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2023
12-05

DMEM培養(yǎng)基選高糖還是低糖？
DMEM培養(yǎng)基是貼壁培養(yǎng)細(xì)胞優(yōu)先選擇的一款培養(yǎng)基。根據(jù)葡萄糖含量的高低，DMEM培養(yǎng)基一般可以區(qū)分為高糖型(低于4500mg/L)和低糖型(低于1000mg/L)兩種。那么DMEM培養(yǎng)基是選高糖還是低糖呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、DMEM高糖培養(yǎng)基：DMEM高糖培養(yǎng)基是在MEM培養(yǎng)基基礎(chǔ)上改良而來(lái)，高糖型DMEM培養(yǎng)基有利于細(xì)胞停泊于一個(gè)位置生長(zhǎng)，適于生長(zhǎng)較快、附著較困難的腫瘤細(xì)胞等。目前已廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng)。DMEM高糖培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于生長(zhǎng)快、粘附性低的細(xì)胞?？捎糜诙喾N哺乳動(dòng)物原代細(xì)胞的
2023
12-05

DMEM培養(yǎng)基的配置方法是什么？
DMEM培養(yǎng)基是一種富含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基，可以提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的能量、氨基酸和其他重要成分。它可以用于多種細(xì)胞類(lèi)型的培養(yǎng)，包括哺乳動(dòng)物細(xì)胞、鳥(niǎo)類(lèi)細(xì)胞和昆蟲(chóng)細(xì)胞等。DMEM培養(yǎng)基還具有良好的穩(wěn)定性和可調(diào)節(jié)性，可以根據(jù)不同細(xì)胞的需求進(jìn)行改良和優(yōu)化。那么你知道DMEM培養(yǎng)基的配置方法是什么嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！DMEM培養(yǎng)基的配制方法如下：1.準(zhǔn)備所需材料：DMEM培養(yǎng)基粉末、去離子水、胎牛血清（FBS）、L-谷氨酰胺、雙抗。2.取一定量的去離子水倒入一個(gè)無(wú)菌容器中，加熱至60℃左右。3.將DMEM
2023
12-05

DNA提取的注意事項(xiàng)
DNA的提取可以簡(jiǎn)單的分為裂解和純化兩大步驟，裂解是破壞樣品細(xì)胞結(jié)構(gòu)，從而使樣品中的DNA游離在裂解體系中的過(guò)程，純化則是使DNA與裂解體系中的其它成分，如蛋白質(zhì)、鹽及其它雜質(zhì)分離的過(guò)程。那么你知道DNA提取的注意事項(xiàng)有哪些嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！1.裂解液要預(yù)熱,以抑制DNase,加速蛋白變性,促進(jìn)DNA溶解。2.酚一定要堿平衡，使用平衡飽和酚。苯酚具有高度腐蝕性，飛濺到皮膚、粘膜和眼睛會(huì)造成損傷，因此應(yīng)注意防護(hù)。氯仿易燃、易爆、易揮發(fā)，具有神經(jīng)毒作用，操作時(shí)應(yīng)注意防護(hù)。3.各操作步驟要輕柔,
2023
12-04

抗體特異性驗(yàn)證方法有什么？
抗體特異性驗(yàn)證方法有什么？抗體特異性從始至終備受重視，那么你知道抗體特異性驗(yàn)證方法有什么嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、RNA干擾(RNAInterference)RNA干擾是與靶基因序列同源的雙鏈RNA(dsRNA)所誘導(dǎo)的一種特異性基因沉默，可以迅速阻斷基因活性。siRNA(SmallInterferingRNA)是一種小RNA分子(大約21-25核苷酸)，siRNA只降解與其序列互補(bǔ)配對(duì)的mRNA，其調(diào)控的機(jī)制是通過(guò)互補(bǔ)配對(duì)來(lái)降低相應(yīng)靶位基因的表達(dá)，所以是一種典型的負(fù)調(diào)控機(jī)制。在抗體特異性檢測(cè)
2023
12-04

