概述
一般而言，反相，離子交換/尺寸排阻色譜方法常用于糧食中的有機(jī)酸分析。
反相色譜中，常用ODS柱，使用酸性洗脫液抑制有機(jī)酸和固定相之間的離子相互作用。
盡管采用了這種洗脫條件，當(dāng)實(shí)際樣品直接注入色譜柱時(shí)，在色譜圖上也常出現(xiàn)異常的峰形。
我們調(diào)查了在TOSOH IC-2010離子色譜系統(tǒng)有機(jī)酸峰形異常的問題。
本文討論了在不同的實(shí)際樣品中色譜條件對提高有機(jī)酸峰形的影響。
 
實(shí)驗(yàn)
色譜柱
分析柱：TSKgel ODS-100V，3um，4.6mmID*15cm
預(yù)柱：TSKgel SCX，5um，H型，4.6mmID*2cm
分析柱由日本Tosoh生產(chǎn)，預(yù)柱由Tosoh國內(nèi)自制。
儀器
儀器：離子色譜IC-2010 (Tosoh，日本)，UV-8320IC (Tosoh)
數(shù)據(jù)處理：離子色譜工作站(Tosoh)
化學(xué)品和試劑
洗脫條件中的水以及樣品制備均使用Milli-Q水純化系統(tǒng)　(密里博，日本)
洗脫溶劑和有機(jī)酸標(biāo)準(zhǔn)品從Wako 標(biāo)準(zhǔn)品公司采購　(日本)
增強(qiáng)型樹脂采用由TSKgel 抑制型IC-A制備的陽離子交換樹脂　(Tosoh)
 
1: TSKgel ODS-100V色譜柱上有機(jī)酸的異常峰形 

 
樣品
1：酒石酸(250mg/l)　　2：甲醇(500mg/l)
3：蘋果酸(500mg/l)　　4：乳酸(500mg/l)
5：醋酸(250mg/l)　　　6：檸檬酸(250mg/l)
7：丁二酸(250mg/l)　　8：反丁烯二酸(250mg/l)
9：丙酸(1000mg/l)　　　10：丁酸(250mg/l)
 
條件
色譜柱：TSKgel ODS-100V 3um，4.6mmID*15cm
洗脫液：0.1%H₃PO₄樣品溶劑：水
流速：　1.0ml/min         溫度：40℃     
進(jìn)樣量：30ul           　檢測器:UV210nm      
儀器:　IC-2010和UV-8320IC


2: 樣品濃度對峰型的影響 

 


3: 抑制超載 

 


4: 改善峰型 , 提高選擇型 

 
5: 實(shí)際樣品 



1：在有機(jī)酸分析時(shí)，使用ODS反相柱要比其他色譜方法更容易顯示超載趨勢。
2：使用酸性溶劑制備樣品，可以有效抑制超載，可以控制樣品溶液中的有機(jī)酸與固定相中的離解平衡更趨于標(biāo)準(zhǔn)的疏水作用。
3：使用H型陽離子交換樹脂作為預(yù)柱也可以有效抑制超載。
4：使用SCX樹脂做預(yù)柱沒有降低ODS色譜柱分離性能。
5：此外，具有高Pka值的有機(jī)酸，可以在檢測樣品前使用鉀型陽離子交換樹脂，使電導(dǎo)檢測時(shí)靈敏度和選擇性更高。
6：本文提供的方法可以應(yīng)用于糧食中有機(jī)酸的檢測