BY-0796 CTLL-2小鼠T淋巴細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0796
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- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/7/14 11:10:25
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CTLL-2小鼠T淋巴細胞系
CTLL-2小鼠T淋巴細胞系源自 C57BL/6 小鼠的細胞毒性 T 淋巴細胞，是保留 T 細胞免疫特性和 IL-2 依賴性增殖特征的經(jīng)典模型，在 T 細胞活化機制、細胞因子信號傳導及免疫調(diào)節(jié)劑篩選中應(yīng)用廣泛，為解析 T 細胞功能調(diào)控提供了可靠工具。
該細胞系呈典型 T 淋巴細胞形態(tài)與表型。顯微鏡下，細胞為圓形或橢圓形，直徑 10-12μm，以懸浮生長為主，偶有聚集。細胞核圓形，染色質(zhì)粗網(wǎng)狀，含 1-2 個核仁，核分裂象每 10 個高倍視野 4-6 個，胞質(zhì)嗜堿性，可見少量嗜天青顆粒。電鏡下，胞質(zhì)內(nèi)有游離核糖體和線粒體，部分細胞含電子致密顆粒，內(nèi)含穿孔素和顆粒酶，符合細胞毒性 T 細胞特征。免疫表型上，高表達 CD3（95%）、CD8（90%），CD4 陰性，同時表達 IL-2 受體 α 鏈（CD25，85%），為 IL-2 依賴性增殖奠定基礎(chǔ)。
體外培養(yǎng)中，其最xian著特點是嚴格依賴 IL-2。最適條件為含 10% 胎牛血清的 RPMI 1640 培養(yǎng)基，添加 20U/mL 重組 IL-2，37℃、5% CO?環(huán)境下，傳代周期約 48 小時，倍增時間 30 小時，快于原代 T 細胞。脫離 IL-2 后 24 小時停止增殖，48 小時凋亡率達 60%，這一特性使其成為 IL-2 活性檢測的金標準。IL-2 濃度 1-100U/mL 時，增殖率與之呈正相關(guān)（r=0.92），100U/mL 達平臺期，為細胞因子活性量化提供依據(jù)。軟瓊脂克隆形成率 25%（僅含 IL-2 時），連續(xù)傳代 50 次后，CD3?CD8?表型及 IL-2 依賴性穩(wěn)定，凍存復蘇存活率超 90%。
功能研究證實其保留細胞毒性 T 細胞核心活性。經(jīng)抗原肽刺激，可特異性殺傷表達同源 MHC-Ⅰ 類分子的靶細胞（如 EL-4 細胞），效靶比 50:1 時殺傷率 75%，依賴穿孔素和顆粒酶 B 釋放（刺激后分泌量增 4-5 倍）。脫顆粒實驗中，CD107a 刺激后表達上調(diào) 3 倍，顆粒釋放功能正常。與原代 CTL 相比，其細胞毒性更穩(wěn)定，批次差異＜10%，適合標準化免疫功能實驗。
信號傳導機制中，IL-2 受體通路起核心作用。IL-2 刺激 15 分鐘后，STAT5 磷酸化升 8 倍，PI3K/Akt 通路激活（p-Akt 增 6 倍），MAPK/ERK 通路激活（p-ERK 增 4 倍），三者共同調(diào)控增殖與存活。STAT5 抑制劑可使 IL-2 誘導的增殖率降 70%，為核心調(diào)控分子。其 IL-2 受體 β 鏈（CD122）表達量是 Jurkat 細胞的 3 倍，對 IL-2 敏感性更高，半數(shù)有效濃度僅為 Jurkat 細胞的 1/5。
在免疫研究中應(yīng)用廣泛。細胞因子檢測方面，可量化血清、培養(yǎng)上清中 IL-2 濃度，靈敏度 1U/mL，較 ELISA 更反映生物活性。免疫調(diào)節(jié)劑篩選中，能評估藥物對 T 細胞增殖的影響，如某免疫增強劑可提升 IL-2 誘導的增殖率 40%，100ng/mL 環(huán)bao素 A 可wan全阻斷增殖。腫瘤免疫研究中，經(jīng)基因修飾表達 CAR 的 CTLL-2 細胞，可特異性識別腫瘤抗原，殺傷率提至 90%，為 CAR-T 療法提供簡化模型。
動物模型研究中，1×10?個 CFSE 標記細胞靜脈注射免疫缺陷小鼠，IL-2 腹腔注射組 7 天內(nèi)脾臟和淋巴結(jié)細胞數(shù)量增 10 倍，無 IL-2 組 3 天內(nèi)幾乎清除，體內(nèi)增殖特性與體外一致。聯(lián)合腫瘤模型顯示，其可抑制 B16 黑色素瘤生長，使腫瘤體積縮小 50%，生存期延長 30%，證實體內(nèi)抗腫瘤活性。
自身免疫病研究中，高濃度 IL-2 環(huán)境下，細胞可突破免疫耐受，對自身組織靶細胞殺傷率 35%，1μM 地塞mi松可使殺傷率降 60%，為自身免疫病藥物篩選提供模型。其對免疫抑制藥物的反應(yīng)接近原代 T 細胞，半數(shù)抑制濃度差異＜2 倍。
代謝特征呈活化 T 細胞表型。IL-2 刺激后，糖酵解速率增 3 倍，氧化磷酸化升 2 倍，呈 “混合代謝”，與高表達葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白 GLUT1（刺激后上調(diào) 3 倍）相關(guān)。谷an酰胺消耗速率增 2 倍，谷an酰胺酶抑制劑可使 IL-2 誘導的增殖率降 45%，證實谷an酰胺代謝的重要性，為靶向 T 細胞代謝的免疫調(diào)節(jié)研究提供線索。
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