如何選擇熒光定量PCR耗材
熒光定量PCR檢測(cè)技術(shù)已成為當(dāng)前病毒核酸檢測(cè)的主要手段，除了高質(zhì)量的檢測(cè)試劑、參數(shù)穩(wěn)定的熒光定量PCR儀外，所選用的檢測(cè)耗材的質(zhì)量，也會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性及靈敏度產(chǎn)生很大的影響。那么如何選擇熒光定量PCR耗材呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、高純度1.高品質(zhì)、高純度、高透明聚丙烯PP。2.潔凈空間生產(chǎn)加工。二、高熱傳遞性1.極薄的壁厚優(yōu)化熱傳遞減少循環(huán)時(shí)間。三、高反射熒光信號(hào)1.qPCR更推薦使用優(yōu)質(zhì)的白色PCR耗材。2.管蓋：高透光性，蓋子的光通過(guò)率直接關(guān)系著儀器的信號(hào)采集，選擇一款透光性高的蓋子對(duì)
2023
11-30

如何分辨細(xì)胞污染類(lèi)型？
細(xì)胞培養(yǎng)物污染往往是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室中最常見(jiàn)的問(wèn)題，有時(shí)會(huì)造成非常嚴(yán)重的后果。細(xì)胞培養(yǎng)污染物可分為兩大類(lèi)，一類(lèi)是化學(xué)污染物，如培養(yǎng)基、血清和水中的雜質(zhì)，包括內(nèi)毒素、增塑劑和洗滌劑，另一類(lèi)是生物污染物，如細(xì)菌、霉菌、酵母、病毒和支原體，以及其他細(xì)胞系的交叉污染。那么我們?cè)撊绾畏直娓鞣N細(xì)胞污染呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、細(xì)菌污染肉眼觀察特點(diǎn)：細(xì)菌污染時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)基可能在幾個(gè)小時(shí)呈現(xiàn)混濁，爆發(fā)很快。有時(shí)稍加震蕩，便會(huì)有很多混濁物漂起。在低倍顯微鏡下，細(xì)菌以細(xì)小顆粒的形式出現(xiàn)在細(xì)胞之間，在高倍顯微鏡下觀察可
2023
11-30

蛋白質(zhì)純化的原理是什么？
蛋白純化是指通過(guò)基因工程技術(shù)將編碼蛋白的核酸序列導(dǎo)入到宿主細(xì)胞，使其大量表達(dá)，再使用適當(dāng)?shù)募兓椒▽⑵湓隗w外純化出來(lái)，從而獲得高純度、活性和產(chǎn)量的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng)可以分為原核表達(dá)系統(tǒng)和真核表達(dá)系統(tǒng)兩大類(lèi)。那么你知道蛋白質(zhì)純化的原理是什么嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、乳糖操縱子的負(fù)調(diào)控在沒(méi)有乳糖存在時(shí)，lac操縱子處于阻遏狀態(tài)，此時(shí)，I序列表達(dá)Lac阻遏蛋白與O序列結(jié)合，阻礙RNA聚合酶與P序列結(jié)合，抑制轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)。當(dāng)有乳糖存在時(shí)，乳糖進(jìn)入細(xì)胞，經(jīng)β-半乳糖苷酶催化，轉(zhuǎn)變?yōu)楫惾樘?，異乳糖結(jié)合阻遏
2023
11-29

細(xì)胞計(jì)數(shù)通用步驟有什么？有何注意事項(xiàng)？
細(xì)胞計(jì)數(shù)是指對(duì)細(xì)胞數(shù)量進(jìn)行定量測(cè)定的方法。在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，通過(guò)細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定細(xì)胞培養(yǎng)的密度和數(shù)量，可以掌握細(xì)胞生長(zhǎng)的情況。同時(shí)，細(xì)胞計(jì)數(shù)也是衡量不同實(shí)驗(yàn)條件下細(xì)胞生長(zhǎng)情況的重要指標(biāo)之一。那么你知道細(xì)胞計(jì)數(shù)通用步驟有什么嗎？有何注意事項(xiàng)呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、細(xì)胞計(jì)數(shù)的通用方法1.以貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞為例，消化后的細(xì)胞充分重懸吹散，取一部分轉(zhuǎn)移至干凈的EP管內(nèi)，例如1mL;2.使用酒精棉球輕輕擦拭計(jì)數(shù)板表面和蓋玻片，把后者的邊緣微微濕潤(rùn)，然后小心蓋在計(jì)數(shù)板的正中間，邊緣要能覆蓋住計(jì)數(shù)板上的凹槽；
2023
11-29

