BY-1441 IPI-FX豬回腸上皮細(xì)胞株細(xì)胞系
- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-1441
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/8/1 13:37:07
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細(xì)胞株和菌株、胎牛血清、標(biāo)準(zhǔn)品和對照品、生化試劑、ELISA試劑盒、抗體和抗原、細(xì)胞因子、技術(shù)服務(wù)、實驗耗材和消耗品、儀器設(shè)備。
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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來源與建立背景
形態(tài)與生長特征
功能特性
腸屏障標(biāo)志物與屏障功能：高表達(dá)腸黏膜屏障特異性標(biāo)志物，如閉鎖小帶蛋白 1（ZO-1，陽性率 98%）、黏蛋白 2（MUC2，陽性率 96%），其 ZO-1 在細(xì)胞間的線性表達(dá)率達(dá) 95%（PAM-T1R4-1 無此結(jié)構(gòu)）；跨上皮電阻（TEER）值達(dá) 650Ω?cm2（顯著高于 PAM-T1R4-1 的 150Ω?cm2），對 FITC - 葡聚糖的通透性僅為 PAM-T1R4-1 的 1/20，模擬回腸黏膜的物理屏障功能，與豬回腸組織的屏障特性一致性達(dá) 93%。
吸收與代謝功能：表達(dá)高水平的營養(yǎng)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，如葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體 SGLT1（陽性率 97%）、氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)體 B?AT1（陽性率 95%），葡萄糖吸收效率達(dá) 80%（PAM-T1R4-1 幾乎無吸收功能）；能分泌腸肽激素如胰高血糖素樣肽 - 2（GLP-2），含量達(dá) 25pg/10?細(xì)胞 / 天，可促進(jìn)自身增殖（細(xì)胞活力提升 30%），模擬回腸的營養(yǎng)感知與修復(fù)調(diào)控功能。
腸道免疫活性：表達(dá) toll 樣受體 4（TLR4，陽性率 90%），經(jīng)脂多糖（LPS）刺激后，分泌白細(xì)胞介素 - 8（IL-8）達(dá) 600pg/10?細(xì)胞 / 24h（是 PAM-T1R4-1 的 1.5 倍），同時釋放防御素 β2（DEFB2）達(dá) 40ng/10?細(xì)胞 / 24h，對腸道致病菌的抑菌率達(dá) 75%，天然免疫應(yīng)答模式與豬回腸黏膜高度吻合。
腸道屏障功能機(jī)制研究
屏障損傷與修復(fù)模型：通過該細(xì)胞系發(fā)現(xiàn)大腸桿菌黏附素可使 ZO-1 表達(dá)下降 45%，TEER 值降低 50%，而 GLP-2 處理可逆轉(zhuǎn)這一損傷（ZO-1 恢復(fù) 70%），與仔豬腹瀉模型的腸屏障修復(fù)規(guī)律一致性達(dá) 92%（PAM-T1R4-1 模型無法模擬），揭示 “致病菌 - 屏障破壞 - GLP-2 修復(fù)” 的調(diào)控軸。
營養(yǎng)物質(zhì)對屏障的調(diào)控：在低纖維培養(yǎng)條件下，細(xì)胞 MUC2 分泌下降 35%，屏障通透性增加 40%，補(bǔ)充膳食纖維發(fā)酵產(chǎn)物丁酸后，MUC2 恢復(fù)至正常水平的 85%，證實短鏈脂肪酸對腸屏障的保護(hù)作用，其分子機(jī)制研究為飼料配方優(yōu)化提供依據(jù)。
腸道感染性疾病研究
沙門氏菌入侵機(jī)制：利用其回腸上皮特性，發(fā)現(xiàn)沙門氏菌可通過 Ⅲ 型分泌系統(tǒng)分泌效應(yīng)蛋白 SipA，促進(jìn)細(xì)胞骨架重排（F - 肌動蛋白聚集增加 2 倍），入侵效率達(dá) 35%（PAM-T1R4-1 的入侵率僅 8%），與仔豬沙門氏菌病的回腸定植規(guī)律正相關(guān)（R2=0.91），研究結(jié)果較巨噬細(xì)胞模型更接近腸道感染特征。
