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抗原修復(fù)技術(shù)概述2022/06/17

抗原修復(fù)技術(shù)主要用于增強免疫組織化學(xué)檢測中的信號。下面介紹一下抗原修復(fù)方法和修復(fù)技巧。一、抗原修復(fù)方法固定是在免疫組織化學(xué)過程中進(jìn)行的一個關(guān)鍵步驟，以保持組織形態(tài)。然而，這種方法也可能對免疫組織化學(xué)產(chǎn)生不利影響，因為它經(jīng)常改變蛋白質(zhì)生物化學(xué)并掩蓋感興趣蛋白質(zhì)的表位。因此，一抗無法與蛋白質(zhì)結(jié)合，導(dǎo)致信號強度低。這種掩蔽效應(yīng)可能是由表位中氨基酸的交聯(lián)或無關(guān)但存在于表位附近的肽的交聯(lián)引起的。這會改變抗原的構(gòu)象或靜電荷。在抗原修復(fù)過程中，這種掩蔽被逆轉(zhuǎn)，從而可能發(fā)生抗原與表位之間的結(jié)合。二、抗原修復(fù)技巧

蛋白質(zhì)免疫印跡實驗中條帶過多怎么辦？2022/06/16

標(biāo)簽：免疫印跡蛋白質(zhì)科普抗體蛋白質(zhì)免疫印跡蛋白質(zhì)免疫印跡是檢測復(fù)雜混合物中蛋白質(zhì)抗原的常用技術(shù)。通過SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分離樣品，然后將分離的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到膜上。這些膜與特定于目標(biāo)蛋白質(zhì)的抗體一起孵育，該抗體與固定在膜上的蛋白質(zhì)條帶結(jié)合。然后使用檢測系統(tǒng)對抗體進(jìn)行可視化，該系統(tǒng)通?；谂cIg鏈結(jié)合的二級蛋白質(zhì)，該蛋白質(zhì)與顯色反應(yīng)相關(guān)。與理論預(yù)測相反，檢測到幾個波段的情況并不少見。雖然抗體可能并不*針對蛋白質(zhì)，但其他因素可能是原因：1.抗原的蛋白水解分解。這種情況并不少見，特別是如果樣品儲存時

生物技術(shù)行業(yè)的生物公司品牌錦集2022/06/15

標(biāo)簽：公司收購,生物技術(shù),生物行業(yè),生命科學(xué),試劑,生物試劑隨著生物科技的不斷發(fā)展，生物實驗室儀器設(shè)備及生物試劑的國際化采購交易越來越頻繁，生物公司行業(yè)大企業(yè)的近些年來也變化頻繁？下面將這10年來主要變更的生物公司做以整理：2021年度主要變更9月，羅氏收購TIBMolbiol。8月，Abcam以3.4億美元收購了BioVision。7月，珀金埃爾默以52.5億美元收購了BioLegend。3月，Bio-Techne公司（納斯達(dá)克代碼：TECH）以2.15億美元現(xiàn)金的初始對價以及在實現(xiàn)某些未來里

幾種常見轉(zhuǎn)染試劑的特點和應(yīng)用2022/06/15

轉(zhuǎn)染試劑在細(xì)胞轉(zhuǎn)染、細(xì)胞識別、抗體蛋白研發(fā)等領(lǐng)域廣泛使用，通常可以直接購買或者過實驗室中DIY配制。Lipofectamine、fugene、磷酸鈣、是較為常見的轉(zhuǎn)染試劑，其實目前市場上的轉(zhuǎn)染試劑盒針對某些轉(zhuǎn)染進(jìn)行了優(yōu)化，使用起來較為方便。比如：細(xì)胞類型來自于Lonza系列的Amaxa人單核細(xì)胞核因子試劑盒、Invitrogen的Silencer(R)siRNATransfectionIIKit等試劑盒在細(xì)胞轉(zhuǎn)染方面都有著較好的效果。一、針對siRNA遞送優(yōu)化的常用轉(zhuǎn)染試劑市場上的一些生物試劑公

