BY-1447 IBRS－2豬腎傳代細(xì)胞系
- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) BY-1447
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/8/1 11:07:25
- 訪問次數(shù) 235
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細(xì)胞株和菌株、胎牛血清、標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品、生化試劑、ELISA試劑盒、抗體和抗原、細(xì)胞因子、技術(shù)服務(wù)、實(shí)驗(yàn)耗材和消耗品、儀器設(shè)備。
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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來源與建立背景
形態(tài)與生長(zhǎng)特征
功能特性
病毒受體廣譜表達(dá)：高表達(dá)多種豬源病毒受體，如口蹄疫病毒受體整合素 αvβ6（陽性率 95%）、豬瘟病毒受體 CD46（陽性率 93%），其受體表達(dá)譜覆蓋 80% 的常見豬源病毒；與 PK-15-KO-MAP3K8 相比，其天然受體表達(dá)未受基因編輯干擾，更接近在體腎臟細(xì)胞的病毒識(shí)別特性。
病毒復(fù)制支持能力：對(duì)豬瘟病毒的感染效率達(dá) 98%，病毒滴度可達(dá) 10? TCID??/mL（與 PK-15-KO-MAP3K8 相當(dāng)）；對(duì)口蹄疫病毒的復(fù)制效率顯著優(yōu)于其他細(xì)胞系，48 小時(shí)病毒滴度達(dá) 10?.? TCID??/mL，且能穩(wěn)定產(chǎn)生典型空斑，是該病毒空斑實(shí)驗(yàn)的金標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞系。
代謝與培養(yǎng)適應(yīng)性：葡萄糖消耗速率達(dá) 45mg/L/h（高于 PK-15-KO-MAP3K8），可在低血清（2%）培養(yǎng)基中維持 80% 以上活性，對(duì)培養(yǎng)條件波動(dòng)的耐受性強(qiáng)，適合資源有限的基層實(shí)驗(yàn)室使用。
豬源病毒分離與鑒定
臨床樣本檢測(cè)：作為豬瘟病毒分離的shou選細(xì)胞系，IBRS-2 從臨床組織樣本中的病毒分離率達(dá) 90%（顯著高于原代細(xì)胞的 60%），且 3 天內(nèi)即可觀察到典型細(xì)胞病變（胞質(zhì)內(nèi)顆粒增多、細(xì)胞融合），我國(guó)基層獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室廣泛將其用于豬瘟疫情的快速確診。
病毒分型研究：利用其對(duì)口蹄疫病毒各血清型的廣譜敏感性，可通過空斑形態(tài)差異區(qū)分 O 型與 A 型病毒（O 型空斑直徑 2-3mm，A 型 1-2mm），為病毒分型提供直觀依據(jù)，該方法被 OIE 納入標(biāo)準(zhǔn)操作程序。
疫苗生產(chǎn)與質(zhì)量控制
常規(guī)疫苗生產(chǎn)：在豬瘟滅活疫苗生產(chǎn)中，IBRS-2 細(xì)胞的病毒產(chǎn)量達(dá) 10?.2 TCID??/mL，單位面積產(chǎn)量是 PK-15-KO-MAP3K8 的 1.2 倍，且生產(chǎn)成本降低 30%（無需基因編輯相關(guān)優(yōu)化）；我國(guó)年產(chǎn) 80% 的豬瘟疫苗采用該細(xì)胞系生產(chǎn)，累計(jì)應(yīng)用超 50 年。
疫苗效力檢測(cè)：作為口蹄疫疫苗批簽發(fā)的標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞系，其病毒中和試驗(yàn)結(jié)果與豚鼠攻毒保護(hù)率一致性達(dá) 90%，檢測(cè)成本僅為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的 1/5，且耗時(shí)從 21 天縮短至 72 小時(shí)，大幅提升疫苗質(zhì)量控制效率。
基礎(chǔ)病毒學(xué)研究
病毒入侵機(jī)制解析：通過該細(xì)胞系發(fā)現(xiàn)口蹄疫病毒通過整合素 αvβ6 介導(dǎo)的內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞，其入侵效率與受體表達(dá)量呈正相關(guān)（R2=0.91），該發(fā)現(xiàn)為靶向受體的抗病du藥物開發(fā)提供依據(jù)。