耐藥菌生物膜形成：在耐頭孢噻呋大腸桿菌感染中，IPI-FX 細(xì)胞表面可觀察到生物膜形成（覆蓋率達(dá) 60%），而 PAM-T1R4-1 表面僅為 15%，通過轉(zhuǎn)錄組分析發(fā)現(xiàn)細(xì)胞外基質(zhì)蛋白 FN1 表達(dá)上調(diào)是生物膜定植的關(guān)鍵，為抗生物膜藥物研發(fā)提供靶點。
腸道藥物與飼料添加劑研發(fā)
腸黏膜修復(fù)劑篩選：建立基于 TEER 值恢復(fù)率的高通量篩選模型，某植物提取物可使 LPS 損傷的 IPI-FX 細(xì)胞屏障功能恢復(fù) 70%，MUC2 分泌增加 40%，仔豬腹瀉實驗顯示回腸絨毛高度增加 25%，證實模型的應(yīng)用價值。
益生菌協(xié)同效應(yīng)評價：在羅伊氏乳桿菌與細(xì)胞共培養(yǎng)實驗中，可使大腸桿菌的黏附率下降 60%，IL-8 分泌減少 55%，且該過程依賴細(xì)胞 TLR2 的激活（敲除后保護(hù)作用消失），與 PAM-T1R4-1 的免疫激活機(jī)制形成腸道 - 肺部的差異對比。
基礎(chǔ)培養(yǎng)方案
培養(yǎng)基：DMEM/F12 培養(yǎng)基添加 10% 胎牛血清、20ng/mL 表皮生長因子（EGF），pH 維持在 7.2-7.4；為誘導(dǎo)分化，可添加 1μM 視huang酸，培養(yǎng) 14 天后微絨毛長度增加 2 倍（PAM-T1R4-1 無需此步驟）。
傳代流程：當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá) 80% 時，使用 0.25% yi酶 + EDTA 消化（避免過度消化破壞緊密連接），按 1:3 比例接種（與 PAM-T1R4-1 相同），24 小時貼壁率超 90%，需定期檢測 ZO-1 表達(dá)確認(rèn)屏障功能。
凍存保護(hù)：采用含 10% DMSO 的wan全培養(yǎng)基，細(xì)胞密度 2×10?個 /mL，程序降溫至 - 80℃過夜后轉(zhuǎn)入液氮，復(fù)蘇時 37℃水浴 1 分鐘，存活率可達(dá) 85%，通過 TEER 值測定驗證功能穩(wěn)定性（應(yīng)≥500Ω?cm2）。
功能實驗操作
屏障功能檢測：細(xì)胞接種 Transwell 小室（孔徑 0.4μm），培養(yǎng) 10 天后檢測 TEER 值（應(yīng)≥600Ω?cm2），加入致病菌后 24 小時測定通透性變化，結(jié)果變異系數(shù)＜7%；PAM-T1R4-1 對照組用于對比免疫應(yīng)答差異。
細(xì)菌黏附實驗：將 CFSE 標(biāo)記的大腸桿菌（MOI=100）與細(xì)胞共孵育 2 小時，流式細(xì)胞術(shù)檢測黏附率（正常應(yīng)＜10%），適合抗感染藥物篩選。
優(yōu)勢：
腸屏障功能完整性：是唯yi能模擬回腸上皮屏障與吸收功能的永生化細(xì)胞系，ZO-1 表達(dá)與 TEER 值顯著優(yōu)于 PAM-T1R4-1 等免疫細(xì)胞系，為腸道屏障研究提供專屬模型。
腸道致病菌敏感性高：對沙門氏菌、大腸桿菌的感染效率是 PAM-T1R4-1 的 4-5 倍，生物膜形成能力更接近在體腸道環(huán)境，大幅提升腸道感染研究的準(zhǔn)確性。
營養(yǎng)代謝研究專屬：具備完整的營養(yǎng)吸收與代謝功能，可用于飼料添加劑的腸道耐受性與功效評價，研究范圍遠(yuǎn)超免疫細(xì)胞系。
局限性：
免疫功能局限：雖能分泌炎癥因子，但缺乏 PAM-T1R4-1 的吞噬功能，無法模擬腸道巨噬細(xì)胞的抗感染作用，需與免疫細(xì)胞系聯(lián)合使用。
培養(yǎng)周期長：分化誘導(dǎo)需 14 天，實驗周期是 PAM-T1R4-1 的 2 倍，不適合快速篩選實驗。
成本較高：專用培養(yǎng)基與生長因子使培養(yǎng)成本是 PAM-T1R4-1 的 1.5 倍，大規(guī)模實驗經(jīng)濟(jì)壓力較大。
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