zhǔn)
口蹄疫O型液相阻斷試劑盒是一種檢測試劑盒，下面我們先來了解下什么是口蹄疫病毒！口蹄疫是一類動物疫病，受到國家的高度重視。養(yǎng)殖者也將其作為防控的重中之重，對口蹄疫疫苗的免疫接種工作認(rèn)真對待。然而，在免疫接種工作中依然會出現(xiàn)諸多問題，主要原因歸結(jié)于未*掌握該種疫病的相關(guān)知識?？谔阋卟《镜奶卣魇鞘裁?？口蹄疫病毒的大特征是血清型多，變異性強(qiáng)。目前已知口蹄疫病毒有7個血清型。各型之間沒有相互免疫保護(hù)關(guān)系，即用某一種血清型疫苗免疫過的動物，當(dāng)其他血清型口蹄疫病毒侵襲時，畜群依然發(fā)病，加之口蹄疫病毒特別容易發(fā)
2020
07-08

細(xì)胞常見的幾種污染源
細(xì)胞培養(yǎng)過程中如果操作不當(dāng)或者條件控制不合適見容易受到化學(xué)或者生物因素的污染，常見的污染源有：1.細(xì)菌污染細(xì)菌污染是實驗室細(xì)胞培養(yǎng)中常見的污染，即使在細(xì)胞培養(yǎng)液中加入了抗菌素，也可能因為操作不慎而引起污染。常見的有革蘭氏陽性菌，如枯草桿菌以及大腸桿菌、假單胞菌等革蘭氏陰性菌，其中又以白色葡萄球菌較常見。培養(yǎng)細(xì)胞受細(xì)菌污染后，會出現(xiàn)培養(yǎng)液變混濁，pH改變。污染后細(xì)胞發(fā)生病理改變，胞內(nèi)顆粒增多、增粗，zui后變圓脫落死亡。2.真菌污染真菌污染是細(xì)胞培養(yǎng)過程中zui常見的一種，zui常見的真菌有煙曲霉
2020
07-03

抗凝收集血漿的方法
收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接離心分離血漿待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。其方法如下：1、肝素抗凝：常用的抗凝劑，一般情況下對相關(guān)指標(biāo)都不會有干擾，同時抗凝比例較大（抗凝劑：全血=1:30），對血液基本沒有稀釋影響。肝素是一種含有硫酸基團(tuán)的粘多糖，帶有強(qiáng)大的負(fù)電荷，具有加強(qiáng)抗凝血酶III滅活絲氨酸蛋白酶的作用，從而阻止凝血酶的形成，并有阻止血小板聚集等多種抗凝作用。肝素管一般用于生化及血流變的檢測，是電解質(zhì)檢
2020
06-11

輪狀病毒抗原快速檢測卡的檢測對象和方法是什么呢？
輪狀病毒也會感染年幼的動物并造成腹瀉。各項研究顯示，輪狀病毒會感染哺乳動物（如：猿猴、牛、豬、羊、田鼠、貓與狗、家鼠、馬與兔子等）以及鳥類（雞與火雞等）等。這些感染動物的輪狀病毒是有與感染人類的輪狀病毒產(chǎn)生基因交換的潛在可能性。目前已經(jīng)證明感染動物的輪狀病毒也可以感染人類，感染途徑包括病毒的直接傳染以及提供感染人類的病毒株一段或是數(shù)段的核糖核酸片段來進(jìn)行基因重整。輪狀病毒是家畜的病原體之一，并且治療的費用、家畜的高罹病率與高死亡率都會造成農(nóng)人的經(jīng)濟(jì)損失。輪狀病毒抗原快速檢測卡是采用了膠體金免疫層
2020
06-11

血清和血漿樣本的制備方法
血清和血漿是elisa試劑盒實驗中常用的樣本類型,那么制備方法是什么呢,到底該如何制備,不要著急,慢慢看下去.1.血清（serum）的一般制備方法可參考以下：●采集血液樣本，置于不含抗凝劑的收集管內(nèi)（試管或離心管）●室溫下靜置自然凝集30~60min，待血液凝固●沿收集管壁將血凝塊輕輕劃開●4℃放置過夜，平衡后，低溫低速離心10min（低溫：4℃；低速：人血~2000rpm、小鼠~1000rpm、大鼠~2500rpm）●上清即為血清，大概1ml血液能收集300-400ul血清●立即操作、冷藏或冷
2020
06-09

