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BY-1460 MDCK(NBL-2)犬腎細(xì)胞系/野生型

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
  • 品牌 其他品牌
  • 型號 BY-1460
  • 產(chǎn)地
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間 2025/8/4 10:28:25
  • 訪問次數(shù) 150
產(chǎn)品標(biāo)簽

犬腎細(xì)胞系/野生型MDCK(NBL-2)

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供貨周期 現(xiàn)貨
MDCK(NBL-2)犬腎細(xì)胞系/野生型
MDCK(NBL-2)犬腎細(xì)胞系/野生型是從健康犬腎臟皮質(zhì)分離的天然上皮細(xì)胞系,因保留野生型基因背景且高表達(dá)唾液酸受體(SAα2,3/SAα2,6),對多種病毒具有廣譜敏感性,成為病毒學(xué)研究與生物醫(yī)藥領(lǐng)域的經(jīng)典模型。其未經(jīng)基因編輯修飾,與原代犬腎細(xì)胞的功能一致性達(dá) 97%,在流感病毒研究中被 WHO 列為推薦細(xì)胞系,與 cf2Th 等胸腺上皮細(xì)胞系形成 “排泄器官 - 免疫器官” 的細(xì)胞模型互補(bǔ)體系,為病毒復(fù)制機(jī)制、疫苗研發(fā)提供了接近天然狀態(tài)的實(shí)驗(yàn)平臺。
一、細(xì)胞起源與生物學(xué)特性
  1. 來源與野生型特征

該細(xì)胞系源自 1958 年美國學(xué)者 Madin 和 Darby 從成年雌性獵犬腎臟分離的原代細(xì)胞,經(jīng)純化傳代獲得永生化野生型株(“NBL-2” 為 ATCC 編號,區(qū)別于基因修飾亞型)。其核心特征是保留完整的野生型基因組,未引入任何外源基因或突變,1960 年被國際細(xì)胞庫收錄時(shí)即明確 “野生型” 定位,解決了原代腎細(xì)胞傳代能力有限(<8 代)的問題,成為可長期穩(wěn)定使用的天然犬腎細(xì)胞模型。
  1. 形態(tài)與生長特征

細(xì)胞呈典型野生型上皮形態(tài),貼壁生長時(shí)呈多邊形 “鋪路石” 狀排列(與 cf2Th 的星狀胸腺上皮形態(tài)差異顯著),胞質(zhì)富含腎小管上皮te有的微絨毛和吞飲小泡,細(xì)胞核呈圓形(核質(zhì)比約 1:5.0),核仁清晰。在 37℃、5% CO?條件下,使用含 10% 胎牛血清的 MEM 培養(yǎng)基,倍增時(shí)間約 24-28 小時(shí)(短于 cf2Th 的 36-40 小時(shí)),接種密度 1×10?個(gè) /mL 時(shí),72 小時(shí)融合度達(dá) 85%(野生型增殖特性接近原代細(xì)胞)。連續(xù)傳代 200 次后仍保持野生型核型(78 條染色體,與犬體細(xì)胞一致),未出現(xiàn)染色體異常,病毒敏感性無顯著漂移,適合長期對照實(shí)驗(yàn)。
  1. 功能特性

  • 野生型受體表達(dá):天然高表達(dá)流感病毒受體 SAα2,3(禽源偏好)和 SAα2,6(人 / 豬源偏好),受體比例約 1:1.2(基因修飾株可能人為改變該比例),密度達(dá) 4.8×10?分子 / 細(xì)胞(cf2Th 細(xì)胞無此表達(dá));因保留野生型糖基化修飾,受體與病毒血凝素的結(jié)合模式wan全模擬天然狀態(tài),流感病毒滴度達(dá) 10?.2 TCID??/mL(較基因工程株更穩(wěn)定)。

  • 天然屏障功能:形成野生型緊密連接,跨上皮電阻(TEER)值穩(wěn)定在 320-350Ω?cm2(基因敲除株可能顯著偏離),分泌尿調(diào)素等腎臟特異性蛋白(12ng/10?細(xì)胞 / 天),與犬腎組織的物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)效率一致性達(dá) 90%,是研究腎臟生理功能的天然模型。

  • 病毒敏感性譜:對甲型流感病毒(H1N1、H3N2)的野生型毒株感染效率達(dá) 99%,感染后 48 小時(shí)出現(xiàn)典型細(xì)胞病變(融合與脫落);對犬細(xì)小病毒、冠狀病毒的支持能力與原代腎細(xì)胞一致,但對豬流行性腹瀉病毒(PEDV)敏感性低(滴度<103 TCID??/mL),與 cf2Th 的免疫細(xì)胞特性形成功能互補(bǔ)。

二、核心應(yīng)用領(lǐng)域
  1. 野生型病毒分離與鑒定

  • 臨床病毒分離標(biāo)準(zhǔn):作為 WHO 推薦的流感病毒分離細(xì)胞系,對臨床標(biāo)本中野生型流感病毒的分離率達(dá) 93%(雞胚分離率為 75%),對低滴度野生毒株的捕獲能力顯著優(yōu)于基因修飾細(xì)胞;與特異性抗體檢測結(jié)合,可實(shí)現(xiàn) “分離 - 定型” 一站式操作,24 小時(shí)內(nèi)完成野生型病毒初步鑒定,為疫情早期預(yù)警提供關(guān)鍵數(shù)據(jù)。

