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NPY 神經肽Y(NPY)ELISA 試劑盒

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捕獲法

血清中針對某些抗原的特異性IgM常和特異性IgG同時存在,后者會干擾IgM抗體的測定。因此測定IgM抗體多用捕獲法,先將所有血清IgM(包括異性IgM和非特異性IgM)固定在固相上,在去除IgG后再測定特異性IgM。操作步驟如下:

⑴將抗人IgM抗體連接在固相載體上,形成固相抗人IgM。洗滌。

⑵加入稀釋的血清標本:保溫反應后血清中的IgM抗體被固相抗體捕獲。洗滌除去其他免疫球蛋白和血清中的雜質成分。

⑶加入特異性抗原試劑:它只與固相上的特異性IgM結合。洗滌。

⑷加入針對特異性的酶標抗體:使之與結合在固相上的抗原反應結合。洗滌。

⑸加底物顯色:如有顏色顯示,則表示血清標本中的特異性IgM抗體存在,是為陽性反應。

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親和素是一種糖蛋白,一分子親和素可以與四個生物素小分子發(fā)生專一親和作用,類似抗原與抗體親和。它們之間的作用力是目前已知強的非共價作用。80年代后,隨著生物素-親合素系統(tǒng)(BAS)作用被發(fā)現(xiàn),這一親和作用被結合應用到ELISA技術上,大大提高了后者反應的靈敏性與專一性。生物素很易與蛋白質(如抗體等)以共價鍵結合。這樣,結合了酶的親和素分子與結合有特異性抗體的生物素分子產生反應,既起到了多級放大作用,又由于酶在遇到相應底物時的催化作用而呈色,達到檢測未知抗原(或抗體)分子的目的。



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