GFP抗體應(yīng)用中的常見問題有哪些2022/06/15

GFP抗體應(yīng)用中的常見問題有哪些？標(biāo)簽：抗體蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)科學(xué)科普GFP抗體GFP適合于蛋白質(zhì)標(biāo)記，這是該抗體的天然優(yōu)勢。雖然它非常適合實時成像，例如，作為TP53MITE-seq屏幕的報告器，其他應(yīng)用導(dǎo)致GFP熒光猝滅，這使得有必要使用抗GFP抗體。組織樣本的冷凍保存、組織學(xué)制備和固定劑的使用通常會導(dǎo)致GFP熒光*或部分喪失，因此需要使用抗GFP抗體來獲得可靠的結(jié)果。通過蛋白質(zhì)印跡檢測GFP標(biāo)記的蛋白質(zhì)和通過免疫沉淀研究蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用也需要使用GFP抗體?？笹FP抗體可用作多克隆或單克隆抗

T細(xì)胞檢測方法有哪些？2022/06/15

由于T細(xì)胞具有多種亞型，所以研究膜結(jié)合T細(xì)胞受體的技術(shù)困難，但在某些情況下，您希望能夠做到這一點，例如分析哪些免疫記憶已被誘導(dǎo)以測量個體對特定抗原的反應(yīng)程度。此時，有多種方法可以實現(xiàn)，主要分為兩大類：一種是通過測量特征性反應(yīng)（例如細(xì)胞因子分泌）來檢測T細(xì)胞對刺激作出反應(yīng)的激活，另一種是通過細(xì)胞的特異性來分析T細(xì)胞受體。下面總結(jié)了一下T細(xì)胞分析的6種方法：1.限制稀釋培養(yǎng)該技術(shù)涉及通過使用不同稀釋度的細(xì)胞來測量對特定抗原產(chǎn)生反應(yīng)的T細(xì)胞的頻率，然后測量無反應(yīng)的孔數(shù)。不用過多計算，簡而言之，每個孔中

熒光素酶檢測時的注意事項2022/06/15

標(biāo)簽：熒光素細(xì)胞轉(zhuǎn)染熒光強度熒光檢測啟動子螢火蟲可以在螢光素酶的存在下將螢光素轉(zhuǎn)化為氧化螢光素以發(fā)光。利用熒光素酶的較常見的科學(xué)測定是報告基因測定，其中可以通過測量來自熒光素酶反應(yīng)的光信號來跟蹤轉(zhuǎn)錄激活或抑制。建議使用雙熒光素酶系統(tǒng)，其中發(fā)生二次生物發(fā)光反應(yīng)。第二個信號由另一個分子發(fā)出。最常見的是由也可以生物發(fā)光的海腎基因編碼（一些質(zhì)粒已經(jīng)包含海腎和螢光素酶基因，例如Promega的pmirGLO）。這允許您將熒光素酶表達(dá)標(biāo)準(zhǔn)化為對照并測量您的相對轉(zhuǎn)染效率。熒光素酶檢測過程中的注意事項：1.信號

使用EBV 表達(dá)細(xì)胞轉(zhuǎn)化淋巴細(xì)胞的方法？2022/06/10

EBV，也稱為人類皰疹病毒4，是淋巴隱病毒屬的一種伽馬皰疹病毒.它是傳染性單核細(xì)胞增多癥的原因，并與多種人類腫瘤疾病有關(guān)，包括伯基特淋巴瘤和霍奇金淋巴瘤。大多數(shù)成年人的EBV血清反應(yīng)呈陽性，表明其在人群中普遍存在。感染通常是潛伏的。然而，外植的淋巴瘤細(xì)胞有時會產(chǎn)生傳染性病毒。幾十年前，來自淋巴瘤外植體的細(xì)胞系的上清液被用于確認(rèn)EBV感染的腫瘤潛力，這是通過病毒介導(dǎo)的細(xì)胞培養(yǎng)中人血B淋巴細(xì)胞的永生化。從那時起，B淋巴細(xì)胞的EBV體外轉(zhuǎn)化已成為獲得用于診斷和研究人類細(xì)胞系的常規(guī)程序。一、實驗材料的準(zhǔn)