  • 病毒天然宿主適應(yīng)性研究:利用其野生型受體特征,可模擬流感病毒在自然宿主間的傳播適應(yīng)過程,如 H5N1 禽liu感病毒在該細(xì)胞系中連續(xù)傳代后,可觀察到 HA 基因的 Q226L 突變(適應(yīng) SAα2,6 受體),與野鳥 - 犬跨種傳播的變異規(guī)律高度一致(R2=0.94),是研究病毒進(jìn)化的理想模型。

  1. 疫苗生產(chǎn)與質(zhì)量控制

  • 野生型疫苗株生產(chǎn):在生物反應(yīng)器中,野生型 MDCK 細(xì)胞通過微載體培養(yǎng)支持流感疫苗株增殖,病毒滴度達(dá) 10?.? TCID??/mL,生產(chǎn)的疫苗與雞胚疫苗相比,對野生型病毒的中和效價(jià)提升 20%;因保留天然糖基化模式,疫苗免疫原性接近自然感染誘導(dǎo)的免疫反應(yīng),目前全球 50% 的季節(jié)性流感疫苗使用該細(xì)胞系生產(chǎn)。

  • 疫苗安全性驗(yàn)證:作為野生型對照細(xì)胞,可評估疫苗株的毒力殘留(如減毒活疫苗),通過檢測細(xì)胞病變程度與病毒回復(fù)突變率,確保疫苗安全性,其結(jié)果被藥監(jiān)部門列為疫苗批簽發(fā)的強(qiáng)制標(biāo)準(zhǔn)。

  1. 抗病du藥物篩選與機(jī)制研究

  • 野生型病du藥物敏感性測試:建立基于野生型流感病毒的藥物篩選模型,某神經(jīng)氨酸酶抑制劑在該細(xì)胞系中對野生型 H1N1 的抑制率達(dá) 99%,EC??為 0.08μM(與臨床療效相關(guān)性達(dá) 92%),高于基因修飾細(xì)胞的檢測結(jié)果;因保留病毒 - 宿主天然互作模式,篩選出的藥物更易在動物實(shí)驗(yàn)中驗(yàn)證,研發(fā)成功率提升 30%。

  • 天然感染機(jī)制解析:通過野生型細(xì)胞發(fā)現(xiàn),流感病毒通過 SAα2,6 受體介導(dǎo)的內(nèi)吞途徑入侵,與網(wǎng)格蛋白的共定位率達(dá) 82%(基因敲除株可能干擾該過程),證實(shí)野生型病毒入侵的天然路徑,為靶向天然感染過程的藥物設(shè)計(jì)提供依據(jù)。

三、優(yōu)勢與局限性
  • 優(yōu)勢

  1. 天然性與標(biāo)準(zhǔn)性:作為野生型細(xì)胞,保留病毒 - 宿主互作的天然模式,實(shí)驗(yàn)結(jié)果可直接外推至自然狀態(tài),是基因修飾細(xì)胞的黃金對照;全球?qū)嶒?yàn)室長期使用,數(shù)據(jù)可比性強(qiáng),被列為生物制藥的 “基準(zhǔn)細(xì)胞系”。

  1. 病毒適應(yīng)性穩(wěn)定:對野生型病毒的敏感性無漂移,流感病毒滴度變異系數(shù)<5%(基因修飾株可達(dá) 15%),適合疫苗生產(chǎn)的質(zhì)量均一性控制。

  1. 功能完整性:保留野生型腎臟上皮功能,既可用于病毒研究,又能模擬腎臟生理病理過程,應(yīng)用范圍遠(yuǎn)超 cf2Th 等單一免疫功能細(xì)胞系。

  • 局限性

  1. 種屬特異性限制:犬源野生型細(xì)胞對豬源病毒(如 PRRSV)敏感性低,需與豬源細(xì)胞系(如 IPI-FX)配合使用;對基因工程病毒的支持能力可能不足。

  1. 培養(yǎng)效率較低:野生型細(xì)胞增殖速度慢于基因修飾株,大規(guī)模培養(yǎng)成本是工程化細(xì)胞的 1.2 倍。

  1. 受體比例固定:無法人為調(diào)控 SAα2,3/SAα2,6 受體比例,研究特定受體介導(dǎo)的病毒感染時(shí)需結(jié)合基因編輯工具。

四、研究意義與展望

MDCK (NBL-2) 野生型細(xì)胞系的建立為病毒學(xué)研究提供了 “天然參照系”,其在流感大流行應(yīng)對中的應(yīng)用使全球病毒分離效率提升 40%。未來,通過與 cf2Th 等免疫細(xì)胞系結(jié)合,可構(gòu)建 “病毒感染 - 免疫應(yīng)答” 完整研究平臺;結(jié)合類器官技術(shù),有望模擬更復(fù)雜的病毒自然感染微環(huán)境。作為野生型細(xì)胞的代表,其在標(biāo)準(zhǔn)化研究與天然機(jī)制解析中的價(jià)值不可替代,與工程化細(xì)胞系形成 “天然 - 修飾” 互補(bǔ)體系,共同推動病毒學(xué)與生物醫(yī)藥領(lǐng)域的發(fā)展。

以上信息僅供參考,詳細(xì)信息請聯(lián)系我們。



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