瓊脂糖凝膠電泳的常見(jiàn)問(wèn)題有哪些？
瓊脂糖凝膠電泳是根據(jù)核酸（DNA或RNA）分子大小來(lái)分離和識(shí)別物質(zhì)的技術(shù)。那么你知道瓊脂糖凝膠電泳的常見(jiàn)問(wèn)題有哪些嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、同樣大小的DNA一起跑電泳條帶不一樣大DNA條帶不一樣大，本質(zhì)上是DNA在凝膠中的遷移率不一樣，有的跑得快，有的慢，通常情況同樣大小的DNA，遷移率是一樣的，條帶位置也會(huì)一樣。但遷移率也受很多因素影響，例如DNA的構(gòu)象。例如環(huán)狀超螺旋結(jié)構(gòu)的DNA，和同等大小的線(xiàn)性DNA（例如單位點(diǎn)酶切后的質(zhì)粒），前者的遷移率要高，表現(xiàn)出來(lái)就是看上去超螺旋結(jié)構(gòu)的DNA分子量
2023
11-28

你知道什么是緩沖溶液?jiǎn)幔?/a>
你知道什么是緩沖溶液?jiǎn)?？讓我們一起?lái)看看吧！緩沖溶液是許多生化反應(yīng)、生產(chǎn)、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的重要溶液，對(duì)穩(wěn)定溶液的酸堿度有重要的影響。最常見(jiàn)的幾種緩沖體系有磷酸鹽緩沖溶液、硼酸鹽緩沖溶液、三羥甲基氨基甲烷（簡(jiǎn)稱(chēng)Tris）-HCl緩沖溶液、羥yi基哌qin乙磺酸（供注射用）（簡(jiǎn)稱(chēng)HEPES）緩沖溶液。對(duì)于絕大多數(shù)生物制劑（如疫苗、抗體、ADC偶聯(lián)藥物、脂質(zhì)體等）而言，實(shí)驗(yàn)操作、實(shí)際生產(chǎn)以及生物體內(nèi)的生化反應(yīng)等都需要在特定的pH值范圍內(nèi)才能正常有效地進(jìn)行，從而得到準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)論或發(fā)揮最hao的治療效果。在

2023
11-28

如何選擇緩沖溶液？
三羥甲基氨基甲烷（Tris）是一種應(yīng)用非常廣泛的有機(jī)試劑。它及其衍生物被廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的緩沖液的制備，可用于制作藥物、有機(jī)合成、生物緩沖劑等。其中在生化實(shí)驗(yàn)中，許多蛋白質(zhì)及核酸相關(guān)的實(shí)驗(yàn)都需要用Tris作為生物緩沖劑。那么你知道該如何選擇緩沖溶液?jiǎn)?？讓我們一起?lái)看看吧！TBS即Tris緩沖鹽水，是Tris-HCl緩沖鹽溶液，為等滲鹽溶液加Tris-HCl緩沖液。因?yàn)門(mén)ris堿的堿性較強(qiáng)，所以可以只用這一種緩沖體系配制pH范圍由酸性到堿性的大范圍pH值的緩沖液；對(duì)生物化學(xué)過(guò)程
2023
11-27

細(xì)胞消化的方法有哪些？
細(xì)胞消化的方法有哪些？我們的細(xì)胞在培養(yǎng)時(shí)大部分會(huì)以貼壁的形式生長(zhǎng)，它們?cè)跈C(jī)體內(nèi)時(shí)，也是與其他細(xì)胞或者細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)合的。細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中使用的wan全培養(yǎng)基中的血清，含有許多帶陽(yáng)性電荷的促細(xì)胞附著因子(層黏連蛋白Laminine、纖維連接蛋白Fibronectin等胞外基質(zhì)），能幫助細(xì)胞附著于帶陰性電荷的底物上，并形成連接、貼壁伸展。使細(xì)胞解除這種附著，就是細(xì)胞消化。那么你知道細(xì)胞消化的方法有哪些嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、機(jī)械消化法直接用培養(yǎng)基吹打或使用細(xì)胞刮刀，通過(guò)外力使細(xì)胞解除貼壁狀態(tài)，一般用
2023
11-27

