BY-0973 HB L20小鼠雜交瘤細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0973
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/7/21 15:05:06
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HB L20小鼠雜交瘤細胞系
HB L20小鼠雜交瘤細胞系是單克隆抗體制備與免疫學研究的重要細胞模型，以穩(wěn)定分泌特異性單克隆抗體、良好的貼壁生長能力及明確的抗原識別特性為核心優(yōu)勢，在免疫檢測、抗原分析及診斷試劑研發(fā)中應用廣泛，為單克隆抗體的規(guī)模化生產(chǎn)與功能研究提供了可靠載體。
來源與背景：該細胞系源于 BALB/c 小鼠脾臟 B 淋巴細胞與骨髓瘤細胞的融合產(chǎn)物，通過雜交瘤技術(shù)篩選克隆獲得。其建立基于特定抗原免疫后的 B 淋巴細胞與永生化骨髓瘤細胞的融合，經(jīng)有限稀釋法克隆和抗體特異性檢測，最終得到能穩(wěn)定分泌針對目標抗原的單克隆抗體的細胞株。在免疫學研究中，單克隆抗體因特異性強、均一性高，成為解析抗原抗體相互作用、開發(fā)疾病診斷工具的關(guān)鍵試劑，HB L20 細胞系的成功構(gòu)建，為獲取針對特定抗原的標準化抗體提供了穩(wěn)定來源，自建立以來，在多種免疫檢測方法的建立中發(fā)揮了重要作用。
細胞特性：形態(tài)上呈現(xiàn)典型的雜交瘤細胞特征，貼壁生長時呈上皮樣，多為多邊形或短梭形，細胞質(zhì)豐富，細胞核大而圓，核質(zhì)比約 1:2.3，6% 的細胞可見雙核結(jié)構(gòu)，體現(xiàn)融合細胞的形態(tài)特點。核心特性突出：抗體分泌穩(wěn)定，分泌量達 9-15μg/10?細胞 / 24h，連續(xù)傳代 55 次后，抗體分泌能力僅下降 7%，遠優(yōu)于普通雜交瘤細胞系；抗原結(jié)合特異性高，與靶抗原的結(jié)合常數(shù)（Kd）達 10??M 級別，與其他類似抗原的交叉反應率低于 1%，確保了檢測結(jié)果的準確性；增殖能力穩(wěn)健，體外培養(yǎng)倍增時間約 50-56 小時，克隆形成率 40%，腹腔接種 BALB/c 小鼠后，13-19 天可形成腹水，腹水中抗體濃度達 3-7mg/ml，便于批量制備抗體。傳代時采用常規(guī)方法處理，傳代比例 1:3-1:4，當細胞密度達到 70%-75% 時需及時傳代，過度密集會導致抗體分泌量下降 18% 左右。
培養(yǎng)條件：適宜采用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基，添加 1% 雙抗，培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度。關(guān)鍵培養(yǎng)要點：血清質(zhì)量關(guān)鍵，需使用低內(nèi)毒素胎牛血清（<0.25EU/ml），劣質(zhì)血清會使細胞活力降低 28%，抗體分泌量減少 38%；無血清培養(yǎng)適配性較好，在無血清培養(yǎng)基中添加適量的生長因子，可維持細胞正常生長，且抗體純度能提高至 95% 以上，有利于后續(xù)的抗體純化；腹水制備規(guī)范，小鼠腹腔預先注射降植烷，7 天后接種 1.3×10?個細胞，15-21 天收集腹水，每只小鼠可收獲 3-6ml 腹水，腹水經(jīng)純化后抗體活性保持穩(wěn)定。凍存采用含 10% DMSO 的胎牛血清凍存液，程序降溫后液氮保存，復蘇后 48 小時貼壁率達 80%，抗體分泌功能恢復 86% 以上。
檢測鑒定：經(jīng)微生物檢測，無細菌、真菌、支原體污染，符合雜交瘤細胞的質(zhì)量標準?？贵w亞型鑒定明確，通過 ELISA、Western blot 等方法驗證，其分泌的抗體能與靶抗原特異性結(jié)合，且在不同檢測體系中均保持良好的反應性。染色體核型分析顯示，染色體數(shù)目為 84-94 條，融合了親本 B 淋巴細胞與骨髓瘤細胞的染色體特征，符合雜交瘤細胞的遺傳學特性。功能驗證中，將該抗體用于免疫熒光檢測，能特異性識別樣本中的靶抗原，熒光信號集中，背景干擾小，證明其在免疫檢測中的實用性。
應用領(lǐng)域：在免疫檢測方面，基于該細胞系分泌的抗體構(gòu)建的檢測試劑盒，對靶抗原的檢測靈敏度達 0.35ng/ml，線性范圍寬，適用于血清、組織等多種樣本類型中靶抗原的定量分析；在抗原表位分析中，利用該抗體的高特異性，通過一系列實驗確定了靶抗原上的特異性結(jié)合區(qū)域，為理解抗原的結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系提供了重要線索。在疾病診斷研究中，利用該抗體開發(fā)的免疫層析試紙條，可快速檢測相關(guān)疾病標志物，檢測時間僅需 12 分鐘，準確率達 90% 以上。此外，該細胞系可用于優(yōu)化抗體生產(chǎn)工藝，通過調(diào)整懸浮培養(yǎng)的條件，能使抗體產(chǎn)量提升 1.5-2.1 倍，有助于降低抗體規(guī)?；a(chǎn)的成本。
與其他雜交瘤細胞系相比，HB L20 細胞系的優(yōu)勢在于抗體分泌穩(wěn)定性強、傳代壽命較長，且在不同培養(yǎng)條件下抗體的特異性變化較小，適合用于標準化抗體的制備。通過該細胞系的應用，已助力開發(fā)出多種免疫檢測工具，廣泛應用于科研實驗和臨床診斷，為免疫學研究及相關(guān)疾病的檢測提供了有力支持。
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