BY-0074 Ramos人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) BY-0074
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- 更新時(shí)間 2025/7/16 16:50:37
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Ramos人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞系
Ramos人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞系是研究非 EB 病毒相關(guān) B 細(xì)胞淋巴瘤的重要模型，因不攜帶 EB 病毒基因組且具備典型的成熟 B 淋巴細(xì)胞特征，在淋巴瘤發(fā)病機(jī)制、免疫表型分析及藥物研發(fā)領(lǐng)域應(yīng)用廣泛，為解析非病毒驅(qū)動(dòng)型 B 淋巴瘤的生物學(xué)行為提供了可靠工具。
來源與背景：該細(xì)胞系于 1977 年從一名 3 歲男性 Burkitt 淋巴瘤患者的外周血中分離建立，屬于非 EB 病毒關(guān)聯(lián)型 B 淋巴瘤細(xì)胞系的典型代表。與 Raji 細(xì)胞系不同，其未檢測(cè)到 EB 病毒基因組，更貼近散發(fā)性 Burkitt 淋巴瘤的臨床特征，尤其適合研究非病毒因素（如染色體易位）在 B 淋巴瘤發(fā)生中的作用，為探索 “單純遺傳學(xué)異常驅(qū)動(dòng)淋巴瘤發(fā)生” 的分子機(jī)制提供了理想樣本，填bu了非 EB 病毒相關(guān) B 淋巴瘤研究模型的空白。其明確的來源和長(zhǎng)期傳代穩(wěn)定性，使其成為對(duì)比研究病毒與非病毒相關(guān)淋巴瘤差異的重要工具。
細(xì)胞特性：形態(tài)上呈圓形或類圓形，懸浮生長(zhǎng)，無貼壁能力，細(xì)胞體積略小于 Raji 細(xì)胞，細(xì)胞質(zhì)清澈，可見少量嗜堿性顆粒，細(xì)胞核圓形或橢圓形，染色質(zhì)致密，核仁清晰，具有 Burkitt 淋巴瘤細(xì)胞的典型形態(tài)特征。核心特性為非 EB 病毒攜帶狀態(tài)，經(jīng)多次檢測(cè)未發(fā)現(xiàn) EB 病毒基因組及相關(guān)病毒蛋白（如 EBNA、LMP）表達(dá)，排除了病毒因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾，是研究宿主遺傳學(xué)異常單獨(dú)作用的理想模型；成熟 B 淋巴細(xì)胞表型，高表達(dá) B 細(xì)胞特異性標(biāo)志物 CD19、CD20、CD22，同時(shí)強(qiáng)表達(dá)表面免疫球蛋白 M（sIgM）和免疫球蛋白 D（sIgD），符合未受抗原刺激的成熟 B 細(xì)胞分化特征；高增殖與克隆形成能力，體外培養(yǎng)時(shí)增殖速度快，細(xì)胞倍增時(shí)間約 28-32 小時(shí)，克隆形成率約 55%，在裸鼠模型中接種后 2-3 周形成實(shí)體瘤，成瘤率達(dá) 90% 以上，腫瘤組織病理形態(tài)與原發(fā)淋巴瘤高度一致，模擬散發(fā)性 Burkitt 淋巴瘤的生長(zhǎng)特性。傳代時(shí)無需消化處理，直接吹打即可收獲細(xì)胞，傳代比例 1:4-1:6，連續(xù)傳代 50 次后仍保持穩(wěn)定的免疫表型和增殖活性，無自發(fā) EB 病毒感染現(xiàn)象。
培養(yǎng)條件：適宜采用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養(yǎng)基，添加 1% 非必需氨基酸和 2mM 谷an酰胺以維持細(xì)胞活性。培養(yǎng)環(huán)境需控制在 37℃、5% CO?飽和濕度，每 2-3 天更換一次培養(yǎng)基，細(xì)胞密度維持在 1×10?-1×10?個(gè) /ml 之間，密度過高會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞聚團(tuán)及活力下降。與貼壁細(xì)胞系不同，其對(duì)滲透壓敏感，培養(yǎng)基滲透壓需維持在 280-300mOsm/kg，波動(dòng)過大會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞腫脹或皺縮。傳代時(shí)通過離心（1000rpm，5 分鐘）收集細(xì)胞，用新鮮培養(yǎng)基重懸后接種，無需消化處理，操作過程中避免劇烈振蕩，以保持細(xì)胞完整性。低代次細(xì)胞建議每 20 代凍存一次，凍存液采用含 10% DMSO 的胎牛血清，復(fù)蘇后存活率可達(dá) 80% 以上。