ELISA檢測(cè)時(shí)樣本實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備步驟有什么？
在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃，必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。那么你知道ELISA檢測(cè)時(shí)樣本實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備步驟都有什么嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！1.血清室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。2.血漿應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。3.尿液用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-300
2023
11-27

阻斷ELISA與液相阻斷ELISA有什么區(qū)別？
你知道阻斷ELISA與液相阻斷ELISA有什么區(qū)別嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、本質(zhì)不同間接的酶標(biāo)抗體是二抗，與待檢抗體結(jié)合；阻斷酶標(biāo)抗體是一抗，與抗原結(jié)合。間接中底物降解的量與抗體量相等，阻斷底物降解量與抗體。二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果不同酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)：是酶免疫測(cè)定技術(shù)中應(yīng)用zui廣的技術(shù)，其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體(聚苯乙烯微量反應(yīng)板)表面，使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行，用洗滌法將液相中的游離成分洗除，常用的ELISA法有雙抗體夾心法和間接法。OD值不同是因?yàn)榍昂髽右旱臐舛炔煌?
2023
11-27

細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)的常見(jiàn)問(wèn)題有什么？如何解決？
細(xì)胞侵襲是指研究細(xì)胞穿透和侵入到周?chē)驅(qū)αⅢw組織的能力的實(shí)驗(yàn)。這是一種重要的生物學(xué)過(guò)程，在胚胎發(fā)育、組織修復(fù)和疾病轉(zhuǎn)移等生理和病理過(guò)程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。那么你知道細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)的常見(jiàn)問(wèn)題有什么嗎？該如何解決呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、細(xì)胞密度選擇不當(dāng)過(guò)高或過(guò)低的細(xì)胞密度會(huì)影響細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果。過(guò)高的細(xì)胞密度會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞聚集在一起，難以穿過(guò)基質(zhì)層，而過(guò)低的細(xì)胞密度則可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)中的細(xì)胞過(guò)于分散，難以形成完整的細(xì)胞層解決辦法：應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求和細(xì)胞類(lèi)型選擇適當(dāng)?shù)募?xì)胞密度，并在實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行條件優(yōu)化。二、基質(zhì)濃
2023
11-27

如何保存ELISA試劑盒？
你知道該如何正確保存ELISA試劑盒嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！ELISA檢測(cè)試劑盒的保質(zhì)期一般都是在一年，如果保存得當(dāng)?shù)脑?huà)，不會(huì)出現(xiàn)問(wèn)題的。但不要反復(fù)凍融。當(dāng)然如果是正常的ELISA試劑盒，應(yīng)該放在4℃左右冰箱保存。但要注意的是，如果將試劑盒剛從冰箱里面拿出來(lái)就立即使用的話(huà)，可能會(huì)影響，其直接的后果是對(duì)一些弱陽(yáng)性標(biāo)本的檢測(cè)出現(xiàn)假陰性。建議：先從冰箱中拿出來(lái)，在室溫下放置20分鐘以上后，再進(jìn)行測(cè)定，以使試劑盒在ELISA檢測(cè)試劑盒使用前與室溫平衡。這樣做的目的，主要是為了在后面的溫育反應(yīng)步驟中，能使
2023
11-25

尿素測(cè)定試劑盒在臨床診斷和研究中具有廣泛的應(yīng)用
尿素測(cè)定試劑盒在臨床診斷和研究中具有廣泛的應(yīng)用。在臨床方面，尿素測(cè)定可用于評(píng)估腎臟功能，尤其是腎小球?yàn)V過(guò)率的估計(jì)。此外，尿素測(cè)定還可用于監(jiān)測(cè)腎臟疾病、肝臟疾病、蛋白質(zhì)代謝紊亂等疾病的診斷和治療過(guò)程中的療效評(píng)估。在科研領(lǐng)域，尿可用于研究代謝過(guò)程、腎臟疾病機(jī)制、藥物代謝等方面的實(shí)驗(yàn)。它基于酶促反應(yīng)。通常，尿素測(cè)定試劑盒中包含一種尿素酶(urease)，它能夠催化尿液中的尿素與水分解為二氧化碳和氨。生成的氨與試劑盒中的某種指示劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生可測(cè)量的信號(hào)。根據(jù)不同的試劑盒，測(cè)定尿素的方法可以包括比
2023
11-24

