供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10次/20次 |
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貨號 | G&VS10193.3 | 主要用途 | 僅供科研實驗 |
主要用途:冰凍切片組織CDK2蛋白表達熒光顯微鏡技術(shù)試劑盒是一種旨在從動物細(xì)胞或組織中分離出完整而純化的線粒體細(xì)胞器的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。適合于動物軟組織(肝或腦組織)和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體的制備。其制備物產(chǎn)量高,可以被用于細(xì)胞凋亡、信號傳遞、能量代謝、蛋白組學(xué)和病理生理學(xué)等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶,即到即用,性能穩(wěn)定,分離產(chǎn)量和純度堪稱同類產(chǎn)品*。
冰凍切片組織CDK2蛋白表達熒光顯微鏡技術(shù)試劑盒注意事項
- 本產(chǎn)品為10次(1克動物組織或5 X 107細(xì)胞)或50次(200毫克動物組織或1 X 107細(xì)胞)操作
- 實際操作的動物組織重量或細(xì)胞量與試劑使用量按比例調(diào)整:例如200毫克動物組織:試劑用量是標(biāo)準(zhǔn)用量的五分之一
- 所有操作均須嚴(yán)格在4℃或以下狀態(tài)進行
- 操作時,須戴手套
- 操作時,須無菌操作,避免污染母液,尤其是裂解液(Reagent B)和保存液(Reagent E)
- 建議使用足夠的樣品量
- 建議嚴(yán)格控制操作時間
- 通常勻化次數(shù)為20至40下(或細(xì)胞顆粒群/組織塊狀消失為止)達到80%的細(xì)胞裂解為理想狀態(tài),但不同的組織或細(xì)胞類型會存在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升勻漿物的細(xì)胞裂解程度:完整細(xì)胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50%可以增加勻化次數(shù)
- 通常孵育5分鐘(不宜超過5分鐘)達到80%的細(xì)胞裂解為理想狀態(tài),但不同的組織或細(xì)胞類型會存在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升裂解物的細(xì)胞裂解程度:完整細(xì)胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50%可以增加孵育時間和渦旋震蕩次數(shù)
- 對于難以裂解的細(xì)胞,例如HeLa細(xì)胞,采用物理勻漿法是優(yōu)先推薦的技術(shù)處理
- 通常1克動物組織或5 X 107細(xì)胞的線粒體含量為50微克以上線粒體蛋白
12. 如果需要計量線粒體,稀釋后數(shù)分鐘內(nèi)完成,否則線粒體將分解
13. 本產(chǎn)品所獲得的線粒體純度和產(chǎn)量zui為理想。通過調(diào)整10000g離心速度到3000至8000g,可以提高粗提的線粒體純化程度,但線粒體產(chǎn)量相應(yīng)減少
14. 如果需要獲得99%以上純度的線粒體,使用動物細(xì)胞/組織高質(zhì)純化線粒體分離試劑盒-GMS10006.3
- 線粒體正常活性測定方法是: CITRATE SYNTHASE活性、氧化磷酸化、細(xì)胞色素吸收峰譜等
- 線粒體內(nèi)外膜完整測定方法是:CYTOCHROME C OXIDASE活性和熒光JC染色
- 本公司提供線粒體套餐:ROS、NAO、MitoTRACK、JGB、線粒體溶解等
- 本公司提供系列線粒體分析試劑產(chǎn)品
試劑盒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
- 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
- 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的線粒體內(nèi)外膜完整
- 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的線粒體維持正?;钚?/span>
- 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定不含污染性蛋白酶和核酶
試劑盒保存方式
保存凈化液(Reagent C)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里,有效保證6月
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