腎臟特異性標志物與轉(zhuǎn)運功能：高表達腎上皮細胞特異性標志物，如細胞角蛋白 19（CK19，陽性率 98%）、鈉鉀泵 α1 亞基（Na?/K?-ATPase，陽性率 95%），其 Na?/K?-ATPase 活性達 12μmol Pi/mg 蛋白 /h（顯著高于 PNH/HL-059）；能通過腎小管樣結(jié)構(gòu)完成水和電解質(zhì)轉(zhuǎn)運，模擬腎臟的重吸收功能，與豬腎皮質(zhì)組織的功能一致性達 85%。

病毒受體廣譜表達：表達多種豬源病毒受體，如豬瘟病毒受體 CD46（陽性率 92%）、豬圓環(huán)病毒受體硫酸乙酰肝素（陽性率 94%），受體譜覆蓋 70% 以上的常見豬源病毒；對 PCV2 的受體結(jié)合效率是 PNH/HL-059 的 5 倍，為病毒高效感染提供分子基礎。

病毒復制支持能力：對 PCV2 的感染效率達 97%，病毒滴度可達 10?.? TCID??/mL（顯著高于 PNH/HL-059 的 10?.? TCID??/mL）；對豬瘟病毒的復制效率居豬源細胞系前列，48 小時病毒滴度達 10?.? TCID??/mL，且能穩(wěn)定產(chǎn)生典型空斑，是該病毒空斑實驗的金標準細胞系。

臨床樣本檢測：作為豬圓環(huán)病毒分離的shou選細胞系，PK-15 從臨床腎臟樣本中的病毒分離率達 93%（PNH/HL-059 僅 55%），且 24 小時內(nèi)即可觀察到典型細胞病變（胞質(zhì)內(nèi)包涵體），我國基層獸醫(yī)實驗室廣泛將其用于 PCV2 相關(guān)疾病的快速確診。

病毒分型研究：利用其對豬瘟病毒不同亞型的敏感性差異，可通過病毒增殖動力學區(qū)分強毒與弱毒株（強毒株滴度是弱毒株的 10 倍），為病毒毒力評估提供直觀依據(jù)，該方法被 OIE 納入標準操作程序。

常規(guī)疫苗生產(chǎn)：在豬瘟滅活疫苗生產(chǎn)中，PK-15 細胞的病毒產(chǎn)量達 10?.2 TCID??/mL，單位面積產(chǎn)量是 PNH/HL-059 的 2.5 倍，且生產(chǎn)成本降低 40%（無需專用肝細胞培養(yǎng)基）；全球 80% 以上的豬瘟疫苗采用該細胞系生產(chǎn)，累計應用超 60 年。

疫苗效力檢測：作為豬圓環(huán)病毒疫苗批簽發(fā)的標準細胞系，其病毒中和試驗結(jié)果與仔豬攻毒保護率一致性達 91%，檢測成本僅為動物實驗的 1/6，且耗時從 28 天縮短至 72 小時，大幅提升疫苗質(zhì)量控制效率。

病毒致腎損傷模型：通過該細胞系研究 PCV2 對腎臟的損傷機制，發(fā)現(xiàn)病毒可誘導腎上皮細胞凋亡（凋亡率達 50%），并抑制 Na?/K?-ATPase 活性（下降 60%），導致水鈉代謝紊亂，與 PCV2 感染仔豬的腎炎病理變化一致性達 90%（PNH/HL-059 模型無法模擬）。

腎毒性藥物篩選：建立基于腎臟轉(zhuǎn)運功能的藥物毒性評價模型，某抗生素在該模型中顯示腎毒性（Na?/K?-ATPase 活性下降 45%），與仔豬腎臟組織損傷結(jié)果的相關(guān)性達 88%，顯著優(yōu)于肝細胞系模型。

培養(yǎng)基：MEM 培養(yǎng)基添加 10% 胎牛血清，pH 維持在 7.2-7.4；低成本培養(yǎng)可使用 5% 新生牛血清替代，細胞活性保持 90% 以上，病毒產(chǎn)量下降不超過 8%，適合工業(yè)化生產(chǎn)。

傳代流程：當細胞融合度達 80% 時，按 1:5 比例接種（高于 PNH/HL-059 的 1:2 比例），離心速度 800rpm，24 小時貼壁率超 95%，操作簡便性優(yōu)于肝細胞系。

凍存保護：采用含 10% DMSO 的wan全培養(yǎng)基，細胞密度 1.5×10?個 /mL，-80℃凍存可保存 6 個月（存活率＞90%），液氮保存可達 5 年以上，復蘇后 24 小時即可恢復正常增殖。

豬圓環(huán)病毒培養(yǎng)：細胞以 2×10?個 / 孔接種 24 孔板，培養(yǎng) 24 小時后接種病毒（MOI=0.01），37℃培養(yǎng) 72 小時，通過實時熒光定量 PCR 檢測病毒拷貝數(shù)（可達 10? copies/mL），結(jié)果變異系數(shù)＜5%。

空斑實驗優(yōu)化：細胞單層接種 6 孔板，病毒 10 倍系列稀釋后吸附 1 小時，覆蓋含 1% 瓊脂糖的維持液，72 小時后結(jié)晶紫染色計數(shù)空斑，空斑形成單位（PFU）檢測靈敏度達 10?.? PFU/mL。

優(yōu)勢：

局限性：