BY-0724 Fox-NY小鼠骨髓瘤細(xì)胞系
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- 公司名稱(chēng) 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) BY-0724
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/7/9 11:33:28
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Fox-NY小鼠骨髓瘤細(xì)胞系
Fox-NY小鼠骨髓瘤細(xì)胞系源于 BALB/c 小鼠的漿細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化，是雜交瘤技術(shù)中制備單克隆抗體的重要工具細(xì)胞，憑借優(yōu)異的融合性能與穩(wěn)定的遺傳特性，在免疫學(xué)研究和生物制藥領(lǐng)域占據(jù)重要地位。
該細(xì)胞系具有典型的骨髓瘤細(xì)胞形態(tài)與表型。顯微鏡下，細(xì)胞呈圓形或類(lèi)圓形，以懸浮生長(zhǎng)為主，部分細(xì)胞聚集成小簇，核質(zhì)比高，染色質(zhì)呈細(xì)顆粒狀，可見(jiàn) 1-2 個(gè)清晰核仁，胞質(zhì)嗜堿性，符合漿細(xì)胞惡變后的形態(tài)特征。免疫表型分析顯示，其表達(dá) B 淋巴細(xì)胞分化抗原 CD138（ Syndecan-1）和 CD38，不表達(dá)免疫球蛋白重鏈和輕鏈，這種抗體分泌缺陷型表型是其適用于雜交瘤制備的關(guān)鍵前提 —— 與分泌抗體的 B 淋巴細(xì)胞融合后，雜交瘤細(xì)胞可專(zhuān)一性表達(dá)目標(biāo)抗體，避免自身抗體的干擾。
在體外培養(yǎng)體系中，F(xiàn)ox-NY 細(xì)胞展現(xiàn)出良好的生長(zhǎng)適應(yīng)性。最適培養(yǎng)條件為含 10% 胎牛血清的 RPMI 1640 培養(yǎng)基，在 37℃、5% CO?飽和濕度環(huán)境下，細(xì)胞增殖穩(wěn)定，傳代周期約 36-48 小時(shí)，對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞活力可達(dá) 90% 以上。與其他骨髓瘤細(xì)胞系相比，其對(duì)培養(yǎng)環(huán)境波動(dòng)的耐受性更強(qiáng)，在血清濃度 5%-15% 范圍內(nèi)均能維持正常增殖，這一特性降低了培養(yǎng)操作的難度。此外，該細(xì)胞系凍存復(fù)蘇性能優(yōu)異，經(jīng)液氮凍存 6 個(gè)月后復(fù)蘇，存活率仍可保持 80% 以上，便于長(zhǎng)期保存與規(guī)?；瘧?yīng)用。
Fox-NY 細(xì)胞的核心優(yōu)勢(shì)體現(xiàn)在雜交瘤制備中的高效性。其攜帶次黃piao呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（HPRT）缺陷突變，在含氨基蝶呤、次黃piao呤和胸腺嘧啶的選擇培養(yǎng)基中無(wú)法存活，而免疫后的小鼠脾臟 B 淋巴細(xì)胞雖具備 HPRT 活性，但體外存活時(shí)間有限（通常不超過(guò) 2 周）。兩者融合形成的雜交瘤細(xì)胞，既繼承了 Fox-NY 細(xì)胞的無(wú)限增殖能力，又獲得 B 淋巴細(xì)胞的 HPRT 功能，可在選擇培養(yǎng)基中選擇性存活，這一篩選機(jī)制能高效剔除未融合的親本細(xì)胞與自身融合細(xì)胞，顯著提高雜交瘤克隆的篩選效率。
在單克隆抗體制備流程中，F(xiàn)ox-NY 細(xì)胞的應(yīng)用貫穿關(guān)鍵環(huán)節(jié)。經(jīng)抗原免疫的小鼠脾臟細(xì)胞與該細(xì)胞在聚乙二醇（PEG）介導(dǎo)下融合后，通過(guò)選擇培養(yǎng)基培養(yǎng) 10-14 天，可獲得初步雜交瘤克隆。隨后采用有限稀釋法進(jìn)行單克隆化培養(yǎng)，結(jié)合 ELISA 檢測(cè)抗體特異性與效價(jià)，最終篩選出能穩(wěn)定分泌目標(biāo)抗體的細(xì)胞株。例如，在抗細(xì)胞因子單克隆抗體制備中，F(xiàn)ox-NY 細(xì)胞與免疫小鼠的 B 淋巴細(xì)胞融合后，可快速獲得能特異性結(jié)合 IL-6、TNF-α 等因子的雜交瘤，為炎癥疾病的診斷與治療提供關(guān)鍵試劑。
除抗體研發(fā)外，F(xiàn)ox-NY 細(xì)胞在腫瘤生物學(xué)研究中也有重要價(jià)值。作為漿細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的模型，其可用于探究多發(fā)性骨髓瘤的發(fā)病機(jī)制 —— 研究發(fā)現(xiàn)，該細(xì)胞系中 STAT3 信號(hào)通路持續(xù)激活，通過(guò)上調(diào) Mcl-1 等抗凋亡基因維持細(xì)胞存活，這一機(jī)制與人類(lèi)多發(fā)性骨髓瘤的分子特征高度相似，為開(kāi)發(fā) STAT3 抑制劑提供了理想的篩選模型。
在生物制藥領(lǐng)域，F(xiàn)ox-NY 細(xì)胞衍生的雜交瘤可通過(guò)大規(guī)模懸浮培養(yǎng)生產(chǎn)單克隆抗體。其分泌的抗體具有特異性強(qiáng)、親和力高的特點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)診斷（如病原體檢測(cè)、腫瘤標(biāo)志物篩查）和靶向治療（如自身免疫病的抗體藥物）。近年來(lái)，通過(guò)基因工程改造 Fox-NY 細(xì)胞，使其表達(dá)人源化抗體恒定區(qū)，可有效降低鼠源抗體引發(fā)的免疫排斥反應(yīng)，推動(dòng)單克隆抗體藥物的臨床轉(zhuǎn)化。
此外，該細(xì)胞系在免疫學(xué)基礎(chǔ)研究中也發(fā)揮作用。將特定抗原基因?qū)?Fox-NY 細(xì)胞后，可作為抗原呈遞細(xì)胞研究 B 細(xì)胞的活化機(jī)制；通過(guò)與 T 細(xì)胞共培養(yǎng)，能觀察骨髓瘤細(xì)胞對(duì)免疫細(xì)胞的抑制作用，解析腫瘤微環(huán)境中的免疫逃逸策略，為免疫調(diào)節(jié)藥物的研發(fā)提供理論依據(jù)。
隨著細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展，F(xiàn)ox-NY 細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)體系日趨成熟，結(jié)合生物反應(yīng)器的規(guī)?；囵B(yǎng)，可實(shí)現(xiàn)單克隆抗體的高效生產(chǎn)，進(jìn)一步提升其在生物制藥領(lǐng)域的應(yīng)用價(jià)值，為抗體藥物的研發(fā)與生產(chǎn)提供堅(jiān)實(shí)支撐。
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