BY-0618 H22小鼠肝癌瘤株細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0618
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- 更新時間 2025/7/8 15:04:07
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H22小鼠肝癌瘤株細胞系
H22小鼠肝癌瘤株細胞系源自昆明小鼠的自發(fā)性肝癌,因且移植成瘤率高,成為肝癌研究領(lǐng)域應(yīng)用zui廣泛的動物模型之一。其能穩(wěn)定模擬人類肝癌的生長特性與病理特征,在肝癌發(fā)病機制、藥物篩選及移植瘤模型構(gòu)建中發(fā)揮著不可替代的作用,尤其在體內(nèi)實驗研究中具有du特優(yōu)勢。
該瘤株的原代細胞呈上皮樣貼壁生長,形態(tài)以多邊形為主,部分呈短梭形,宛如散落在培養(yǎng)皿上的 “不規(guī)則團塊”。細胞直徑約 18-25 微米,胞質(zhì)豐富,可見散在的脂滴和空泡 —— 這是肝癌細胞的典型胞質(zhì)特征;細胞核大而圓,核質(zhì)比約 1:1.5,染色質(zhì)呈粗顆粒狀,核仁明顯(1-3 個),顯示出活躍的增殖活性。與其他肝癌細胞系相比,H22 細胞的增殖速度更快,倍增時間約 20-24 小時,當(dāng)融合度達到 80% 時需傳代,傳代時用 EDTA 溶液輕柔處理后吹打即可使細胞脫落,按 1:4-1:6 比例接種,連續(xù)傳代 50 次仍能保持穩(wěn)定的致瘤性。
作為可移植性瘤株,H22 的最大da優(yōu)勢在于體內(nèi)成瘤的穩(wěn)定性。通過腹腔注射或皮下接種昆明小鼠,成瘤率可達 100%:皮下接種后 7-10 天形成可觸及的腫瘤結(jié)節(jié),21 天左右腫瘤體積可達 1-2 cm3,腫瘤組織呈灰白色,質(zhì)地較硬,與周圍組織界限相對清晰;腹腔注射則會形成腹水型腫瘤,14 天左右腹水體積可達 5-8 mL,腹水中含有大量存活的腫瘤細胞,可直接用于傳代或?qū)嶒?,這種雙重成瘤特性使其能滿足不同研究需求 —— 皮下瘤模型適合評估藥物對實體瘤的抑制效果,腹水瘤模型則便于獲取大量腫瘤細胞用于體外實驗。
在肝癌發(fā)病機制研究中,H22 瘤株是解析腫瘤增殖與轉(zhuǎn)移機制的理想工具。其保留了肝癌的關(guān)鍵分子特征,如高表達甲胎蛋白(AFP)—— 腫瘤組織中 AFP 含量可達 500-800 ng/mL,與人類肝癌的 AFP 升高特征高度一致;同時存在 Wnt/β- 連環(huán)蛋白信號通路異常激活,β- 連環(huán)蛋白在細胞核內(nèi)積累,導(dǎo)致下游靶基因 c-Myc、Cyclin D1 的表達量上調(diào) 3-4 倍,推動細胞無限增殖。實驗顯示,通過 RNA 干擾技術(shù)沉默 β- 連環(huán)蛋白基因,可使 H22 細胞的克隆形成能力下降 60%,裸鼠移植瘤體積縮小 70%,直接證實該通路在肝癌進展中的驅(qū)動作用。此外,該瘤株具有一定的轉(zhuǎn)移潛能,通過尾靜脈注射可在肺部形成轉(zhuǎn)移性結(jié)節(jié),轉(zhuǎn)移率約 30%,轉(zhuǎn)移灶的病理特征與人類肝癌肺轉(zhuǎn)移相似,為研究肝癌轉(zhuǎn)移機制提供了可靠模型。
