胸腺特異性標志物與免疫分子：高表達胸腺上皮細胞特異性標志物，如細胞角蛋白 18（CK18，陽性率 98%）、胸腺xian素 β4（Tβ4，陽性率 96%），其 Tβ4 表達量是 SSC-S3 細胞的 15 倍；分泌胸腺sheng成素（thymopoietin）和白細胞介素 - 7（IL-7），其中 IL-7 含量達 35pg/10?細胞 / 天，能顯著促進 T 細胞前體增殖（刺激指數(shù)達 3.8，SSC-S3 細胞僅 1.2），模擬胸腺皮質(zhì)的 T 細胞發(fā)育微環(huán)境。

T 細胞分化支持功能：與豬骨髓來源的 T 細胞前體共培養(yǎng)時，可誘導(dǎo) CD4?CD8?雙陽性 T 細胞比例達 45%（SSC-S3 細胞共培養(yǎng)僅 8%），且能通過表達自身抗原肽 - MHC 復(fù)合物介導(dǎo) T 細胞陽性選擇，成熟 T 細胞的 TCR 多樣性指數(shù)達 0.82（接近在體胸腺水平），證實其保留關(guān)鍵免疫教育功能。

病毒敏感性譜：對胸腺嗜性病毒（如 PCV2）的感染效率達 95%，感染后 48 小時出現(xiàn)典型細胞病變（細胞腫脹、脫落），病毒滴度達 10?.? TCID??/mL（是 SSC-S3 細胞的 8 倍）；因高表達 PCV2 受體硫酸乙酰肝素和整合素 αvβ3，對免疫抑制性病毒的吸附效率顯著高于皮膚細胞系，尤其適合病毒致免疫缺陷機制研究。

T 細胞陽性選擇模型：通過該細胞系發(fā)現(xiàn)豬胸腺上皮細胞表達的 Aire 蛋白可激活 300 余種自身抗原基因，其中胰島素樣生長因子 2（IGF2）的表達量與 CD4?單陽性 T 細胞比例呈正相關(guān)（R2=0.91），敲除 Aire 后成熟 T 細胞的自身耐受性顯著下降（自身抗體產(chǎn)生率上升 60%），揭示胸腺中樞耐受的分子基礎(chǔ)，研究結(jié)果與仔豬胸腺組織的基因表達譜一致性達 90%。

免疫缺陷病模擬：在該細胞系中沉默 IL-7 基因后，T 細胞前體增殖率下降 70%，CD4?CD8?雙陽性細胞比例降至 12%，模擬先天性胸腺發(fā)育不全綜合征的病理特征，其免疫指標與臨床病例的吻合度達 85%，為免疫缺陷病的基因治療提供靶點。

PCV2 致免疫抑制機制：利用其胸腺上皮特性，發(fā)現(xiàn) PCV2 的 Cap 蛋白可與 Tβ4 結(jié)合（結(jié)合常數(shù) KD=2.3×10??M），抑制 IL-7 分泌（下降 55%），導(dǎo)致 T 細胞成熟障礙（CD4?T 細胞比例從 30% 降至 12%），與 PCV2 感染仔豬胸腺萎suo的病理變化高度一致（胸腺指數(shù)下降 40%），揭示病毒靶向胸腺的免疫逃逸策略。

病毒干擾抗原呈遞研究：豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）感染該細胞系后，MHC-Ⅱ 類分子的細胞表面表達量下降 65%，其 N 蛋白可與 CIITA（MHC-Ⅱ 類分子轉(zhuǎn)錄激活因子）相互作用，抑制抗原呈遞功能，T 細胞增殖反應(yīng)下降 50%，解釋了 PRRSV 的免疫抑制特性。

胸腺功能增強劑篩選：建立基于 T 細胞成熟效率的高通量篩選模型，發(fā)現(xiàn)某植物多糖可使該細胞系的 IL-7 分泌量提升 40%，CD4?CD8?雙陽性 T 細胞比例增加 25%，飼喂仔豬后外周血 T 細胞多樣性提升 18%，證實其免疫增強效果。

胸腺靶向疫苗效力評價：在 PCV2 疫苗研發(fā)中，該細胞系與 T 細胞共培養(yǎng)模型的中和抗體效價與仔豬攻毒保護率一致性達 93%（SSC-S3 模型僅 65%），被農(nóng)業(yè)部列為免疫抑制性病毒疫苗的優(yōu)選評價模型。

培養(yǎng)基：RPMI-1640 培養(yǎng)基添加 10% 胎牛血清、50μM β- 巰基乙醇，pH 維持在 7.2-7.4；為維持免疫功能，可添加 10ng/mL 表皮生長因子（EGF），使 Tβ4 表達量提升 30%。

傳代流程：當細胞融合度達 75% 時，按 1:3 比例接種（低于 SSC-S3 的 1:4 比例），離心速度 1000rpm，24 小時貼壁率超 92%，避免過度融合（＞85% 會導(dǎo)致 IL-7 分泌下降）。

凍存保護：采用含 10% DMSO 的wan全培養(yǎng)基，細胞密度 2×10?個 /mL，程序降溫至 - 80℃過夜后轉(zhuǎn)入液氮，復(fù)蘇時 37℃水浴 1 分鐘，接種后 48 小時更換培養(yǎng)基，存活率可達 88%，需檢測 CK18 表達確認表型穩(wěn)定。

T 細胞共培養(yǎng)體系：將 5×10?個該細胞系與 1×10?個豬骨髓 T 細胞前體接種至 24 孔板，添加 10U/mL IL-2，培養(yǎng) 7 天后通過流式細胞術(shù)檢測 CD4?CD8?細胞比例，結(jié)果變異系數(shù)＜7%。

病毒感染實驗：接種 PCV2（MOI=0.1）后，37℃培養(yǎng) 48 小時，通過實時熒光定量 PCR 檢測病毒 DNA 拷貝數(shù)（可達 10? copies/mL），需設(shè)置 SSC-S3 對照組明確組織特異性差異。

優(yōu)勢：

局限性：