W6/32小鼠雜交瘤細(xì)胞系
W6/32小鼠雜交瘤細(xì)胞系是免疫學(xué)與臨床診斷領(lǐng)域的重要工具,因能穩(wěn)定分泌抗人 HLA-ABC 抗原的單克隆抗體,在組織相容性研究、免疫檢測(cè)及移植醫(yī)學(xué)中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。
來源與背景:該細(xì)胞系源自 Balb/c 小鼠的 B 淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合產(chǎn)物。通過用人外周血淋巴細(xì)胞免疫小鼠,獲取能產(chǎn)生抗 HLA-ABC 抗體的 B 淋巴細(xì)胞,再與骨髓瘤細(xì)胞融合,經(jīng)篩選克隆得到 W6/32 細(xì)胞系。其融合兼顧了 B 淋巴細(xì)胞的抗體分泌能力和骨髓瘤細(xì)胞的無限增殖特性,為持續(xù)獲取特異性單克隆抗體提供了穩(wěn)定來源,是最早建立的抗 HLA-ABC 單抗細(xì)胞系之一。
細(xì)胞特性:形態(tài)上呈圓形或橢圓形,兼具 B 淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的形態(tài)特征,細(xì)胞核大而明顯,細(xì)胞質(zhì)豐富,貼壁生長(zhǎng)與懸浮生長(zhǎng)并存,以貼壁生長(zhǎng)為主,生長(zhǎng)狀態(tài)穩(wěn)定。核心特性是穩(wěn)定分泌高特異性抗體,所分泌的單克隆抗體可特異性識(shí)別人類主要組織相容性復(fù)合體 I 類分子(HLA-ABC)的共同抗原決定簇,與 HLA-A、HLA-B、HLA-C 抗原均能結(jié)合,且交叉反應(yīng)少,抗體效價(jià)高。細(xì)胞倍增時(shí)間約 30-40 小時(shí),傳代時(shí)需用胰dan白酶消化貼壁細(xì)胞,傳代比例 1:4-1:6,連續(xù)傳代多次后仍能保持穩(wěn)定的抗體分泌能力和特異性。
培養(yǎng)條件:常規(guī)采用含 10% 胎牛血清的 RPMI1640 培養(yǎng)基,添加 1% 青mei素 - 鏈mei素混合液預(yù)防污染。培養(yǎng)環(huán)境需維持在 37℃、5% CO?的飽和濕度培養(yǎng)箱中,每 2-3 天更換一次培養(yǎng)基,保證細(xì)胞生長(zhǎng)有充足的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)。由于該細(xì)胞系對(duì)培養(yǎng)條件較為敏感,血清質(zhì)量對(duì)其生長(zhǎng)和抗體分泌影響較大,需選擇優(yōu)質(zhì)胎牛血清。傳代時(shí),要注意將貼壁和懸浮的細(xì)胞都收集起來,避免細(xì)胞損失,接種密度需適宜,以維持細(xì)胞的良好生長(zhǎng)狀態(tài)和抗體分泌效率。
檢測(cè)鑒定:經(jīng)嚴(yán)格的微生物檢測(cè),該細(xì)胞系無支原體、細(xì)菌、真菌及常見病毒污染,確保了細(xì)胞系的純凈性。通過抗體效價(jià)測(cè)定,如 ELISA 法,可檢測(cè)其分泌抗體的活性和效價(jià),確認(rèn)抗體分泌能力的穩(wěn)定性。采用 Western blot、免疫熒光等方法,能驗(yàn)證抗體與 HLA-ABC 抗原的特異性結(jié)合能力,進(jìn)一步明確抗體的特異性。染色體核型分析顯示,其染色體數(shù)目為雙親細(xì)胞的總和,兼具兩種細(xì)胞的核型特征,驗(yàn)證了雜交瘤細(xì)胞的身份。
應(yīng)用領(lǐng)域:在組織相容性研究中,W6/32 細(xì)胞系分泌的抗體可用于 HLA-ABC 抗原的檢測(cè)與分型,助力探索人類白細(xì)胞抗原的多態(tài)性及遺傳規(guī)律,為研究免疫應(yīng)答的遺傳控制提供重要依據(jù)。在免疫組織化學(xué)與流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)中,該抗體可作為特異性探針,檢測(cè)組織或細(xì)胞表面 HLA-ABC 抗原的表達(dá)情況,用于腫瘤免疫、自身免疫病等相關(guān)研究,例如檢測(cè)腫瘤細(xì)胞表面 HLA-ABC 抗原的表達(dá)變化,分析其與腫瘤免疫逃逸的關(guān)系。在移植醫(yī)學(xué)中,可用于供體與受體的 HLA 配型檢測(cè),評(píng)估移植相容性,提高器官yi植的成功率,減少排斥反應(yīng)的發(fā)生。在診斷試劑研發(fā)中,其分泌的抗體是多種 HLA-ABC 檢測(cè)試劑盒的核心成分,為相關(guān)疾病的診斷提供了精準(zhǔn)的檢測(cè)工具。
總之,W6/32 小鼠雜交瘤細(xì)胞系憑借穩(wěn)定分泌高特異性抗人 HLA-ABC 單克隆抗體的特性,成為免疫學(xué)研究與臨床應(yīng)用中不ke或缺的工具,為推動(dòng)相關(guān)領(lǐng)域的發(fā)展提供了有力支持。
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