在藥物篩選領(lǐng)域,H22 瘤株因模型構(gòu)建簡便、結(jié)果穩(wěn)定而成為體內(nèi)藥效評價的金標準。其對多種經(jīng)典抗癌藥物敏感,例如,5 - 氟尿*啶處理可使皮下瘤的抑瘤率達 40%-50%,shun鉑處理則可使腹水瘤的生存時間延長 30% 以上,藥物敏感性與臨床肝癌患者的響應(yīng)特征具有一定相關(guān)性。在新型藥物研發(fā)中,該模型可用于評估藥物的體內(nèi)抗腫瘤活性,如中藥提取物槐耳清膏處理后,腫瘤組織中血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達量下降 50%,微血管密度減少 40%,抑瘤率達 55%,為中藥抗腫瘤的臨床應(yīng)用提供了實驗依據(jù)。同時,H22 移植瘤模型可用于研究藥物聯(lián)合治療策略,如將hua療藥物與免疫調(diào)節(jié)劑聯(lián)用,發(fā)現(xiàn)協(xié)同效應(yīng)可使抑瘤率提升至 70%,遠高于單藥治療,為優(yōu)化臨床治療方案提供了參考。
在腫瘤免疫研究中,H22 瘤株的免疫原性特征使其成為免yi治療研究的理想模型。其表達多種腫瘤相關(guān)抗原,如熱休克蛋白 70(HSP70)和癌胚抗原(CEA),可被免疫系統(tǒng)識別。昆明小鼠作為免疫健全的宿主,其移植瘤模型能真實模擬人類肝癌的腫瘤免疫微環(huán)境 —— 腫瘤組織中存在大量調(diào)節(jié)性 T 細胞(Treg)和 M2 型巨噬細胞,這些免疫抑制細胞可分泌 IL-10、TGF-β 等細胞因子,抑制效應(yīng) T 細胞的抗腫瘤活性,導(dǎo)致腫瘤免疫逃逸。在免疫檢查點抑制劑研究中,使用抗 PD-1 抗體處理荷瘤小鼠,可使腫瘤內(nèi) CD8?T 細胞浸潤增加 2-3 倍,腫瘤生長抑制率達 45% 以上,這與臨床中部分肝癌患者對 PD-1 抑制劑響應(yīng)的特征相似,為免yi治liao機制研究和聯(lián)合治療策略探索提供了jue佳模型。
在肝損傷與癌變關(guān)系研究中,H22 瘤株可用于構(gòu)建肝炎 - 肝癌遞進模型。通過先誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生肝損傷(如四氯化碳處理),再接種 H22 細胞,可見腫瘤生長速度較正常小鼠快 2-3 倍,腫瘤組織中炎癥因子(如 TNF-α、IL-6)水平升高 3 倍,NF-κB 信號通路激活,證實慢性炎癥可促進肝癌進展,這與人類乙肝、丙肝病毒感染誘發(fā)肝癌的病理過程高度一致。利用該模型研究發(fā)現(xiàn),抗炎藥物與抗癌藥物聯(lián)用可使抑瘤率提高 50%,為 “抗炎 - 抗癌” 聯(lián)合策略提供了實驗依據(jù)。
培養(yǎng)與保存 H22 瘤株需注意保持其生物學(xué)特性。體外培養(yǎng)時,基礎(chǔ)培養(yǎng)基選用 RPMI 1640,添加 10% 胎牛血清,培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?,定期檢測細胞的 AFP 分泌量,確保其肝癌特性未發(fā)生改變;體內(nèi)傳代時,每 2-3 周通過腹腔注射傳代一次,選擇健康、腫瘤生長良好的小鼠腹水進行傳代,避免連續(xù)傳代超過 10 次,以防瘤株特性退化。長期保存可采用兩種方式:細胞懸液加入 10% DMSO 凍存于液氮中,復(fù)蘇存活率可達 80% 以上;或保存荷瘤小鼠的腫瘤組織塊,低溫凍存后復(fù)蘇接種,能快速獲得大量腫瘤細胞,兩種方法均可有效維持瘤株的穩(wěn)定性。
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