BY-0556 L5178Y TK小鼠淋巴瘤細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0556
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/7/8 13:44:25
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L5178Y TK小鼠淋巴瘤細胞系
L5178Y TK小鼠淋巴瘤細胞系源自 DBA/2 小鼠自發(fā) T 細胞淋巴瘤，因胸苷激酶（TK）基因缺陷成為遺傳毒理學與腫瘤研究的標gan模型。其du特的基因背景與生物學特性，使其在基因突變檢測、抗癌藥物研發(fā)等領(lǐng)域占據(jù)不可替代的地位。
顯微鏡下，該細胞呈懸浮生長的圓形或類圓形，直徑 10-12 微米，宛如培養(yǎng)基中漂浮的 “微型球體”。胞質(zhì)透亮，偶見細小顆粒，核質(zhì)比高，核仁清晰，彰顯旺盛的增殖活力。細胞倍增時間僅 12-16 小時，當密度達 1×10?-2×10?個 / 毫升時需傳代，傳代時無需yi酶消化，輕柔吹打即可分散，按 1:5-1:8 比例接種，連續(xù)培養(yǎng) 50 代仍保持穩(wěn)定表型。
培養(yǎng)體系需精準模擬淋巴細胞微環(huán)境：基礎(chǔ)培養(yǎng)基選用 RPMI 1640，含谷an酰胺與丙酮酸滿足代謝需求；添加 10% 熱滅活胎牛血清（滅活可消除補體對細胞的損傷），并維持 37℃、5% CO?的恒溫環(huán)境，pH 值穩(wěn)定在 7.2-7.4。特別注意，細胞對滲透壓波動極度敏感，換液時新舊培養(yǎng)基溫差需控制在 ±1℃內(nèi)，否則易引發(fā)凋亡。
作為國際標準化小鼠淋巴瘤試驗（MLA）的指定細胞系，其 TK?/- 基因型是核心優(yōu)勢。TK 基因位于 11 號染色體，缺陷導(dǎo)致細胞無法合成胸苷激酶，而該酶是嘧啶核苷酸補救合成的關(guān)鍵。當接觸誘變劑后，部分細胞可能發(fā)生 TK 基因突變回復(fù)（TK?/-），恢復(fù)酶合成能力。在含三氟xiong苷（TFT）的選擇培養(yǎng)基中，僅回復(fù)突變細胞能形成集落，通過集落計數(shù)可量化誘變活性。該模型可檢測點突變、染色體易位等多種遺傳損傷，靈敏度遠超 Ames 試驗，是化學品遺傳毒性分級的 “金標準”。
在抗癌藥物篩選中，細胞對多種hua療藥物呈現(xiàn)典型劑量反應(yīng)。對 6 - 巰基嘌呤等嘌呤類似物、5 - 氟尿*啶等嘧啶類似物，以及依tuo泊苷等拓撲異構(gòu)酶抑制劑，均能通過 MTT 法精準測定 IC50。例如，篩選淋巴瘤新藥時，將藥物梯度處理細胞 48 小時，結(jié)合集落形成率分析，可快速鎖定高效化合物。其耐藥模型構(gòu)建也頗具價值：通過逐步提高藥物濃度誘導(dǎo)耐藥株，對比發(fā)現(xiàn)耐藥細胞 P - 糖蛋白表達升高 3-5 倍，為開發(fā)耐藥逆轉(zhuǎn)劑提供直接依據(jù)。
腫瘤免疫研究中，細胞作為 NK 細胞殺傷實驗的經(jīng)典靶標，與 YAC-1 細胞共同構(gòu)成免疫活性檢測的 “雙標gan”。用 LDH 釋放法檢測顯示，活化 NK 細胞對其殺傷率可達 40%-60%，能直觀反映免疫細胞功能狀態(tài)。構(gòu)建荷瘤模型時，皮下接種 DBA/2 小鼠 1 周即可形成腫瘤，腹腔接種則引發(fā)腹水，為免疫檢查點抑制劑等療法的體內(nèi)評估提供理想模型。
相較于其他檢測系統(tǒng)，該細胞系優(yōu)勢顯著：與 Ames 試驗相比，可檢測哺乳動物te有的誘變機制；較 CHO 細胞染色體畸變試驗，檢測周期從 3 天縮短至 48 小時。在疫苗安全性評價中，常用于檢測疫苗佐劑的遺傳毒性，是 WHO 推薦的生物制品質(zhì)控實驗?zāi)Ｐ汀?/span>
前沿應(yīng)用中，細胞在基因編輯效率驗證領(lǐng)域嶄露頭角。通過 CRISPR-Cas9 修復(fù) TK 基因，成功構(gòu)建的報告細胞系可通過 TFT 抗性快速篩選陽性克隆，使基因編輯效率檢測從傳統(tǒng)測序的 2 周縮短至 3 天。三維培養(yǎng)體系中，與成纖維細胞共培養(yǎng)形成的腫瘤球，其藥物敏感性更接近體內(nèi)腫瘤，為精準醫(yī)療提供新的評估平臺。
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