多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）在蛋白質(zhì)定量分析中的應(yīng)用檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

在生命科學(xué)研究和生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，dànbáizhì的定量分析對于理解生物過程、發(fā)現(xiàn)疾病標(biāo)志物及開發(fā)新型療法具有重要意義。多反應(yīng)監(jiān)測（Multiple Reaction Monitoring, MRM）作為基于質(zhì)譜技術(shù)的高特異性、高靈敏度定量方法，已成為目標(biāo)dànbáizhì定量分析的重要工具。

一、多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）技術(shù)概述

1、什么是多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）？

MRM是一種利用三重四極桿質(zhì)譜儀（Triple Quadrupole MS）進(jìn)行特定離子對（母離子→子離子）監(jiān)測的質(zhì)譜掃描模式。通過設(shè)定特定的離子轉(zhuǎn)化路徑，MRM可以在復(fù)雜生物樣品中選擇性地檢測目標(biāo)肽段，實(shí)現(xiàn)高靈敏度和高特異性的定量分析。

2、MRM的工作原理簡述

MRM模式通常涉及三步篩選過程：dìyī四極桿（Q1）篩選目標(biāo)母離子，碰撞池（q2）誘導(dǎo)母離子碎裂，第二四極桿（Q3）篩選特定的子離子。只有符合預(yù)設(shè)質(zhì)量-質(zhì)量對（mass transition）的離子才被記錄，大幅度降低了背景噪音，提高了檢測靈敏度和定量準(zhǔn)確性。

二、多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）在dànbáizhì定量分析中的優(yōu)勢

1、高特異性和高靈敏度

通過選擇性監(jiān)測特定的離子轉(zhuǎn)化路徑，MRM能夠有效區(qū)分目標(biāo)肽段與其他背景分子，實(shí)現(xiàn)亞飛摩爾（attomole）級(jí)別的檢測限。這一特性使其尤其適合分析低豐度dànbáizhì和復(fù)雜生物基質(zhì)樣本。

2、廣泛的動(dòng)態(tài)范圍

MRM可實(shí)現(xiàn)4~5個(gè)數(shù)量級(jí)的動(dòng)態(tài)檢測范圍，覆蓋從高豐度到低豐度dànbáizhì的定量需求，特別適用于血漿、組織提取物等復(fù)雜樣品中多靶點(diǎn)分析。

3、高重復(fù)性和定量準(zhǔn)確性

得益于穩(wěn)定的離子監(jiān)測模式和內(nèi)源性/外源性標(biāo)準(zhǔn)的引入，MRM在多批次實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出良好的重復(fù)性，且具備juéduì定量的潛力，為生物標(biāo)志物驗(yàn)證和臨床研究提供可靠的數(shù)據(jù)支持。

三、多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）在不同dànbáizhì定量應(yīng)用中的實(shí)踐

1、靶向dànbáizhì組學(xué)研究

在探索疾病機(jī)制、藥物反應(yīng)及信號(hào)通路調(diào)控過程中，科研人員常常需要驗(yàn)證篩選出的候選dànbáizhì。MRM技術(shù)因其高通量、定量jīngquè的特點(diǎn)，已成為驗(yàn)證階段bùkěhuòquē的工具。例如，在腫瘤標(biāo)志物研究中，MRM可以對幾十至上百個(gè)候選dànbáizhì進(jìn)行同步定量，極大加快了候選分子的驗(yàn)證速度。

2、臨床生物標(biāo)志物驗(yàn)證

相比Discovery Proteomics，MRM提供了更具臨床可轉(zhuǎn)化潛力的定量數(shù)據(jù)。在心血管疾病、腫瘤及自身免疫性疾病的標(biāo)志物開發(fā)中，MRM被廣泛應(yīng)用于大規(guī)模隊(duì)列樣本的驗(yàn)證階段，如jīngquè定量血漿中的低豐度dànbáizhì（如細(xì)胞因子、炎癥因子）。

3、藥物作用機(jī)制研究

在藥物研發(fā)過程中，理解藥物與靶點(diǎn)dànbáizhì之間的相互作用至關(guān)重要。MRM可用于監(jiān)測藥物處理前后靶蛋白水平的變化，幫助解析藥效機(jī)制及耐藥性發(fā)展過程。例如，通過MRM定量藥物暴露后細(xì)胞系中特定信號(hào)通路蛋白表達(dá)的變化，可直觀反映藥物的作用效果。

4、多重靶點(diǎn)同步檢測

MRM能夠同時(shí)監(jiān)測多個(gè)靶蛋白，且無需依賴抗體資源，提高了實(shí)驗(yàn)效率和數(shù)據(jù)通量。近年來，基于MRM的多靶點(diǎn)蛋白定量方法被廣泛應(yīng)用于感染性疾病、多發(fā)病種的綜合診斷與生物標(biāo)志物面板的開發(fā)。

四、如何優(yōu)化MRMdànbáizhì定量實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)？

1、合理選擇目標(biāo)肽段（Surrogate Peptides）

選擇具有代表性、穩(wěn)定性好、wúxiū飾且易離子化的肽段是成功進(jìn)行MRM定量的前提。通常，每個(gè)目標(biāo)蛋白需要篩選2~3個(gè)高質(zhì)量的代表肽段以確保數(shù)據(jù)可靠性。

2、優(yōu)化離子對選擇與參數(shù)設(shè)置

每個(gè)肽段應(yīng)至少選擇2~3個(gè)高響應(yīng)、低背景的子離子進(jìn)行監(jiān)測（即transition），同時(shí)優(yōu)化碰撞能量（Collision Energy）等質(zhì)譜參數(shù)，以獲得zuì佳的信噪比。

3、使用穩(wěn)定同位素標(biāo)記內(nèi)標(biāo)

引入穩(wěn)定同位素標(biāo)記肽（SIS peptides）作為內(nèi)標(biāo)，能夠有效糾正樣本處理、離子化效率及儀器波動(dòng)等引入的誤差，從而實(shí)現(xiàn)更為準(zhǔn)確的juéduì定量。

4、規(guī)范化樣品前處理流程

樣品制備的標(biāo)準(zhǔn)化直接影響MRM定量的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。統(tǒng)一的dànbáizhì提取、酶解、純化和濃縮步驟，結(jié)合質(zhì)量控制樣品（QC sample）的引入，是確保實(shí)驗(yàn)可靠性的關(guān)鍵。

隨著dànbáizhì定量分析日益精細(xì)化和高通量化，多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）以其zhuóyuè的特異性、靈敏度與穩(wěn)定性，成為科研人員與生物醫(yī)藥企業(yè)bùkěhuòquē的技術(shù)利器。百泰派克生物科技不斷優(yōu)化質(zhì)譜平臺(tái)與定量方法學(xué)開發(fā)，為全球科研人員提供高質(zhì)量、高可靠性的定量蛋白組分析服務(wù)，助力科學(xué)發(fā)現(xiàn)與臨床應(yīng)用的每一步。

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務(wù)，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務(wù)，對蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學(xué)、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.技術(shù)優(yōu)良，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題?？稍趩渭?xì)胞層面上對多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測51個(gè)目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測平臺(tái)

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查，軟件審計(jì)追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務(wù)；

2.獲國家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺(tái)，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

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