細(xì)胞培養(yǎng)實驗室需要采購哪些實驗室儀器設(shè)備2022/06/10

標(biāo)簽：細(xì)胞培養(yǎng)，實驗室儀器設(shè)備細(xì)胞培養(yǎng)實驗室針對不同的細(xì)胞培養(yǎng)要求，所需要的實驗室儀器設(shè)備也會有所不同；比如，長期用于癌癥研究的實驗室，主要需求為哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)；而蛋白質(zhì)表達(dá)課題的一般培養(yǎng)昆蟲細(xì)胞的實驗較多。細(xì)胞培養(yǎng)實驗室設(shè)備其實，所有細(xì)胞培養(yǎng)實驗室都有一個共同的要求，那就是無菌培養(yǎng)，這里分享一下培養(yǎng)細(xì)胞所必需的基礎(chǔ)設(shè)備。需要注意的是：介于每個實驗室不盡相同，列舉的并不包括所有設(shè)備；具體需要根據(jù)您的實驗類型和實驗設(shè)備去配置。實驗室設(shè)備、生物實驗器材主要包括：1.生物安全柜：這是細(xì)胞生物學(xué)、分子

實驗室安全中的這些因素不容忽視2022/06/08

科研實驗室不僅充滿了化學(xué)品的危害,它們可能會爆炸、刺傷、致死等風(fēng)險，然而在實驗室安全中，這10種非化學(xué)品危害也不容忽視。這些非化學(xué)品危害因素主要包括：1.離心機離心機是危險的，尤其是在不注意的情況下！在2000年，一臺無人維護(hù)的超速離心機在美國實驗室內(nèi)爆。離心機的碎片毀壞了房間，并重傷了一名科學(xué)家。也常常會有實驗人員裝錯轉(zhuǎn)子，而導(dǎo)致超速離心機的轉(zhuǎn)子飛出傷人。2.低溫液體這些令人難以置信的冷液體可以通過直接接觸使設(shè)備和身體組織快速冷凍。即使是間接接觸也會造成傷害：一位科學(xué)家在試圖用她的手關(guān)閉液氮杜

實驗室用水分為幾級？2022/06/08

如果您在實驗室工作，可能需要對實驗室用水需要有一定的了解。實驗室用水分為幾級？有什么區(qū)別呢？其實在大多數(shù)實驗室中，實驗用水主要分為以下幾種：一、工業(yè)用水工業(yè)用水是不能安全飲用的非飲用水。它沒有過濾，被認(rèn)為是臟的。您可以將其用于一般應(yīng)用，例如洗衣機和抽水馬桶。您也可以用它來清潔實驗室餐具，但不能用作最后的清洗。絕對不要將它用于任何科學(xué)實驗。我基本上只用這些水洗手和沖洗實驗室盤子幾次。二、去離子水(diH2O)去離子水就是它聽起來的樣子。離子通過過濾系統(tǒng)從水中去除。您不僅可以使用這種水洗手。DiH2

微生物菌種保存方法2022/06/08

標(biāo)簽：微生物微膠囊微生物應(yīng)用技術(shù)在細(xì)胞工廠以及研究各種生物過程實驗中起著重要作用，但是微生物的保存以及微生物培養(yǎng)的連續(xù)性一直是微生物應(yīng)用領(lǐng)域的難題。實踐證明，與在平板或發(fā)酵罐中連續(xù)傳代培養(yǎng)微生物培養(yǎng)物相比，建立微生物庫可以輕松實現(xiàn)微生物儲存和檢索。根據(jù)儲存時間的長短和微生物的種類，一般會采用不同的保存方法。長期保存的主要原理是保持微生物長期處于休眠狀態(tài)，免受污染及遺傳變化，直到使用時使其恢復(fù)生機。這種方法通常是通過使用低溫和冷凍或干燥技術(shù)來減少細(xì)胞代謝活動來實現(xiàn)的。近年來，還有一種新型微生物保存