牛結(jié)核病抗體快速檢測卡的試驗方法和操作注意事項
牛結(jié)核?。˙ovineTuberculosis）是由牛型結(jié)核分枝桿菌（Mycobacteriumbovis）引起的一種人獸共患的慢性傳染病，我國將其列為二類動物疫病。以組織器官的結(jié)核結(jié)節(jié)性肉芽腫和干酪樣、鈣化的壞死病灶為特征。OIE將其列為B類疫病。牛結(jié)核病抗體快速檢測卡檢測原理：本試劑采用膠體金免疫層析試驗(GICA)原理制成，樣本加入到加樣孔后與膠體金標(biāo)記物一起沿層析膜移動，若樣本中存在牛結(jié)核抗體則與膠體金標(biāo)記物及檢測線上的抗原結(jié)合而顯示紫紅色，若樣本中不存在牛結(jié)核抗體則不產(chǎn)生顏色反應(yīng)?！九?
2020
06-09

科研血清實驗技能
問題一：如何貯存和凍結(jié)血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?答：將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但有必要注意的是，融解過程中有必要規(guī)矩地?fù)u晃均勻。長時刻貯存在2-8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白（如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等）可能聚集而構(gòu)成沉積或可見的混濁。因而，推薦在-20℃以下貯存血清，并防止反復(fù)凍融。主張血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時，請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶，主張無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。問題二：血清中包含絮狀沉積，它
2020
06-05

單層細(xì)胞傳代培養(yǎng)時常出現(xiàn)的問題
1.細(xì)胞難脫離?培養(yǎng)基內(nèi)含有某些抑制成分（例如血清）使細(xì)胞解離液失活。解決對策：在加入細(xì)胞解離液（dissociatingsolution）之前，先用DPBS潤洗細(xì)胞兩次或者是直接用細(xì)胞解離液潤洗細(xì)胞。?選用的細(xì)胞解離液太弱。解決對策：提高酶濃度、EDTA濃度，或者使用作用更強(qiáng)的細(xì)胞解離液（如dispase,collagenase），或者是把細(xì)胞置于37°C孵育以提高解離液的活性。?細(xì)胞達(dá)到100%匯合時間太久，細(xì)胞間連接變得非常牢固，阻礙了解離液滲透到細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)接觸的界面。解決對策：當(dāng)細(xì)胞
2020
06-02

單層培養(yǎng)傳代步驟
絕大多數(shù)有限細(xì)胞系及連續(xù)細(xì)胞系在體外進(jìn)行原代培養(yǎng)時都是貼壁生長的，培養(yǎng)的細(xì)胞一經(jīng)接觸培養(yǎng)基質(zhì)就迅速鋪展并開始有絲分裂，逐漸形成致密的細(xì)胞單層，這種培養(yǎng)方式稱為單層細(xì)胞培養(yǎng)。單層培養(yǎng)的細(xì)胞系在進(jìn)行原代培養(yǎng)時，隨著培養(yǎng)時間的延長和細(xì)胞的不斷分裂，一則細(xì)胞之間相互接觸而發(fā)生接觸抑制，生長速度減慢甚至停止；另一方面由于營養(yǎng)物質(zhì)消耗殆盡、代謝廢棄物不斷積累，導(dǎo)致細(xì)胞停止生長甚至死亡。此時，為獲得大量的、穩(wěn)定的同種細(xì)胞，并保證細(xì)胞始終維持快速生長，可以將單層細(xì)胞從培養(yǎng)基質(zhì)上分離下來制成單細(xì)胞懸液，按照推薦濃
2020
05-25

