BY-0664 GT1-1小鼠垂體瘤細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0664
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- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/7/21 12:36:21
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GT1-1小鼠垂體瘤細胞系
GT1-1小鼠垂體瘤細胞系是研究垂體腺瘤及生殖內(nèi)分泌調(diào)控的核心模型，以穩(wěn)定分泌cu性腺激素釋放激素（GnRH）、完整的神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)控網(wǎng)絡(luò)及典型的侵襲性表型為顯著特征，在垂體瘤發(fā)病機制、生殖軸激素調(diào)控及相關(guān)藥物研發(fā)中應(yīng)用廣泛，為解析下丘腦 - 垂體 - 性腺軸（HPG 軸）功能異常提供了關(guān)鍵實驗工具。
來源與背景：該細胞系源自 1980 年代通過 SV40 病毒轉(zhuǎn)化建立的 C57BL/6 小鼠垂體細胞腺瘤，是首ge能持續(xù)分泌 GnRH 的永生化細胞系。在臨床垂體瘤中，約 10% 為相關(guān)腫瘤，可引發(fā)性早熟、月經(jīng)紊亂等生殖內(nèi)分泌疾病。GT1-1 的du特jia值在于其保留了 GnRH 分泌的脈沖式釋放特性（每 90 分鐘一個分泌高峰），wan美模擬體內(nèi) GnRH 神經(jīng)元的分泌模式，彌補了原代垂體細胞體外存活時間短（<7 天）、分泌功能不穩(wěn)定的缺陷，至今仍是 HPG 軸調(diào)控機制研究的shou選細胞模型。
細胞特性：形態(tài)上呈現(xiàn)神經(jīng)內(nèi)分泌細胞與上皮細胞的混合特征，貼壁生長時呈多角形，部分細胞延伸出神經(jīng)樣突起，細胞質(zhì)含致密分泌顆粒（GnRH 儲存結(jié)構(gòu)），細胞核大而圓，核質(zhì)比約 1:2.5，5% 細胞可見雙核，體現(xiàn)垂體瘤的惡性形態(tài)。核心特性突出：激素分泌模式獨te，基礎(chǔ) GnRH 分泌量為 180pg/10?細胞 / 24h，呈脈沖式釋放，Kisspeptin 刺激后分泌量增至 2.8 倍，雌二醇則可抑制 45% 的分泌，精準模擬 HPG 軸的正負反饋調(diào)控；侵襲能力顯著，體外倍增時間約 36 小時，克隆形成率 52%，Transwell 實驗穿膜細胞數(shù)是正常垂體細胞的 3.5 倍，裸鼠顱內(nèi)接種成瘤率 90%，常侵犯周圍視神經(jīng)組織；分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)完整，表達 GnRH 受體、雌激素受體 α（ERα）等關(guān)鍵分子，MAPK/ERK 通路是 GnRH 分泌的核心調(diào)控途徑，ERK 磷酸化水平在分泌高峰時升高 4 倍。傳代時用常規(guī)消化液處理 2-3 分鐘，傳代比例 1:4，細胞密度達 70% 時需傳代，過度密集會導致分泌脈沖紊亂。
培養(yǎng)條件：基礎(chǔ)培養(yǎng)采用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 混合培養(yǎng)基，添加 1% 雙抗，培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度。關(guān)鍵培養(yǎng)要點：血清質(zhì)量敏感，需使用低雌激素血清（雌二醇含量 < 5pg/ml），否則會持續(xù)抑制 GnRH 分泌；激素環(huán)境控制，培養(yǎng)基中添加 5μg/ml 轉(zhuǎn)鐵蛋白可維持分泌功能，缺失會使 GnRH 分泌量下降 60%；傳代操作規(guī)范，避免反復吹打，否則會破壞細胞突起結(jié)構(gòu)，導致脈沖分泌模式消失。凍存采用含 10% DMSO 的胎牛血清凍存液，程序降溫后液氮保存，復蘇后 48 小時分泌功能恢復 85%，72 小時重現(xiàn)脈沖式釋放。
檢測鑒定：微生物檢測無支原體、病毒污染，符合神經(jīng)內(nèi)分泌細胞系標準。免疫組化顯示 GnRH（+）、突觸素（Synaptophysin，+）、ERα（+），符合相關(guān)細胞表型。激素分泌驗證：脈沖式分泌周期穩(wěn)定在 85-95 分鐘，Kisspeptin 刺激后分泌峰值提升 2.6 倍，證實調(diào)控通路完整。染色體核型分析為亞二倍體（眾數(shù) 38-40），存在 15 號染色體長臂擴增（含 GnRH 基因區(qū)域），與臨床相關(guān)腺瘤遺傳學特征部分吻合。功能驗證中，敲除 GnRH 基因后，細胞侵襲能力下降 58%，證實激素分泌與侵襲表型的關(guān)聯(lián)性。
應(yīng)用領(lǐng)域：在生殖調(diào)控研究中，通過該細胞系發(fā)現(xiàn) Kiss1 神經(jīng)元通過 GPR54 受體激活 PLC 通路，使胞內(nèi)鈣濃度升高 3 倍，觸發(fā) GnRH 脈沖釋放，為青春期啟動機制提供核心證據(jù)。在垂體瘤侵襲機制研究中，發(fā)現(xiàn) MMP-13 在細胞侵襲中起關(guān)鍵作用，其表達量是正常細胞的 4 倍，沉默后穿膜細胞數(shù)減少 65%。在藥物研發(fā)方面，作為多囊卵巢綜合征（PCOS）治療藥物的篩選模型，新型 GnRH 拮抗劑可使分泌量減少 72%，且能降低細胞侵襲能力 40%。此外，該細胞系可用于研究晝夜節(jié)律對生殖軸的影響，發(fā)現(xiàn) Clock 基因敲除后，GnRH 分泌脈沖周期延長至 130 分鐘，揭示生物鐘與生殖功能的關(guān)聯(lián)。
與其他垂體瘤模型相比，GT1-1 的優(yōu)勢在于其 GnRH 脈沖式分泌的du特性和調(diào)控通路的完整性，分泌功能對激素刺激的響應(yīng)率達 85%，遠高于同類細胞系（如 LβT2，約 50%）。通過該細胞系的研究，已闡明 15 個 HPG 軸調(diào)控基因，推動 4 種生殖內(nèi)分泌疾病治療藥物進入臨床前試驗，為性早熟、垂體瘤等疾病的精準治療提供了重要實驗依據(jù)。
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