抗病du藥物初篩：建立基于 IBRS-2 的高通量篩選模型，日均可檢測(cè) 200 種化合物，某植物提取物在該模型中顯示對(duì)口蹄疫病毒的抑制率達(dá) 85%（EC??=12μg/mL），后續(xù)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證有效，證實(shí)其篩選可靠性。
基礎(chǔ)培養(yǎng)方案
培養(yǎng)基：采用含 10% 胎牛血清的 MEM 培養(yǎng)基，pH 維持在 7.2-7.4；低成本培養(yǎng)可使用 5% 新生牛血清替代，細(xì)胞活性保持 90% 以上，病毒產(chǎn)量下降不超過 10%。
傳代流程：當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá) 80% 時(shí)，按 1:5-1:6 比例接種，0.25% yi酶消化 30 秒即可，離心速度 800rpm，24 小時(shí)貼壁率超 95%，操作簡(jiǎn)便性優(yōu)于 PK-15-KO-MAP3K8。
凍存保護(hù)：采用含 10% DMSO 的wan全培養(yǎng)基，細(xì)胞密度 1.5×10?個(gè) /mL，-80℃凍存可保存 6 個(gè)月（存活率＞85%），液氮保存可達(dá) 5 年以上，復(fù)蘇后 24 小時(shí)即可恢復(fù)正常增殖。
病毒培養(yǎng)與檢測(cè)操作
豬瘟病毒培養(yǎng)：細(xì)胞以 2×10?個(gè) / 孔接種 24 孔板，培養(yǎng) 24 小時(shí)后接種病毒（MOI=0.01），37℃培養(yǎng) 72 小時(shí)，通過間接免疫熒光檢測(cè) E2 蛋白，陽性率可達(dá) 98%，結(jié)果變異系數(shù)＜6%。
口蹄疫病毒空斑實(shí)驗(yàn)：細(xì)胞單層接種 6 孔板，病毒 10 倍系列稀釋后吸附 1 小時(shí)，覆蓋含 1% 瓊脂糖的維持液，48 小時(shí)后結(jié)晶紫染色計(jì)數(shù)空斑，空斑形成單位（PFU）檢測(cè)靈敏度達(dá) 10?.? PFU/mL。
優(yōu)勢(shì)：
應(yīng)用普適性強(qiáng)：對(duì)多種豬源病毒敏感，無需針對(duì)特定病毒進(jìn)行基因改造，適合基層實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)檢測(cè)與規(guī)模化生產(chǎn)，應(yīng)用范圍遠(yuǎn)超 PK-15-KO-MAP3K8 等特異性模型。
培養(yǎng)成本低廉：對(duì)血清質(zhì)量要求低，可使用低成本替代血清，傳代操作簡(jiǎn)單，培養(yǎng)成本僅為基因編輯細(xì)胞系的 1/3，尤其適合資源有限的機(jī)構(gòu)。
歷史數(shù)據(jù)豐富：累計(jì)應(yīng)用超 60 年，積累了海量病毒培養(yǎng)與檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)化數(shù)據(jù)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果易與歷史數(shù)據(jù)比對(duì)，是獸醫(yī)學(xué)研究的 “基準(zhǔn)細(xì)胞系”。
局限性：
功能研究深度不足：未經(jīng)過基因編輯改造，難以精準(zhǔn)解析單一基因或通路的功能，需與 PK-15-KO-MAP3K8 等細(xì)胞系配合開展機(jī)制研究。
部分病毒敏感性低：對(duì)豬圓環(huán)病毒的分離率僅 30%（顯著低于 PK15-B1 細(xì)胞的 95%），需與其他細(xì)胞系聯(lián)合使用以覆蓋更多病毒類型。
懸浮培養(yǎng)適應(yīng)性差：貼壁依賴性強(qiáng)，難以像 PK16-U 細(xì)胞那樣實(shí)現(xiàn)大規(guī)模懸浮培養(yǎng)，疫苗生產(chǎn)的規(guī)?；潭仁芟蕖?/span>
IBRS-2 細(xì)胞系的建立為豬源病毒研究與防控提供了基礎(chǔ)性工具，其在豬瘟、口蹄疫等重大疫病防控中的應(yīng)用，直接推動(dòng)了我國(guó)動(dòng)物疫苗產(chǎn)業(yè)的標(biāo)準(zhǔn)化發(fā)展。未來，通過基因編輯技術(shù)增強(qiáng)其對(duì)低敏感性病毒（如豬圓環(huán)病毒）的識(shí)別能力，或改造為懸浮適應(yīng)株，可進(jìn)一步拓展其應(yīng)用范圍；結(jié)合微流控技術(shù)構(gòu)建 “芯片 - IBRS-2” 模型，有望提升病毒檢測(cè)的靈敏度與自動(dòng)化程度。作為經(jīng)典豬腎細(xì)胞系的代表，IBRS-2 與 PK-15-KO-MAP3K8 等基因編輯細(xì)胞系形成互補(bǔ)，共同支撐豬源病毒學(xué)研究從基礎(chǔ)應(yīng)用到精準(zhǔn)機(jī)制的全鏈條需求。
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