血清實驗方法原理
實驗方法原理不同批次的血清支持細(xì)胞生長的能力也不同，尤其是對克隆細(xì)胞的生長。檢測不同批次的血淸，然后大批量購買血清不僅能節(jié)約經(jīng)費且能減少實驗條件引起的差異，某些批次血清可能含有毒性或抑制生長的化合物。實驗步驟1)從不同生產(chǎn)廠商得到100ml的批次的試驗血清。2)用本實驗室常用的2~3種細(xì)胞來檢測血清。3)將lml含有20%的上述待檢血清的培養(yǎng)液加于9個培養(yǎng)皿中（35-mm),每種批次的血清用9碟細(xì)胞培養(yǎng)皿進(jìn)行檢測。4)9碟中每3碟接種入500、1000、2000個細(xì)胞。如果細(xì)胞存活率較高，細(xì)胞數(shù)
2020
05-06

豬瘟病毒兔弱化疫苗株檢測試劑盒特點優(yōu)勢
1.特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。2.重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。3.靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。4.實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實
2020
05-06

豬細(xì)小抗體檢測卡操作步驟
【操作步驟】一、血清制備豬細(xì)小抗體檢測卡按常規(guī)方法抽取2-3ml血液置潔凈干燥的試管中，靜置0.5-1小時待血液凝固后于4000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘（也可將血液靜置1-2小時，待血液凝固自然析出血清），分離血清。要求血清清亮，無溶血、無污染。血清樣品短期可于2～8℃保存，長期需置-20℃保存。二、操作方法1.在檢測卡的加樣孔內(nèi)加入２滴（約80ul）待檢血清樣品。2.將檢測卡平放于桌面上，在室溫下靜置5-20分鐘內(nèi)判定結(jié)果，超過20分鐘的結(jié)果只能作為參考。三、注意事項1.檢測前請仔細(xì)閱讀說明書，本
2020
05-06

O型口蹄疫快速檢測卡簡單介紹
樣本要求】1.本檢測卡僅適用于檢測豬血清/全血樣品。2.血清：按常規(guī)方法抽取2-3ml血液置潔凈干燥的試管中，靜置約1小時待血液凝固后于4000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘（也可將血液靜置約2小時，待血液凝固自然析出血清），分離血清。要求血清清亮，無溶血、無污染。血清樣本短期可于2～8℃保存，長期需置-20℃保存。3.全血：可采用加抗凝劑的全血作為檢測樣本（全血樣本不能冷凍）?？谔阋逴型檢測卡試驗方法】1.撕開檢測卡鋁箔包裝袋，取出檢測卡，放于平整、潔凈的臺面上。2.用配套吸管吸取已準(zhǔn)備好的澄清樣本上清
2020
05-06

布病抗體快速檢測卡試驗方法
【試驗方法】1.用配套吸管吸取已準(zhǔn)備好的樣本，垂直而緩慢的滴加1滴血清或者2滴全血或者1滴奶樣到樣本稀釋液中（注意：該步驟很關(guān)鍵，樣本切不可多加），混勻后待用。2.撕開檢測卡鋁箔包裝袋，取出檢測卡，放于平整、潔凈的臺面上,使用袋內(nèi)吸管取2-3滴（約60ul）步驟1得到的待測液到加樣孔內(nèi)。（若有微量移液器，可先加3ul血清或6ul全血，再滴加兩滴稀釋液）。3.室溫下放置10-15分鐘判斷結(jié)果,15分鐘后結(jié)果只作參考。【結(jié)果判斷】1.陰性：在觀察孔內(nèi)，只有對照線區(qū)（C）出現(xiàn)一條紫紅色線。2.陽性：在
2020
05-06

豬藍(lán)耳病抗體試劑盒注意事項
豬藍(lán)耳病抗體試劑盒注意事項試劑盒使用前各試劑應(yīng)平衡至室溫，使用前應(yīng)搖勻，使用后放回2～8℃。不同品種、不同批號試劑盒的試劑組分不得混用，使用試劑時應(yīng)防止試劑污染。底物和終止液對皮膚和眼可能有刺激性，使用時應(yīng)該注意防護(hù)。TMB（底物B液）不要暴露于強(qiáng)光和避免接觸氧化劑。檢測板拆封后應(yīng)避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥劑放于自封袋中，并盡快置于2～8℃)。所有廢棄物在丟棄之前應(yīng)合理處理以免污染。嚴(yán)格遵守操作說明可以獲得*的結(jié)果。操作過程中移液、定時和洗滌等的全部過程必須精確。血清稀釋板為一次性

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