檢測(cè)鑒定：經(jīng)嚴(yán)格微生物篩查，無支原體、細(xì)菌、真菌及外源病毒污染，符合實(shí)驗(yàn)細(xì)胞質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。免疫表型分析顯示，CD19、CD20 陽(yáng)性率均超過 95%，CD3、CD5 陰性，sIgM/sIgD 雙陽(yáng)性，符合成熟 B 淋巴細(xì)胞的免疫特征。分子遺傳學(xué)檢測(cè)證實(shí)存在標(biāo)志性 t (8;14) 染色體易位，c-MYC 基因與免疫球蛋白重鏈基因融合導(dǎo)致異常表達(dá)，但未檢測(cè)到 EB 病毒 DNA 及 RNA，與散發(fā)性 Burkitt 淋巴瘤的遺傳學(xué)特征wan全一致。功能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)中，體外刺激可分泌少量免疫球蛋白 M，裸鼠尾靜脈注射后可發(fā)生骨髓浸潤(rùn)，模擬臨床淋巴瘤的骨髓轉(zhuǎn)移特征，為研究淋巴瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制提供了功能模型。
應(yīng)用領(lǐng)域：在發(fā)病機(jī)制研究中，該細(xì)胞系常用于解析單純 c-MYC 激活在 B 淋巴瘤中的作用，研究發(fā)現(xiàn)其 c-MYC 持續(xù)高表達(dá)可通過上調(diào) cyclin D2、E2F1 等基因加速細(xì)胞周期進(jìn)程，同時(shí)抑制 p53 通路功能，獨(dú)立驅(qū)動(dòng) B 細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化，為理解非病毒相關(guān) Burkitt 淋巴瘤的 “遺傳學(xué)驅(qū)動(dòng)” 機(jī)制提供了關(guān)鍵線索。在免yi治療研究中，是評(píng)估 B 細(xì)胞靶向藥物療效的常用模型，針對(duì) CD20 的單克隆抗體可特異性結(jié)合該細(xì)胞系，通過補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒性（CDC）和抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性（ADCC）發(fā)揮殺傷作用，殺傷效率可達(dá) 75% 以上，為 B 淋巴瘤免yi治療方案的優(yōu)化提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。在藥物篩選方面，適用于篩選抗非 EB 病毒相關(guān) B 淋巴瘤的候選藥物，通過對(duì)比其與 Raji 細(xì)胞系對(duì)藥物的反應(yīng)差異，可區(qū)分藥物的病毒依賴與非依賴效應(yīng)，如某些靶向 B 細(xì)胞受體信號(hào)通路的抑制劑對(duì)其抑制作用更顯著。此外，該細(xì)胞系可用于研究 B 淋巴瘤的免疫逃逸機(jī)制，與樹突狀細(xì)胞共培養(yǎng)時(shí)可抑制樹突狀細(xì)胞成熟，減少細(xì)胞因子分泌，為解析淋巴瘤如何逃避免疫監(jiān)視提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
該細(xì)胞系的優(yōu)勢(shì)在于能穩(wěn)定保留 Burkitt 淋巴瘤的標(biāo)志性遺傳學(xué)改變且無 EB 病毒干擾，為研究 “單純?nèi)旧w易位驅(qū)動(dòng)腫瘤發(fā)生” 的機(jī)制提供了理想模型。通過與 Raji 細(xì)胞系的對(duì)比實(shí)驗(yàn)，可清晰區(qū)分病毒與非病毒因素在淋巴瘤發(fā)生中的不同作用，如在 c-MYC 抑制劑敏感性實(shí)驗(yàn)中，其對(duì)藥物的反應(yīng)更直接反映 c-MYC 本身的靶向效應(yīng)，排除了病毒蛋白的干擾。
總之，Ramos 人 B 淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞系憑借其非 EB 病毒攜帶狀態(tài)、典型的 B 細(xì)胞特征及穩(wěn)定的生物學(xué)特性，成為研究非病毒相關(guān) B 淋巴瘤的重要工具，為解析單純遺傳學(xué)異常驅(qū)動(dòng)的淋巴瘤發(fā)病機(jī)制、開發(fā)特異性治療藥物及優(yōu)化臨床治療策略提供了堅(jiān)實(shí)的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
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