WBR0204 Bradford蛋白濃度測定試劑盒
參考價 | ¥ 100 |
訂貨量 | ≥1 |
- 公司名稱 福因德科技(武漢)有限公司
- 品牌
- 型號 WBR0204
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2015/11/16 11:21:10
- 訪問次數(shù) 227
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Bradford蛋白濃度測定試劑盒
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
WBR0204 | Bradford蛋白濃度測定試劑盒 | 1000T |
1.產(chǎn)品簡介:
Bradford蛋白濃度測定試劑盒(Bradford Protein Assay Kit)是根據(jù)zui常用的兩種蛋白濃度檢測方法之一Bradford法研制而成,實現(xiàn)了蛋白濃度測定的快速,穩(wěn)定和高靈敏度。檢測速度極快,10-80個樣品只需不足10 min即可完成。靈敏度高,檢測濃度下限達到25 μg/ml,zui小檢測蛋白量達到0.5 μg,待測樣品體積為1-20 μl。在50-1000 μg/ml濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系。Bradford法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響。但受略高濃度的去垢劑影響。需確保SDS低于0.01%,Triton X-100低于0.05%,Tween 20、60、80低于0.015%。含去垢劑的樣品*使用我們生產(chǎn)的BCA蛋白濃度測定試劑盒(WB0123)。每個試劑盒可以檢測1000個樣品。
2.包裝清單:
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
WBR0204-1 | Bradford蛋白濃度測定染液 | 100ml x 2 |
WBR0204-2 | 蛋白標準(5 mg/ml BSA) | 1ml |
— | 說明書 | 1份 |
3.保存條件:Bradford蛋白濃度測定染液4℃保存,蛋白標準-20℃保存,保存一年內(nèi)有效。
4.使用方法:
4.1標準品的制備
A. 牛血清白蛋白標準品稀釋液的制備
標準試管法和標準微孔板法標準品的稀釋(檢測范圍=100-1,500 μg/ml) | |||
管號 | 稀釋液體積 | BSA標準品體積 | 終濃度 |
A | 600 μl | 400 μl (從5 mg/ml管取) | 2,000 μg/ml |
B | 125 μl | 375 μl (從A管取) | 1,500 μg/ml |
C | 250 μl | 250 μl (從A管取) | 1,000 μg/ml |
D | 175 μl | 175 μl (從B管取) | 750 μg/ml |
E | 325 μl | 325 μl (從C管取) | 500 μg/ml |
F | 325 μl | 325 μl (從E管取) | 250 μg/ml |
G | 325 μl | 325 μl (從F管取) | 125 μg/ml |
H | 400 μl | 100 μl of (從G管取) | 25 μg/ml |
I | 400 μl | 0 | 0 μg/ml (空白孔) |
微量試管法和微量微孔板法標準品的稀釋(檢測范圍= 1-25 μg/ml) | |||
管號 | 稀釋液體積 | BSA標準品體積 | 終濃度 |
A | 3,950 μl | 50μl(從5 mg/ml管取) | 25 μg/ml |
B | 800 μl | 3200 μl (從A管取) | 20 μg/ml |
C | 1,000 μl | 3000 μl (從B管取) | 15 μg/ml |
D | 1,000 μl | 2,000 μl(從C管取) | 10 μg/ml |
E | 1,500 μl | 1,500 μl(從D管取) | 5 μg/ml |
F | 1,500 μl | 1,500 μl(從E管取) | 2.5 μg/ml |
G | 4,000 μl | 0 | 0 μg/ml(空白孔) |
4.2試管測定法
A.標準試管測定法(檢測范圍=100-1,500 μg/ml)
1) 各取0.05 ml的標準品和未知樣品至相應(yīng)標記的測試管中。
2) 滴加1.5 ml Bradford蛋白濃度測定染液至每管中并充分混勻。
3) 可選參考: 對于大多數(shù)情況,在室溫下孵育樣品10 min。
4) 設(shè)置分光光度計值于595 nm并將儀器調(diào)零。然后檢測所有樣品的吸收值。
5) 將所有標準品及未知樣品的數(shù)值中減去595 nm下零孔所對應(yīng)的平均值。
6) 繪制標準曲線:通過零孔平均值校正每個BSA標準品在其相應(yīng)濃度下所對應(yīng)的數(shù)值。再用此標準曲線判斷得出每個未知樣品的蛋白濃度。
B.微量試管測定法(檢測范圍= 1-25 μg/ml)
1) 各取1.0 ml的標準品和未知樣品至相應(yīng)標記的測試管中。
2) 滴加1.0 ml Bradford蛋白濃度測定染液至每管中并充分混勻。
3) 可選參考: 對于大多數(shù)情況,在室溫下孵育樣品10 min。
4) 設(shè)置分光光度計值于595 nm并將儀器調(diào)零。然后檢測所有樣品的吸收值。
5) 將所有標準品及未知樣品的數(shù)值中減去595 nm下零孔所對應(yīng)的平均值。
6) 繪制標準曲線:通過零孔平均值校正每個BSA標準品在其相應(yīng)濃度下所對應(yīng)的數(shù)值。再用此標準曲線判斷得出每個未知樣品的蛋白濃度。
4.3微孔板測定法
A.標準微孔板測定法(檢測范圍=100-1,500 μg/ml)
1) 各取10 μl的標準品和未知樣品至相應(yīng)標記的微孔板中。
2) 滴加300 μlBradford蛋白濃度測定染液至每孔混勻并充分震蕩30 s。
3) 停止震蕩。對于大多數(shù)情況,在室溫下孵育樣品10 min。
4) 在讀數(shù)儀器中測量595 nm時的吸光值。
5) 將所有標準品及未知樣品的數(shù)值中減去595 nm下零孔所對應(yīng)的平均值。
7) 繪制標準曲線:通過零孔平均值校正每個BSA標準品在其相應(yīng)濃度下所對應(yīng)的數(shù)值。再用此標準曲線判斷得出每個未知樣品的蛋白濃度。
B.微量微孔板測定法(檢測范圍= 1-25 μg/ml)
1) 各取150 μl的標準品和未知樣品至相應(yīng)標記的微孔板中。
2) 滴加150 μl Bradford蛋白濃度測定染液至每孔混勻并充分震蕩30 s。
3) 停止震蕩。對于大多數(shù)情況,在室溫下孵育樣品10 min。
4) 在讀數(shù)儀器中測量595 nm時的吸光值。
5) 將所有標準品及未知樣品的數(shù)值中減去595 nm下零孔所對應(yīng)的平均值。
8) 繪制標準曲線:通過零孔平均值校正每個BSA標準品在其相應(yīng)濃度下所對應(yīng)的數(shù)值。再用此標準曲線判斷得出每個未知樣品的蛋白濃度。
5.注意事項:
1) 將G250染液回復(fù)到室溫再使用,有利于提高檢測的靈敏度,G250染液使用前請顛倒3-5次,混勻。
2) 蛋白標準請在全部溶解后先混勻,再稀釋成一系列不同濃度的蛋白標準。
3) 為了測試準確,請在試劑加入后的5-20 min內(nèi)測定光吸收,因為在這段時間內(nèi)顏色是zui穩(wěn)定的。
4) 有些陽離子,如K+、Na+、Mg2+、(NH4)2SO4、乙醇等物質(zhì)不干擾測定,但大量的去污劑如TritonX-100、SDS等嚴重干擾測定。
5)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
*本試劑僅供實驗室研究使用
若有需求請在詢價詳細說明里面標注您的