保持移液器精確度的11種方法2022/06/08

實驗過程中，如果沒有準(zhǔn)確的移液，您的實驗數(shù)據(jù)將無法保證準(zhǔn)確，并且您的分析也會有較大差異，如何保證移液器的準(zhǔn)確度呢？移液器屬于精密儀器，所以做好移液器的維護(hù)，解它們的工作原理，熟練掌握移液器的使用技術(shù)，才能保證移液器準(zhǔn)確度。移液器的工作原理1.空氣置換型移液器空氣置換移液器的工作原理有點像注射器，不同之處在于活塞和樣品之間有一個充氣墊。氣墊可防止活塞與溶液接觸。將溶液和移液管分開是好的，但它也對移液器施加了一些限制。溫度和壓力會影響氣墊的體積，從而影響移液精度。此外，揮發(fā)性溶劑會蒸發(fā)到氣墊中，從而

微載體生物反應(yīng)器的應(yīng)用2022/06/02

標(biāo)簽：生物反應(yīng)器載體生物技術(shù)微載體生物反應(yīng)器是一種用于大批量培養(yǎng)哺乳動物細(xì)胞的生物反應(yīng)器，它即可以滿足培養(yǎng)依賴貼壁和非貼壁的哺乳動物細(xì)胞，還滿足于多管陣列的生物反應(yīng)器系統(tǒng)的所需條件。近年來，創(chuàng)造生物活性分子（包括單克隆抗體）的新技術(shù)創(chuàng)造了一個蓬勃發(fā)展的生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)。目前將基因?qū)爰?xì)胞這項技術(shù)的發(fā)展也相對區(qū)域成熟，大規(guī)模生產(chǎn)生物細(xì)胞的生物反應(yīng)器也是層出不窮。常見的類型主要可分為微生物發(fā)酵培養(yǎng)系統(tǒng)和細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)。微生物發(fā)酵系統(tǒng)通常很少用于規(guī)?；a(chǎn)當(dāng)前所需的生物分子，這主要是因為細(xì)菌產(chǎn)生的蛋白質(zhì)不同

rnase是什么酶? RNase A作用是什么？2022/06/02

rnase是什么酶?RNase屬于核糖核酸酶，它是分子生物學(xué)中常見到的一種酶，這種酶容易對核酸實驗造成污染，所以在實驗中會竭力地避免。實質(zhì)上RNase的作用有很多，它對于生物體的生存也是重要的。一、自然界中RNase的作用真核生物、古細(xì)菌和細(xì)菌中至少存在21種類型的RNA酶，它們在機體中發(fā)揮著重要的作用。比如：RNaseH具有去除DNA復(fù)制中的RNA引物的作用。RNaseP具有處理tRNA分子的功能。RNaseA主要負(fù)責(zé)清除不再需要的細(xì)胞RNA，這些RNA由生物機體內(nèi)的某些細(xì)胞大量分泌。RNas

實驗室用水有哪幾種?2022/05/30

實驗室用水主要有：超純水、雙蒸水、三蒸水、去離子水、蒸餾水、RO水等。超純水：又稱為高純水、UPW，超純水的純化程度較高，基本可以滿足大部分實驗用水要求。一般使用超純水機、超純水儀等超純水設(shè)備來制備。這類水適合高靈敏度ICP/MS質(zhì)譜分析、同位素分析、以及疾控中心、藥檢所、質(zhì)檢所、環(huán)監(jiān)站、高校和科研院所等實驗室及各種精密儀器用水。三蒸水：主要用于注射用水。雙蒸水：經(jīng)去熱源操作的超純水，可用作注射水。去離子水：可以做生物實驗室配制生物試劑的實驗是用水。RO水：是通過離子交換樹脂的方式采用RO水處理