抗體的保存條件有哪些？
你知道抗體的保存條件都有哪些嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、抗體的穩(wěn)定性抗體是免疫系統(tǒng)中最重要的分子之一，其穩(wěn)定性是自然進(jìn)化篩選的結(jié)果。在眾多物種中，抗體分子形成了保守而穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)，分子中70%氨基酸殘基(免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域)以beta片層(beta-sheet)形式堆疊，形成緊密并能耐受蛋白酶作用的“三明治"結(jié)構(gòu)，輕鏈和重鏈通過(guò)保守的二硫鍵形成具有三個(gè)結(jié)構(gòu)域的免疫球蛋白，大大提高了分子本身的穩(wěn)定性。抗體主要涉及化學(xué)或物理不穩(wěn)定性。化學(xué)不穩(wěn)定性是指多肽或蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)內(nèi)共價(jià)鍵的形成或破壞。蛋白質(zhì)化學(xué)失活機(jī)
2023
11-24

如何培養(yǎng)干細(xì)胞？
干細(xì)胞培養(yǎng)難度大，需要充足的營(yíng)養(yǎng)成分對(duì)其進(jìn)行支持，對(duì)于培養(yǎng)體系及試驗(yàn)人員的技術(shù)的也有更高的要求。那么我們?cè)撊绾闻囵B(yǎng)干細(xì)胞呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、飼養(yǎng)層培養(yǎng)飼養(yǎng)層培養(yǎng)法，先對(duì)飼養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，再將干細(xì)胞接種到飼養(yǎng)層細(xì)胞上，最后收獲所需的干細(xì)胞，該過(guò)程需要一周或更長(zhǎng)的培養(yǎng)時(shí)間。優(yōu)點(diǎn)：培養(yǎng)干細(xì)胞效果相對(duì)較好；缺點(diǎn)：實(shí)驗(yàn)流程冗雜，使用的試劑復(fù)雜，實(shí)驗(yàn)周期很長(zhǎng)，對(duì)實(shí)驗(yàn)人員的熟練度有較高要求。二、無(wú)飼養(yǎng)層培養(yǎng)法無(wú)飼養(yǎng)層培養(yǎng)法，直接培養(yǎng)干細(xì)胞，無(wú)需培養(yǎng)飼養(yǎng)層細(xì)胞。優(yōu)點(diǎn)：培養(yǎng)流程簡(jiǎn)單；缺點(diǎn)：需自行優(yōu)化培養(yǎng)
2023
11-24

如何選擇胎牛血清？
胎牛血清（FBS）是細(xì)胞培養(yǎng)中zui常用的補(bǔ)充培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必需的營(yíng)養(yǎng)成分，同時(shí)提供貼壁因子、解毒、蛋白酶抑制劑、保護(hù)細(xì)胞不受傷害等作用。雖然無(wú)血清培養(yǎng)技術(shù)得到快速發(fā)展，但許多細(xì)胞系未必適用，不能復(fù)制胎牛血清中存在的所有生長(zhǎng)因子，并且存在無(wú)血清培養(yǎng)基開(kāi)發(fā)費(fèi)用較高等缺點(diǎn)。那么我們?cè)撊绾芜x擇胎牛血清呢？讓我們一起來(lái)看看吧！目前，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)任何一種添加劑，能夠像胎牛血清一樣促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。這種細(xì)胞生長(zhǎng)的能力來(lái)自于豐富的血液相關(guān)生化物質(zhì)，這些生化物質(zhì)在胎兒成熟過(guò)程中，快速促進(jìn)細(xì)胞發(fā)育。盡管可以使

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