BY-0053 NTERA-2人惡性多發(fā)性畸胎瘤細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0053
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- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/7/16 14:49:31
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NTERA-2人惡性多發(fā)性畸胎瘤細胞系
NTERA-2人惡性多發(fā)性畸胎瘤細胞系,是研究生殖細胞腫瘤及細胞分化機制的重要模型,源自人睪丸惡性畸胎瘤,因保留多能干細胞特性且可被誘導分化為多種體細胞類型,在畸胎瘤發(fā)病機制、胚胎發(fā)育模擬及再生醫(yī)學研究中具有不可替代的價值。
來源與背景:該細胞系于 1980 年由 Andrew P. Andrews 團隊從一位 22 歲男性患者的睪丸畸胎瘤組織中分離建立,是首ge能在體外穩(wěn)定傳代且保持多向分化潛能的惡性畸胎瘤細胞系。與普通腫瘤細胞系不同,其兼具腫瘤細胞的無限增殖能力和胚胎干細胞的多分化潛能,能模擬畸胎瘤中未分化細胞向神經、上皮等多種組織類型轉化的過程,為解析生殖細胞腫瘤的發(fā)生機制提供了理想模型,尤其適合研究畸胎瘤中干細胞樣細胞的調控網(wǎng)絡。
細胞特性:形態(tài)上呈圓形或橢圓形,排列松散,細胞質少而透亮,細胞核大且核仁顯著,未分化狀態(tài)下呈集落狀生長,具有典型的干細胞形態(tài)特征。核心特性為多能性標志物高表達,表達 Oct4、Nanog、Sox2 等胚胎干細胞核心轉錄因子,同時高表達 CD30 等畸胎瘤特異性抗原;可誘導分化能力,在視huang酸(RA)處理下,能高效分化為神經元、膠質細胞等神經細胞類型,分化率可達 70% 以上,也可在特定條件下分化為上皮細胞和肌肉細胞。細胞倍增時間約 48-56 小時,增殖速度中等,傳代時需用溫和消化液處理以保護細胞活性,傳代比例 1:3-1:5,連續(xù)傳代 40 次后仍保持多分化潛能。
培養(yǎng)條件:采用含 15% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養(yǎng)基,需添加 2mM 谷an酰胺和 1% 非必需氨基酸以維持多能性,部分培養(yǎng)體系會加入 bFGF 抑制自發(fā)分化。培養(yǎng)環(huán)境需嚴格控制在 37℃、5% CO?飽和濕度,每 2-3 天更換一次培養(yǎng)基,細胞密度維持在 10%-50% 之間,低密度培養(yǎng)更利于保持未分化狀態(tài)。與乳腺癌細胞系不同,其對血清質量極為敏感,需使用胚胎干細胞級胎牛血清,傳代時 0.05% 胰dan白酶 + EDTA 消化 5-7 分鐘,吹打力度輕柔以避免細胞損傷。
檢測鑒定:經微生物篩查,該細胞系無支原體、細菌、真菌污染,符合生物安全二級標準。免疫熒光檢測顯示,Oct4 和 Sox2 在細胞核內呈強陽性表達,CD30 膜表達陽性,符合畸胎瘤干細胞特征。RT-PCR 證實多能性基因 Nanog 和 Oct4 的 mRNA 水平顯著高于普通腫瘤細胞,分化后神經元標志物 β-III tubulin 表達上調 20 倍以上。核型分析呈現(xiàn)近三倍體核型,存在 12 號染色體三體和 17 號染色體部分重復,與臨床惡性畸胎瘤的遺傳學改變高度吻合。裸鼠成瘤實驗中,皮下接種可形成包含神經、上皮、軟骨等多種組織類型的畸胎瘤,驗證其體內多向分化能力。
應用領域:在畸胎瘤研究中,該細胞系常用于解析腫瘤干細胞的自我更新機制,研究發(fā)現(xiàn)其通過激活 Wnt/β-catenin 通路維持未分化狀態(tài),β-catenin 抑制劑可顯著降低 Oct4 表達并抑制集落形成,為靶向畸胎瘤干細胞的治療提供了理論依據(jù)。在神經分化研究中,是模擬神經元發(fā)育的經典模型,視huang酸誘導分化過程中,可觀察到神經干細胞標志物 Nestin 先升高后降低,最終形成成熟神經元網(wǎng)絡,為阿爾茨海默病等神經退行性疾病的細胞模型構建提供了工具。在藥物篩選方面,適用于評估抗畸胎瘤藥物的療效,通過檢測藥物對未分化細胞增殖及分化能力的影響,篩選能特異性殺傷腫瘤干細胞的候選化合物,如shun鉑對其的半數(shù)抑制濃度(IC50)約為 2.5μM,且能抑制畸胎瘤形成。此外,該細胞系可用于研究表觀遺傳調控在細胞分化中的作用,DNA 甲基轉移酶抑制劑處理后,其多能性基因的甲基化水平降低,分化潛能顯著改變,為理解細胞命運決定的表觀遺傳機制提供了線索。
該細胞系的du特優(yōu)勢在于能在體外模擬 “腫瘤發(fā)生” 與 “胚胎發(fā)育” 的交叉過程,通過對比其未分化與分化狀態(tài)的差異,可同時解析腫瘤惡變和細胞定向分化的分子機制。其分化過程的可調控性也使其成為研究細胞命運轉換的理想模型,為再生醫(yī)學中干細胞誘導分化的優(yōu)化提供了參考。
總之,NTERA-2 人惡性多發(fā)性畸胎瘤細胞系憑借其du特的多能性特征和穩(wěn)定的生物學行為,成為連接生殖細胞腫瘤研究與發(fā)育生物學的關鍵橋梁,為解析畸胎瘤發(fā)病機制、模擬胚胎發(fā)育過程及開發(fā)新型治療策略提供了堅實的實驗基礎。
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