BY-1454 SEP-K1小耳豬腎細(xì)胞系
- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) BY-1454
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/7/29 14:46:43
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細(xì)胞株和菌株、胎牛血清、標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品、生化試劑、ELISA試劑盒、抗體和抗原、細(xì)胞因子、技術(shù)服務(wù)、實(shí)驗(yàn)耗材和消耗品、儀器設(shè)備。
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來(lái)源與建立背景
形態(tài)與生長(zhǎng)特征
功能特性
腎特異性標(biāo)志物與修復(fù)因子：高表達(dá)腎臟特異性標(biāo)志物，如腎損傷分子 1（KIM-1，陽(yáng)性率 96%）、鈉葡萄糖共轉(zhuǎn)運(yùn)體 2（SGLT2，陽(yáng)性率 95%），其 KIM-1 在損傷后表達(dá)量可提升 5 倍（SSC-S5 無(wú)此特性）；分泌肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（HGF）和表皮生長(zhǎng)因子（EGF），其中 HGF 含量達(dá) 35pg/10?細(xì)胞 / 天，能促進(jìn)腎上皮細(xì)胞遷移（遷移速率是靜止期細(xì)胞的 2.1 倍），模擬腎臟損傷后的修復(fù)啟動(dòng)過(guò)程，與小耳豬腎損傷組織的功能一致性達(dá) 90%。
離子轉(zhuǎn)運(yùn)與代謝功能：具有活躍的鈉鉀離子轉(zhuǎn)運(yùn)能力，Na?/K?-ATPase 活性達(dá) 18μmol Pi/mg 蛋白 /h（顯著高于 SSC-S5），葡萄糖重吸收效率達(dá) 75%（接近在體腎小管功能）；氨清除率達(dá) 0.7mmol/10?細(xì)胞 / 天，尿素合成量達(dá) 10μmol/10?細(xì)胞 / 天，維持水鹽代謝平衡的功能與小耳豬腎臟皮質(zhì)組織高度吻合。
病毒敏感性譜：對(duì)腎嗜性病毒（如 SFTSV）的感染效率達(dá) 97%，感染后 60 小時(shí)出現(xiàn)典型細(xì)胞病變（細(xì)胞融合、胞質(zhì)內(nèi)包涵體），病毒滴度達(dá) 10?.? TCID??/mL（是 SSC-S5 細(xì)胞的 8 倍）；因高表達(dá) SFTSV 受體 TAM 家族激酶，對(duì)腎臟靶向病毒的吸附效率顯著高于皮膚細(xì)胞系，尤其適合腎相關(guān)病毒病研究。
腎臟損傷機(jī)制研究
急性腎損傷模型：通過(guò)該細(xì)胞系發(fā)現(xiàn)缺血再灌注可激活 TLR4/NF-κB 通路，使炎癥因子 IL-6 表達(dá)量提升 4 倍，KIM-1 陽(yáng)性率升至 85%，與小耳豬急性腎損傷的病理特征一致性達(dá) 92%（SSC-S5 模型無(wú)法模擬），揭示 “炎癥 - 損傷” 的腎臟病變軸。
修復(fù)信號(hào)調(diào)控機(jī)制：在 HGF 干預(yù)實(shí)驗(yàn)中，細(xì)胞遷移速率提升 60%，凋亡率下降 50%，其下游 Akt 通路磷酸化水平增加 3 倍，證實(shí) HGF 在腎損傷修復(fù)中的關(guān)鍵作用，為護(hù)腎藥物研發(fā)提供靶點(diǎn)。
腎嗜性病毒感染研究
SFTSV 致腎損傷機(jī)制：利用其腎臟特異性，發(fā)現(xiàn) SFTSV 可抑制 SGLT2 功能（下降 40%），導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)葡萄糖蓄積，同時(shí)誘導(dǎo)炎癥小體 NLRP3 激活，使 IL-1β 分泌增加 3 倍，與 SFTSV 感染仔豬的腎間質(zhì)炎癥程度正相關(guān)（R2=0.91），研究結(jié)果較 SSC-S5 模型更接近在體狀態(tài)。
抗病du藥物篩選：建立基于病毒復(fù)制抑制率的高通量模型，某核苷類似物可使 SEP-K1 細(xì)胞的 SFTSV 滴度下降 10?倍，且對(duì)細(xì)胞毒性較低（CC??/EC??比值達(dá) 20），小耳豬實(shí)驗(yàn)顯示該藥物可降低腎臟病毒載量 60%，證實(shí)模型的應(yīng)用價(jià)值。