原子吸收光譜儀和原子熒光光譜儀要使用哪種實驗室純水？2022/05/30

原子吸收光譜儀主要用于食品檢驗、元素分析、食品檢測、環(huán)?？萍?、農(nóng)藥殘留檢定、地質(zhì)勘探、冶金行業(yè)等多個領(lǐng)域，是實驗室中較為常用一般要使用哪種實驗室純水？純水？RO還是EDI純水？由于光譜儀主要是通過光譜吸收法來處理樣本的，所以對空白背景的要求較高，水中稍有雜質(zhì)或離子都干擾到實驗結(jié)果。如果直接使用自來水會造成鈣鎂離子在儀器表面結(jié)垢，嚴(yán)重影響到儀器的靈敏度甚至直接使儀器受損。如果使用超純水，可能會因為純度過高而具有較強的溶解能力，一旦超純水暴露在空氣中，空氣中的CO2會與水反應(yīng)生成CO3，這樣會導(dǎo)致超

細(xì)胞破碎的方法有哪些？2022/05/25

標(biāo)簽：細(xì)菌細(xì)胞壁細(xì)胞破碎細(xì)胞裂解細(xì)胞學(xué)實驗中，尤其是植物細(xì)胞實驗，常常會遇到的細(xì)胞裂解的相關(guān)實驗，目的是通過機械貨非機械的方法打破細(xì)胞壁的束縛，從而在進(jìn)行細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核內(nèi)部完成DNA編輯相關(guān)操作的一種實驗方法。細(xì)胞破碎的方法有哪些?總結(jié)方法主要有以下8種：一、細(xì)胞破碎的機械方法機械細(xì)胞破壞實際上就是這樣：通過固體或液體剪切的方式強行打開細(xì)胞壁并溢出內(nèi)容物。機械破碎的優(yōu)點是不會引入可能干擾您想要提取的物質(zhì)的化學(xué)物質(zhì)。然而，容易造成大分子內(nèi)容物失活。1.研缽和研杵研磨破壁法通常是將植物組織樣本放在置

生物反應(yīng)器中的灌流培養(yǎng)技術(shù)工藝技術(shù)2022/05/18

標(biāo)簽：生物反應(yīng)器灌流培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)隨著生物制藥工藝的不斷發(fā)展，蛋白類藥物、抗體藥物的市場需求也逐年增多，這對生物反應(yīng)器放大工藝要求也越來越高。細(xì)胞規(guī)?；糯蠊に囈褟膹暮唵蔚难a料分批培養(yǎng)發(fā)展到灌流培養(yǎng)技術(shù)。灌流培養(yǎng)與補料培養(yǎng)有什么區(qū)別？灌流培養(yǎng)與補料培養(yǎng)的區(qū)別主要在于灌流培養(yǎng)可以在連續(xù)的生物工藝工作流程當(dāng)中，實現(xiàn)持續(xù)的產(chǎn)物產(chǎn)出產(chǎn)物純化。從而提升生產(chǎn)產(chǎn)量及工作效率。補料分批培養(yǎng)是指在每隔一段時間將培養(yǎng)基等營養(yǎng)物質(zhì)補充到固定的生物反應(yīng)器中進(jìn)行培養(yǎng)。該批次營養(yǎng)物質(zhì)耗盡，在適宜的時段進(jìn)行批次收獲。灌流培養(yǎng)技

實例應(yīng)用-如何計算DNA片段中的分子數(shù)2022/05/18

實驗室數(shù)學(xué)在生物學(xué)實驗數(shù)據(jù)分析中一直是一個令人頭疼的問題？在定量PCR實驗中，常常會遇到計算DNA片段中的分子、計算溶液的濃度或計算連續(xù)稀釋等，這樣的計算有沒有什么好的方法呢？當(dāng)然有了，在本文中，我們將教你簡單的DNA樣本中的分子計數(shù)法。——例如，套入公式即可一招輕松拆解：500ng樣本中有多少個50堿基對(bp)片段的模板/副本？這樣的棘手問題。使您很快就會成為實驗室中的計算高手！一、計算DNA片段中分子數(shù)量的應(yīng)用在進(jìn)行以下類型的實驗時，通常需要DNA分子的計算：DNA連接。生化分析。實時PC