BY-0861 B16-F1小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
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- 公司名稱(chēng) 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) BY-0861
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- 廠(chǎng)商性質(zhì) 生產(chǎn)廠(chǎng)家
- 更新時(shí)間 2025/7/15 11:21:54
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B16-F1小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
B16-F1小鼠黑色素瘤細(xì)胞系是黑色素瘤研究領(lǐng)域的經(jīng)典模型，憑借顯著的黑色素合成能力和轉(zhuǎn)移潛能，在腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制探索與抗腫瘤藥物研發(fā)中具有不可替代的地位。
來(lái)源與背景：該細(xì)胞系源自 C57BL/6 小鼠的自發(fā)性皮膚黑色素瘤，是 B16 黑色素瘤細(xì)胞系的克隆亞系。通過(guò)體外篩選獲得的 B16-F1 細(xì)胞，保留了親代細(xì)胞的核心特征，同時(shí)在轉(zhuǎn)移能力上表現(xiàn)出更強(qiáng)的穩(wěn)定性，尤其在肺部轉(zhuǎn)移模型中具有高度可重復(fù)性。C57BL/6 小鼠的遺傳背景清晰，使得該細(xì)胞系與同源小鼠的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)兼容性ji佳，為研究黑色素瘤的自發(fā)轉(zhuǎn)移過(guò)程提供了理想的體內(nèi)外聯(lián)動(dòng)模型。
細(xì)胞特性：形態(tài)上呈上皮樣與梭形混合形態(tài)，細(xì)胞大小不均，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)充滿(mǎn)棕黑色黑色素顆粒，這是其最xian著的形態(tài)學(xué)標(biāo)志。作為貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞，其排列無(wú)明顯極性，增殖至匯合狀態(tài)時(shí)易形成多層堆積，失去正常細(xì)胞的接觸抑制特性。核心特性包括高效黑色素合成—— 酪an酸酶活性是普通腫瘤細(xì)胞的 10 倍以上，黑色素顆粒的分泌受紫外線(xiàn)等外界因素調(diào)控；以及定向轉(zhuǎn)移潛能—— 在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型中，優(yōu)先轉(zhuǎn)移至肺部，轉(zhuǎn)移率是 B16 親代細(xì)胞的 2-3 倍，高表達(dá) E - 鈣粘蛋白和整合素 β3 等轉(zhuǎn)移相關(guān)分子。細(xì)胞倍增時(shí)間約 20-24 小時(shí)，傳代時(shí)需用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化，傳代比例 1:4-1:6，連續(xù)傳代 50 次后仍能保持黑色素合成能力和轉(zhuǎn)移特性的穩(wěn)定。
培養(yǎng)條件：常規(guī)采用含 10% 胎牛血清的 DMEM 高糖培養(yǎng)基，添加 1% 青mei素 - 鏈mei素混合液預(yù)防污染。培養(yǎng)環(huán)境需維持 37℃、5% CO?飽和濕度，每 2-3 天更換一次培養(yǎng)基，以保證營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)和代謝廢物清除。與其他腫瘤細(xì)胞不同，該細(xì)胞對(duì)光照較為敏感，培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)避免長(zhǎng)時(shí)間強(qiáng)光照射，以防黑色素顆粒異常聚集影響細(xì)胞活性。傳代時(shí)，黑色素顆粒會(huì)隨細(xì)胞代謝釋放到培養(yǎng)基中，導(dǎo)致培養(yǎng)液呈現(xiàn)棕黑色，更換培養(yǎng)基時(shí)需徹di清洗殘留顆粒，避免影響新接種細(xì)胞的貼壁。
檢測(cè)鑒定：經(jīng)嚴(yán)格微生物篩查，該細(xì)胞系無(wú)支原體、細(xì)菌、真菌及常見(jiàn)病毒污染，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。通過(guò)多巴氧化反應(yīng)可快速鑒定其黑色素合成能力，陽(yáng)性反應(yīng)呈現(xiàn)棕黑色顆粒沉積。免疫熒光檢測(cè)顯示，其高表達(dá)黑色素細(xì)胞標(biāo)志物 ——S-100 蛋白和 HMB45，證實(shí)細(xì)胞的黑色素細(xì)胞起源。染色體核型分析顯示，其保留 C57BL/6 小鼠的典型核型特征，同時(shí)存在特定染色體片段的擴(kuò)增，與黑色素瘤的發(fā)生密切相關(guān)。裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)中，皮下接種 1×10?個(gè)細(xì)胞即可形成具有黑色素沉積的腫瘤，成瘤率達(dá) 100%，進(jìn)一步驗(yàn)證其腫瘤特性。
應(yīng)用領(lǐng)域：在基礎(chǔ)研究中，常用于解析黑色素合成的分子機(jī)制，如酪an酸酶基因家族（Tyr、Tyrp1）的表達(dá)調(diào)控，以及 MITF（小眼畸形相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子）在黑色素細(xì)胞分化中的核心作用。在轉(zhuǎn)移機(jī)制研究中，其肺部定向轉(zhuǎn)移特性使其成為探索 “種子 - 土壤” 學(xué)說(shuō)的理想模型，可用于研究腫瘤細(xì)胞與肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞的相互作用，以及趨化因子受體 CXCR4 在轉(zhuǎn)移靶向性中的作用。在藥物研發(fā)方面，廣泛用于篩選抗黑色素瘤藥物及抗轉(zhuǎn)移藥物，通過(guò)檢測(cè)藥物對(duì)細(xì)胞增殖、黑色素合成及 Transwell 穿膜能力的影響，評(píng)估候選化合物的體外活性。在免yi治療研究中，該細(xì)胞系可構(gòu)建腫瘤疫苗模型，其高表達(dá)的黑色素瘤相關(guān)抗原（如 gp100）能有效激活機(jī)體的抗腫瘤免疫反應(yīng)，為腫瘤免yi治療策略提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
該細(xì)胞系的du特優(yōu)勢(shì)在于體內(nèi)外轉(zhuǎn)移模型的高度一致性，通過(guò)尾靜脈注射構(gòu)建的實(shí)驗(yàn)性肺轉(zhuǎn)移模型，可直觀(guān)觀(guān)察轉(zhuǎn)移灶的形成過(guò)程，且轉(zhuǎn)移灶數(shù)量與接種細(xì)胞數(shù)呈線(xiàn)性關(guān)系，便于量化評(píng)估藥物的抗轉(zhuǎn)移效果。同時(shí)，其黑色素顆?？勺鳛樘烊皇聚檮?，無(wú)需額外標(biāo)記即可通過(guò)組織切片的黑色素沉積定位腫瘤細(xì)胞，簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作。
總之，B16-F1 小鼠黑色素瘤細(xì)胞系憑借其穩(wěn)定的生物學(xué)特性和明確的轉(zhuǎn)移表型，成為連接黑色素瘤基礎(chǔ)研究與臨床轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵工具，為開(kāi)發(fā)針對(duì)黑色素瘤轉(zhuǎn)移的新型治療策略提供了堅(jiān)實(shí)的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
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