腎功能調(diào)節(jié)劑開(kāi)發(fā)與評(píng)價(jià)
護(hù)腎藥物活性檢測(cè)：在shun鉑致腎損傷模型中，某中藥提取物可使細(xì)胞 KIM-1 表達(dá)下降 60%，Na?/K?-ATPase 活性恢復(fù)至正常水平的 80%，與小耳豬腎功能指標(biāo)（血肌酐下降 45%）的改善一致性達(dá) 89%（SSC-S5 模型僅 55%）。
腎臟毒性評(píng)價(jià)：作為獸藥腎毒性篩選的標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞系，其對(duì)氨基糖苷類抗生素的敏感性與小耳豬在體毒性的相關(guān)性達(dá) 93%，可在 72 小時(shí)內(nèi)完成藥物安全劑量評(píng)估，較動(dòng)物實(shí)驗(yàn)成本降低 70%。
基礎(chǔ)培養(yǎng)方案
培養(yǎng)基：MEM 培養(yǎng)基添加 10% 胎牛血清、5ng/mL HGF，pH 維持在 7.2-7.4；為增強(qiáng)腎臟功能模擬，可添加 10μM 皮zhi醇，使 SGLT2 表達(dá)量提升 25%。
傳代流程：當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá) 75% 時(shí)，按 1:4 比例接種（高于 SSC-S5 的 1:3 比例），離心速度 800rpm，24 小時(shí)貼壁率超 93%，避免過(guò)度融合（＞85% 會(huì)導(dǎo)致離子轉(zhuǎn)運(yùn)功能下降）。
凍存保護(hù)：采用含 10% DMSO 的wan全培養(yǎng)基，細(xì)胞密度 2×10?個(gè) /mL，程序降溫至 - 80℃過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮，復(fù)蘇時(shí) 37℃水浴 1 分鐘，存活率可達(dá) 90%，需檢測(cè) KIM-1 表達(dá)確認(rèn)功能穩(wěn)定。
功能實(shí)驗(yàn)操作
腎損傷模型構(gòu)建：細(xì)胞接種 24 孔板，用 10μM shun鉑處理 24 小時(shí)，檢測(cè) LDH 釋放量（較正常組增加 3 倍）和 KIM-1 表達(dá)，結(jié)果變異系數(shù)＜6%；SSC-S5 對(duì)照組用于對(duì)比器官特異性差異。
病毒感染實(shí)驗(yàn)：接種 SFTSV（MOI=0.1）后，37℃培養(yǎng) 60 小時(shí)，通過(guò) RT-PCR 檢測(cè)病毒 RNA 拷貝數(shù)（可達(dá) 10? copies/mL），適合抗病du藥物療效評(píng)估。
優(yōu)勢(shì)：
腎臟功能特異性突出：是唯yi能模擬小耳豬腎臟損傷修復(fù)的細(xì)胞系，KIM-1 等標(biāo)志物表達(dá)與離子轉(zhuǎn)運(yùn)功能顯著優(yōu)于 SSC-S5 等皮膚細(xì)胞系，為腎臟研究提供專屬模型。
腎嗜性病毒敏感性高：對(duì) SFTSV 等腎臟靶向病毒的感染效率與復(fù)制支持能力居豬源細(xì)胞系首wei，病毒滴度是皮膚細(xì)胞系的 6-10 倍，大幅提升腎病毒病研究效率。
小型豬模型相關(guān)性強(qiáng)：與小耳豬腎臟在體狀態(tài)的功能一致性達(dá) 90%，藥物腎毒性與護(hù)腎效果評(píng)價(jià)結(jié)果的臨床參考價(jià)值高，被國(guó)際比較醫(yī)學(xué)學(xué)會(huì)列為推薦細(xì)胞系。
局限性：
抗氧化功能較弱：SOD2 活性僅為 SSC-S5 的 30%，不適合氧化應(yīng)激相關(guān)研究，需與皮膚細(xì)胞系配合使用。
培養(yǎng)成本較高：對(duì)血清質(zhì)量要求嚴(yán)格，低成本血清會(huì)導(dǎo)致修復(fù)因子分泌下降 40%，培養(yǎng)成本是 SSC-S5 細(xì)胞的 1.3 倍。
組織特異性局限：對(duì)皮膚病毒（如豬痘病毒）的敏感性僅為 SSC-S5 的 20%，無(wú)法用于皮膚相關(guān)疾病研究。
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