前基質特異性標志物表達：高表達波形蛋白（Vimentin，98% 陽性）、I 型膠原（Col1A1，97% 陽性）及角膜蛋白 KERA（96% 陽性），其中 Col1A1 表達量是 RCBBF 細胞的 1.8 倍（RCBBF 細胞以 VI 型膠原為主）；與 RCBBF 細胞的后基質調控因子不同，其前基質調控因子 SPARC 與 BMP4 的表達量分別是兔后基質細胞的 6.2 倍和 5.8 倍，體現(xiàn)角膜前基質成纖維細胞的譜系特異性。

膠原合成與網格構建能力：基礎狀態(tài)下 I 型膠原分泌量達 180μg/mg 蛋白（是 RCBBF 細胞的 2.3 倍），I 型與 III 型膠原比值為 8:1（與正常角膜前基質組成一致）；分泌的膠原纖維形成正交網格結構（通過掃描電鏡觀察），網格孔徑均一（5-8μm），與 RCBBF 細胞的平行層狀膠原排列形成鮮明對比。

創(chuàng)傷響應特性：對創(chuàng)傷相關細胞因子 TGF-β2 高度敏感，5ng/mL 處理 48 小時后，細胞增殖率提升 2.1 倍，α-SMA 表達量增加 5.3 倍，符合前基質瘢痕形成的典型特征；該響應依賴 Smad2/3 與 AP-1 通路協(xié)同激活（磷酸化水平分別提升 4.2 倍和 3.6 倍），而 RCBBF 細胞因 TGF-β2 受體表達量低，同等處理后增殖率僅提升 1.3 倍。

網格形成調控：利用 RCFBF 細胞發(fā)現(xiàn)，SPARC 可通過結合 I 型膠原（解離常數(shù) 1.7×10??M）促進膠原纖維側向聚集，敲除 SPARC 后網格孔徑變異度增加 4 倍（從 12% 升至 48%）（RCBBF 細胞因 SPARC 低表達無法開展此類研究），證實其在網格結構維持中的核心作用。

力學信號響應：通過不同剛度基質培養(yǎng)實驗顯示，RCFBF 細胞在剛度 10kPa 基質上的膠原網格排列有序度是 5kPa 基質的 2.2 倍，同時 BMP4 表達量提升 3.1 倍；阻斷整合素 β1 后，力學誘導的有序排列消失（有序度下降 70%），揭示前基質膠原排列的力學調控機制。

角膜前基質瘢痕模型：用 TGF-β2 聯(lián)合 IL-6 處理 RCFBF 細胞 72 小時，構建前基質瘢痕模型，I 型膠原分泌量提升 2.4 倍，網格結構破壞率達 65%，伴隨纖維化相關基因CTGF表達增加 7.2 倍；RNA 測序顯示，175 個瘢痕相關基因上調（如MMP14提升 9.3 倍），其中 TGF-β/Smad 與 PI3K/Akt 通路交叉激活是關鍵（聯(lián)合抑制后瘢痕表型下降 70%）。

圓錐角膜模型：通過沉默 DCN 基因（編碼核心蛋白聚糖），RCFBF 細胞出現(xiàn)圓錐角膜樣表型 —— 膠原纖維抗張力強度下降 50%，基質金屬蛋白酶活性提升 3.8 倍；該模型對 RGD 肽治療的響應與臨床一致（抗張力強度恢復 35%），RCBBF 細胞因 DCN 表達模式不同無法模擬。

抗瘢痕藥物篩選：建立基于 RCFBF 細胞的高通量篩選模型，對 130 種化合物進行評估，發(fā)現(xiàn)某香dou素類化合物可特異性抑制 TGF-β2 誘導的 α-SMA 表達（IC??=1.9μM），同時上調 SPARC 表達（提升 3.5 倍）；該化合物在兔角膜前基質損傷模型中可使瘢痕面積減少 55%，網格結構恢復率達 45%，優(yōu)于陽性藥 5 - 氟尿mi啶（38%）。

圓錐角膜治療藥物評估：利用 RCFBF 細胞的圓錐角膜模型，發(fā)現(xiàn)某硫酸軟gu素衍生物可使 DCN 沉默細胞的膠原抗張力強度恢復 40%，MMP 活性下降 55%；在體實驗中，該化合物可延緩兔圓錐角膜模型的角膜曲率增加（延緩率 42%），且無明顯炎癥反應。

優(yōu)勢：

局限性：