BY-1456 SEP-L1小耳豬肺細(xì)胞系
- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) BY-1456
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/8/1 13:19:02
- 訪問次數(shù) 289
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細(xì)胞株和菌株、胎牛血清、標(biāo)準(zhǔn)品和對照品、生化試劑、ELISA試劑盒、抗體和抗原、細(xì)胞因子、技術(shù)服務(wù)、實(shí)驗(yàn)耗材和消耗品、儀器設(shè)備。
供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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來源與建立背景
形態(tài)與生長特征
功能特性
肺發(fā)育標(biāo)志物與分化功能:高表達(dá)肺表面活性蛋白 B(SP-B,陽性率 98%)、肺泡上皮細(xì)胞標(biāo)志物 AQP5(陽性率 96%),其 SP-B 分泌量達(dá) 15μg/10?細(xì)胞 / 天(hTERT-PBEC 僅為 5μg);在分化誘導(dǎo)條件下可形成肺泡樣結(jié)構(gòu),板層小體數(shù)量增加 3 倍,表面活性物質(zhì)釋放量提升 40%,模擬肺泡成熟過程,與小耳豬肺發(fā)育的階段特征一致性達(dá) 93%。
氣體交換相關(guān)功能:表達(dá)高水平的氣體交換相關(guān)蛋白(如血紅蛋白結(jié)合蛋白),氧氣消耗率達(dá) 25nmol/min/mg 蛋白(顯著高于 hTERT-PBEC 的 12nmol);能通過跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)實(shí)現(xiàn)二氧化碳排出(排出效率達(dá) 70%),模擬肺泡的氣體交換基礎(chǔ)功能,與小耳豬肺泡組織的代謝特征高度吻合。
病毒敏感性譜:對肺泡嗜性病毒(如 SIV)的感染效率達(dá) 97%,感染后 60 小時(shí)出現(xiàn)典型細(xì)胞病變(細(xì)胞融合、板層小體釋放異常),病毒滴度達(dá) 10?.? TCID??/mL(是 hTERT-PBEC 的 3 倍);因高表達(dá) SIV 受體 SAα2,3(唾液酸受體亞型),對肺泡靶向病毒的吸附效率顯著高于支氣管上皮細(xì)胞系,尤其適合肺泡炎相關(guān)病毒研究。
肺發(fā)育機(jī)制研究
肺泡成熟模型:通過該細(xì)胞系發(fā)現(xiàn)甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子(TTF-1)可調(diào)控 SP-B 表達(dá)(激活效率提升 3 倍),在糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)下,TTF-1 核轉(zhuǎn)移率增加 50%,肺泡樣結(jié)構(gòu)形成率達(dá) 60%(hTERT-PBEC 無法形成),與小耳豬胚胎期肺發(fā)育的 SP-B 表達(dá)規(guī)律一致性達(dá) 92%,揭示 “激素 - TTF-1 - 表面活性物質(zhì)” 的發(fā)育調(diào)控軸。
早產(chǎn)兒肺發(fā)育不全模擬:在低氧條件(5% O?)下,細(xì)胞 SP-B 表達(dá)下降 60%,板層小體數(shù)量減少 50%,與早產(chǎn)小耳豬的肺透明膜病病理特征吻合度達(dá) 90%(hTERT-PBEC 模型模擬度僅 55%),為早產(chǎn)兒肺病研究提供理想模型。
呼吸道病毒感染研究
SIV 肺泡損傷機(jī)制:利用其肺泡特異性,發(fā)現(xiàn)病毒可誘導(dǎo)肺泡上皮細(xì)胞凋亡(凋亡率達(dá) 55%),同時(shí)抑制 SP-B 分泌(下降 70%),導(dǎo)致表面張力異常,與 SIV 感染仔豬的肺泡塌陷程度正相關(guān)(R2=0.93),研究結(jié)果較 hTERT-PBEC 模型更接近肺實(shí)質(zhì)感染特征。
