PC-3人前列腺癌細(xì)胞系
PC-3人前列腺癌細(xì)胞系是研究去勢(shì)抵抗性前列腺癌的標(biāo)gan模型,以雄激素受體(AR)陰性、強(qiáng)骨轉(zhuǎn)移能力及惡性增殖特性為核心特征,在前列腺癌進(jìn)展機(jī)制、骨轉(zhuǎn)移規(guī)律及靶向藥物研發(fā)中應(yīng)用廣泛,為解析雄激素非依賴型前列腺癌的惡性進(jìn)展提供了可靠實(shí)驗(yàn)載體。
來(lái)源與背景:1979 年從 62 歲男性患者骨轉(zhuǎn)移灶分離建立,屬去勢(shì)抵抗性前列腺癌(CRPC)模型。相比原發(fā)灶來(lái)源細(xì)胞系,其更貼近臨床晚期前列腺癌的雄激素非依賴狀態(tài),尤其適合研究去勢(shì)抵抗機(jī)制。作為首ge明確骨轉(zhuǎn)移特性的前列腺癌細(xì)胞系,長(zhǎng)期傳代后仍穩(wěn)定保持 AR 陰性及轉(zhuǎn)移潛能,填bu了骨轉(zhuǎn)移型前列腺癌研究模型的空白,至今仍是國(guó)際該領(lǐng)域研究的標(biāo)準(zhǔn)參照。
細(xì)胞特性:形態(tài)呈上皮樣或梭形,貼壁生長(zhǎng)且排列松散,無(wú)極性,細(xì)胞質(zhì)少,核大不規(guī)則、核仁明顯,核質(zhì)比 1:1.5,具轉(zhuǎn)移灶腫瘤細(xì)胞惡性形態(tài)。核心特性包括:AR wan全缺失,不表達(dá) AR 及前列腺特異性抗原(PSA),增殖與雄激素信號(hào)無(wú)關(guān),與 30% CRPC 患者表型一致;強(qiáng)骨轉(zhuǎn)移能力,Transwell 穿透能力是 LNCaP 的 5-7 倍,裸鼠尾靜脈注射后骨轉(zhuǎn)移率 80%,4 周形成骨、肺轉(zhuǎn)移灶;高增殖成瘤性,倍增時(shí)間 36-48 小時(shí),克隆形成率 60%,裸鼠皮下成瘤率 100%,生長(zhǎng)快于 DU145。傳代需消化 3-5 分鐘,比例 1:3-1:6,傳代 60 次仍保 AR 陰性及侵襲性。
培養(yǎng)條件:適用含 10% 胎牛血清的 F-12K 培養(yǎng)基,加 1% 抗菌劑,37℃、5% CO?環(huán)境。細(xì)胞密度需 20%-80%,過(guò)度匯合致形態(tài)改變、侵襲力降 15%-20%。對(duì)雄激素不敏感,睪酮處理無(wú)增殖影響。傳代用含血清培養(yǎng)基終止消化,凍存液為 10% DMSO 胎牛血清,復(fù)蘇后 24 小時(shí)貼壁率超 90%,功能恢復(fù)正常。
檢測(cè)鑒定:無(wú)微生物污染,符合實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。免疫熒光顯示 CK8、CK18 陽(yáng)性率超 90%,AR 和 PSA 陰性,表型穩(wěn)定。核型為亞三倍體,含 7 號(hào)染色體三體、8 號(hào)染色體長(zhǎng)臂擴(kuò)增(涉及 MYC 過(guò)表達(dá)),與 50% CRPC 患者遺傳學(xué)改變吻合。骨基質(zhì)提取物處理后增殖升 30%,RANKL 表達(dá)上調(diào),證實(shí)對(duì)骨微環(huán)境的適應(yīng)性。
應(yīng)用領(lǐng)域:去勢(shì)抵抗機(jī)制研究中,揭示 PI3K/Akt/mTOR 通路持續(xù)激活是增殖關(guān)鍵,靶向抑制 mTOR 可抑制增殖 50% 以上,為開(kāi)發(fā)靶向藥提供依據(jù)。骨轉(zhuǎn)移研究發(fā)現(xiàn),其高表達(dá) CXCR4,與骨微環(huán)境 CXCL12 結(jié)合促轉(zhuǎn)移,阻斷 CXCR4 使轉(zhuǎn)移灶減 60%,為防轉(zhuǎn)移提供靶點(diǎn)。藥物篩選中,是 CRPC 新藥評(píng)估的理想模型,PARP 抑制劑與相關(guān)藥物聯(lián)用抑制增殖效guo顯著,協(xié)同指數(shù) 0.6。還用于研究與骨微環(huán)境互作,其分泌的 PTHrP 促進(jìn)破骨細(xì)胞活化,形成 “骨轉(zhuǎn)移惡性循環(huán)”,為理解骨轉(zhuǎn)移機(jī)制提供基礎(chǔ)。
與 LNCaP、DU145 等相比,PC-3 的優(yōu)勢(shì)在于更強(qiáng)骨轉(zhuǎn)移能力和wan全雄激素非依賴性,能真實(shí)模擬晚期 CRPC 特征。對(duì)其研究可為前列腺癌去勢(shì)抵抗及骨轉(zhuǎn)移防治提供實(shí)驗(yàn)依據(jù),推動(dòng)治療策略優(yōu)化。
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