本試劑盒采用雙抗體夾心法，雙抗體夾心原理，是基于要測試的抗原具有二價以上的特性，能識別包被抗體，同時能識別檢測抗體，具體過程如下：

1. 將特異性抗體與固相載體連接，形成固相抗體，洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)，并用無關(guān)蛋白封閉空余結(jié)合位點(diǎn)。
2. 加受檢標(biāo)本使之與固相抗體接觸反應(yīng)一段時間，讓標(biāo)本中的抗原與固相載體上的抗體結(jié)合，形成固相抗原復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合的物質(zhì)。
3. 加生物素標(biāo)記抗體，使固相免疫復(fù)合物上的抗原與生物素標(biāo)記抗體結(jié)合。*洗滌未結(jié)合的生物素標(biāo)記抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量正相關(guān)。
4. 加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素，使生物素標(biāo)記抗體與辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素結(jié)合。*洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)記物。此時固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量正相關(guān)。
5. 加入底物顯色，即可計算標(biāo)本濃度。
6. 注：一個抗體分子上可以標(biāo)記上若干個生物素分子，一個生物素分子可以結(jié)合一個辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素，從而帶來了大量的辣根過氧化物酶結(jié)合到抗體上，比傳統(tǒng)的直接辣根過氧化物酶標(biāo)記抗體具有更高的敏感性和放大效應(yīng)。