BY-0605 Hepa1-6小鼠肝癌細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0605
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/7/8 14:35:26
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Hepa1-6小鼠肝癌細胞系
Hepa1-6小鼠肝癌細胞系源自 C57BL/6 小鼠的自發(fā)性肝癌，因保留肝癌的核心生物學特征且成瘤性穩(wěn)定，成為肝癌研究領(lǐng)域的經(jīng)典模型。其在病理特征、分子機制上與人類肝癌高度相似，為肝癌的發(fā)生發(fā)展、藥物篩選及相關(guān)研究提供了理想工具。
顯微鏡下，Hepa1-6 細胞呈貼壁生長，形態(tài)以多邊形和上皮樣為主，宛如鋪展在培養(yǎng)皿上的 “不規(guī)則薄片”。細胞直徑約 18-25 微米，比正常肝細胞稍大；胞質(zhì)豐富，可見散在的脂滴 —— 這是肝癌細胞的典型胞質(zhì)特征，經(jīng)油紅 O 染色后呈橘紅色，清晰可辨；細胞核大而圓，位于細胞中央或偏位，核質(zhì)比約 1:1.2，染色質(zhì)呈粗顆粒狀，核仁明顯，常為 2-3 個，展現(xiàn)出活躍的增殖能力。細胞倍增時間約 24-36 小時，當融合度達到 70%-80% 時需傳代，傳代時用 EDTA 溶液處理后輕柔吹打使細胞脫落，按 1:4-1:6 比例接種，連續(xù)培養(yǎng) 50 代仍能保持穩(wěn)定的腫瘤表型。
培養(yǎng) Hepa1-6 細胞需模擬肝臟微環(huán)境?；A(chǔ)培養(yǎng)基選用 DMEM（高糖），其含有的高濃度葡萄糖可滿足肝癌細胞旺盛的代謝需求；添加 10% 熱滅活胎牛血清提供生長因子，其中血清中的胰島素樣生長因子 - 1（IGF-1）對維持細胞的增殖活性至關(guān)重要。培養(yǎng)環(huán)境需嚴格控制在 37℃、5% CO?的恒溫培養(yǎng)箱中，pH 值穩(wěn)定在 7.2-7.4，通過培養(yǎng)基中的酚紅指示劑可直觀監(jiān)測酸堿變化。與其他肝癌細胞系相比，該細胞對培養(yǎng)條件要求較為寬松，但需避免培養(yǎng)基過度酸化，建議每 2-3 天更換一次培養(yǎng)基，以保持細胞活力。
在肝癌發(fā)病機制研究中，Hepa1-6 細胞系是解析基因突變與腫瘤進展關(guān)系的理想工具。其攜帶 p53 基因突變 —— 這與人類肝癌中常見的功能失活突變高度一致。實驗顯示，該細胞在 DNA 損傷條件下，p53 蛋白無法正常激活，導致細胞周期檢查點失靈，細胞持續(xù)增殖。通過導入野生型 p53 基因后，細胞的凋亡率增加 40%，克隆形成能力下降 50%，裸鼠成瘤體積縮小 60%，直接證明 p53 突變在肝癌發(fā)生中的驅(qū)動作用。此外，該細胞還存在 β- 連環(huán)蛋白基因異常，導致其在胞質(zhì)和細胞核內(nèi)積累，激活下游靶基因的表達，模擬了人類肝癌中 Wnt 信號通路異常激活的特征。
在藥物篩選領(lǐng)域，Hepa1-6 細胞系是評估抗肝癌藥物療效的常用模型。其對多種經(jīng)典藥物的敏感性與人類肝癌組織接近，可通過 MTT 法快速檢測藥物對細胞增殖的抑制率。在篩選新型靶向藥物時，該細胞系能有效反映藥物對特定靶點的作用，例如，使用抗 VEGFR 單克隆抗體處理后，細胞的血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）分泌量下降 70%，細胞遷移能力降低 55%，為評估 VEGFR 抑制劑的療效提供了可靠依據(jù)。同時，該細胞系可用于構(gòu)建荷瘤小鼠模型，通過測量腫瘤體積變化和計算抑瘤率，評估藥物的體內(nèi)療效。
在腫瘤免疫研究中，Hepa1-6 細胞系的免疫原性特征使其成為免疫相關(guān)研究的理想模型。該細胞表達多種腫瘤相關(guān)抗原，如甲胎蛋白（AFP）和熱休克蛋白 90（HSP90），可被免疫系統(tǒng)識別。其荷瘤小鼠模型具有完整的免疫系統(tǒng)，能模擬人類肝癌的腫瘤免疫微環(huán)境，例如，腫瘤微環(huán)境中存在大量巨噬細胞和調(diào)節(jié)性 T 細胞，可抑制效應 T 細胞的抗腫瘤活性。在免疫檢查點抑制劑研究中，使用抗 CTLA-4 抗體處理荷瘤小鼠，可使腫瘤內(nèi) CD8?T 細胞浸潤增加 2 倍以上，腫瘤生長抑制率達 45%，為免疫機制研究提供了良好模型。
在腫瘤轉(zhuǎn)移研究中，Hepa1-6 細胞系因具有穩(wěn)定的轉(zhuǎn)移潛能而被廣泛應用。通過尾靜脈注射可建立肺轉(zhuǎn)移模型，該細胞在肺部形成轉(zhuǎn)移性結(jié)節(jié)的轉(zhuǎn)移率達 50% 以上，轉(zhuǎn)移灶的病理特征與人類肝癌肺轉(zhuǎn)移相似。研究發(fā)現(xiàn)，該細胞高表達基質(zhì)金屬蛋白酶 - 2（MMP-2），可降解基底膜成分，促進腫瘤細胞侵襲和轉(zhuǎn)移，抑制 MMP-2 活性可使細胞的侵襲能力下降 50%，肺轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)數(shù)量減少 60%，為開發(fā)抗轉(zhuǎn)移藥物提供了潛在靶點。
前沿研究中，Hepa1-6 細胞系的應用持續(xù)拓展。在類器官構(gòu)建中，將其與肝星狀細胞、內(nèi)皮細胞共培養(yǎng)，可形成具有肝臟組織結(jié)構(gòu)的三維腫瘤模型，更真實地模擬體內(nèi)腫瘤微環(huán)境；在單細胞測序研究中，解析其異質(zhì)性亞群，發(fā)現(xiàn)高表達 CD133 的細胞亞群具有更強的成瘤能力和耐藥性，為識別肝癌干細胞提供了標志物；在基因編輯領(lǐng)域，利用 CRISPR 技術(shù)敲入熒光蛋白基因，可實時追蹤腫瘤細胞在體內(nèi)的轉(zhuǎn)移路徑，為研究轉(zhuǎn)移機制提供可視化工具。
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