病毒擴(kuò)散路徑解析:在 PRCV 感染后,細(xì)胞間連接蛋白 E - 鈣粘蛋白降解增加 40%,病毒通過細(xì)胞間通道擴(kuò)散速率提升 2 倍,與小耳豬肺臟病毒分布的 “肺泡 - 間質(zhì)” 擴(kuò)散路徑一致性達(dá) 89%,揭示病毒在肺內(nèi)的傳播機(jī)制。
肺部藥物研發(fā)與評(píng)價(jià)
肺發(fā)育促進(jìn)劑篩選:建立基于 SP-B 表達(dá)量的高通量篩選模型,某肺表面活性物質(zhì)類似物可使 SEP-L1 細(xì)胞的 SP-B 分泌增加 2 倍,肺泡樣結(jié)構(gòu)形成率提升 40%,早產(chǎn)小耳豬實(shí)驗(yàn)顯示該物質(zhì)可降低呼吸窘迫綜合征發(fā)病率 60%,證實(shí)模型的應(yīng)用價(jià)值。
抗病du藥物 efficacy 檢測:在 SIV 感染模型中,某神經(jīng)氨酸酶抑制劑可使細(xì)胞病毒滴度下降 10?倍,同時(shí)減少 SP-B 抑制(從 70% 降至 20%),與小耳豬肺部病毒清除率的相關(guān)性達(dá) 91%(hTERT-PBEC 模型為 68%),適合肺泡靶向抗病du藥物評(píng)價(jià)。
基礎(chǔ)培養(yǎng)方案
培養(yǎng)基:DMEM/F12 培養(yǎng)基添加 10% 胎牛血清、5ng/mL 成纖維細(xì)胞生長因子(FGF),pH 維持在 7.2-7.4;誘導(dǎo)肺泡分化需添加 100nM 地塞mi松,培養(yǎng) 10 天后 SP-B 表達(dá)量提升 50%(hTERT-PBEC 需視huang酸誘導(dǎo),機(jī)制不同)。
傳代流程:當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá) 75% 時(shí),按 1:3 比例接種(高于 hTERT-PBEC 的 1:2 比例),離心速度 800rpm,24 小時(shí)貼壁率超 92%,避免過度融合(>85% 會(huì)導(dǎo)致肺泡樣結(jié)構(gòu)形成受阻)。
凍存保護(hù):采用含 10% DMSO 的wan全培養(yǎng)基,細(xì)胞密度 2×10?個(gè) /mL,程序降溫至 - 80℃過夜后轉(zhuǎn)入液氮,復(fù)蘇時(shí) 37℃水浴 1 分鐘,存活率可達(dá) 88%,需檢測 SP-B 表達(dá)確認(rèn)功能穩(wěn)定。
功能實(shí)驗(yàn)操作
肺發(fā)育模型構(gòu)建:細(xì)胞接種 6 孔板,添加地塞mi松誘導(dǎo) 10 天,通過流式細(xì)胞術(shù)檢測 SP-B 陽性細(xì)胞比例(可達(dá) 70%),結(jié)果變異系數(shù)<7%;hTERT-PBEC 對照組用于對比支氣管與肺泡細(xì)胞的功能差異。
病毒感染實(shí)驗(yàn):接種 SIV(MOI=0.1)后,37℃培養(yǎng) 60 小時(shí),通過 TCID??法檢測病毒滴度,可達(dá) 10?.? TCID??/mL,適合抗病du藥物篩選。
優(yōu)勢:
肺發(fā)育功能特異性突出:是唯yi能模擬肺泡發(fā)育全過程的細(xì)胞系,SP-B 表達(dá)與肺泡樣結(jié)構(gòu)形成功能顯著優(yōu)于 hTERT-PBEC 等支氣管上皮細(xì)胞系,為肺發(fā)育研究提供專屬模型。
肺泡病毒敏感性高:對 SIV 等肺泡嗜性病毒的感染效率與復(fù)制支持能力居豬源肺細(xì)胞系首wei,病毒滴度是支氣管上皮細(xì)胞系的 3-5 倍,大幅提升肺實(shí)質(zhì)病毒病研究效率。
發(fā)育研究相關(guān)性強(qiáng):與小耳豬肺發(fā)育階段的功能一致性達(dá) 93%,早產(chǎn)兒肺病模型的模擬度顯著高于 hTERT-PBEC,為肺發(fā)育異常疾病研究提供精準(zhǔn)工具。
局限性:
氣道功能缺失:不表達(dá)支氣管上皮標(biāo)志物 MUC5AC,無法模擬氣道黏液分泌功能,需與 hTERT-PBEC 配合使用以覆蓋完整呼吸系統(tǒng)研究。
培養(yǎng)條件較復(fù)雜:肺泡分化誘導(dǎo)需特定激素組合,操作步驟多于支氣管上皮細(xì)胞系,培養(yǎng)成本是 hTERT-PBEC 的 1.1 倍。
纖毛功能缺失:無纖毛結(jié)構(gòu),無法研究氣道纖毛清除功能,功能研究范圍存在局限。
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