腸道特異性標志物與轉(zhuǎn)運功能：高表達小腸上皮特異性標志物，如絨毛蛋白（villin，陽性率 98%）、蔗糖 - 異麥芽糖酶（SI，陽性率 95%），其 SI 表達量是 PK15-B1 細胞的 12 倍，與原代小腸上皮細胞相當；具有活躍的營養(yǎng)吸收功能，葡萄糖轉(zhuǎn)運速率達 25nmol/mg 蛋白 / 小時，氨基酸吸收效率顯著高于shen源細胞系，能模擬小腸的物質(zhì)吸收生理過程。

屏障功能與免疫調(diào)節(jié)：在 Transwell 小室中可形成完整的上皮屏障，跨上皮電阻（TEER）值達 400Ω?cm2，顯著高于 PK15-B1 細胞（150Ω?cm2），且能分泌黏液層成分黏蛋白 2（MUC2），分泌量達 6μg/10?細胞 / 天；同時表達 toll 樣受體 4（TLR4，陽性率 90%），可響應脂多糖刺激分泌 IL-8 等細胞因子，模擬腸道的免疫防御功能。

病毒敏感性譜：對豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）、豬流行性腹瀉病毒（PEDV）等腸道病毒的感染效率達 99%，TGEV 感染后 24 小時出現(xiàn)典型細胞病變（細胞融合、脫落），病毒滴度達 10?.? TCID??/mL（是 PK15-B1 細胞的 5 倍）；因高表達氨基肽酶 N（APN）受體，對冠狀病毒的吸附效率是shen源細胞系的 8 倍，尤其適合腸道 RNA 病毒研究。

吸收障礙模型：在輪狀病毒感染后，ZYM-DIEC02 細胞的鈉 - 葡萄糖共轉(zhuǎn)運體 1（SGLT1）表達量下降 60%，葡萄糖吸收速率降低 50%，模擬仔豬腹瀉時的營養(yǎng)吸收障礙，為解析病毒性腹瀉的致病機制提供關(guān)鍵模型。

屏障損傷研究：通過該細胞系研究大腸桿菌毒素對腸道屏障的破壞，發(fā)現(xiàn)腸毒素可使細胞間緊密連接蛋白 occludin 表達下降 70%，TEER 值降低 65%，與仔豬腸道損傷的病理變化一致性達 90%，顯著高于shen源細胞系。

病毒分離與鑒定：作為 TGEV 分離的 “金標準” 細胞系，ZYM-DIEC02 從臨床糞便樣本中的病毒分離率達 92%（PK15-B1 細胞僅 35%），且能在 48 小時內(nèi)觀察到典型細胞病變，為疫病快速診斷提供依據(jù)。我國首ci分離的 PEDV 變異株即依賴該細胞系完成純化。

疫苗效力評價：在 TGEV 滅活疫苗研發(fā)中，該細胞系的病毒中和試驗結(jié)果與仔豬攻毒保護率一致性達 93%，較 PK15-B1 細胞提升 25%，被農(nóng)業(yè)部列為腸道病毒疫苗效力檢測的shou選細胞系。

腸道吸收研究：基于其轉(zhuǎn)運功能特性，評估藥物的腸道吸收效率，某口服抗生素在該模型中的吸收速率與仔豬體內(nèi)吸收量的相關(guān)性達 88%，遠高于shen源細胞系的 60%，為藥物劑型優(yōu)化提供數(shù)據(jù)支持。

腸道毒性篩選：建立高通量藥物腸道毒性評價體系，通過檢測細胞活力、屏障完整性及炎癥因子分泌，某非甾體抗炎藥在該模型中的半數(shù)毒性濃度（TC??）與仔豬腸道損傷劑量的相關(guān)性達 85%，顯著優(yōu)于傳統(tǒng)細胞系。

培養(yǎng)基：DMEM/F12 培養(yǎng)基添加 10% 胎牛血清、1% 非必需氨基酸，pH 維持在 7.2-7.4；為維持腸道功能，可添加 20ng/mL 表皮生長因子（EGF），使微絨毛長度增加 30%。

傳代流程：當細胞融合度達 80% 時，消化處理后按 1:3 比例接種，離心速度 800rpm，24 小時貼壁率超 90%，避免過度融合（＞90% 會導致屏障功能下降）。

凍存保護：采用含 10% DMSO 的wan全培養(yǎng)基，細胞密度 1×10?個 /mL，程序降溫至 - 80℃過夜后轉(zhuǎn)入液氮，復蘇時 37℃水浴 1 分鐘，接種至預涂膠原蛋白的培養(yǎng)瓶，存活率可達 85%。

屏障功能檢測：細胞接種 Transwell 小室 7 天后，通過 Millicell ERS-2 測定 TEER 值，或檢測熒光標記葡聚糖的通透性，評估屏障完整性，結(jié)果變異系數(shù)＜8%。

病毒培養(yǎng)優(yōu)化：細胞以 2×10?個 / 孔接種 24 孔板，培養(yǎng) 48 小時后換含 2% 血清的維持液，加入 TGEV 病毒液（MOI=0.1），37℃吸附 2 小時后換液，48 小時后通過間接免疫熒光檢測病毒 N 蛋白，陽性率可達 98%。

優(yōu)勢：

局限性：