QIAGEN Plasmid Kits應用重力流陰離子交換柱純化轉(zhuǎn)染級質(zhì)粒DNA。該試劑盒可純化獲得至多10 mg的質(zhì)粒DNA。離心獲得澄清的裂解產(chǎn)物和異丙醇沉淀。

QIAGEN Plasmid Kits純化質(zhì)粒DNA適合多種應用，如：

• 轉(zhuǎn)染

• 克隆
• PCR

• 體外轉(zhuǎn)錄

• Performance

  QIAGEN Plasmid Kit利用重力流QIAGEN陰離子交換柱技術高效純化質(zhì)粒DNA。產(chǎn)量可達10 mg（Giga）、2.5 mg（Mega）、500 µg（Maxi）、或100 µg（Midi）高拷貝質(zhì)粒DNA（培養(yǎng)體積取決于質(zhì)粒拷貝數(shù)、插入片段大小、宿主菌株和培養(yǎng)基。）QIAGEN Plasmid Kits純化的質(zhì)粒DNA適合多種應用，如：轉(zhuǎn)染（參見"Transfection efficiency versus plasmid purification method"）、克隆和體外轉(zhuǎn)錄。

  Principle

  QIAGEN-tips內(nèi)*的陰離子交換樹脂專為純化核酸設計。它*的分離特性，使純化的DNA的純度相當于連續(xù)2次CsCl梯度離心得到的DNA純度。預裝的QIAGEN-tips利用重力流原理工作，縮短了純化質(zhì)粒的手動操作時間。整套QIAGEN質(zhì)粒純化體系避免有毒物質(zhì)，減小對使用者和環(huán)境的危害。

  Procedure

  使用QIAGEN Plasmid Kits，細菌裂解物通過離心澄清。澄清后的裂解物上樣到陰離子交換柱，質(zhì)粒DNA在適當?shù)牡望}條件和pH條件下與樹脂進行選擇性結(jié)合。RNA、蛋白質(zhì)、代謝產(chǎn)物和和其它低分子量雜質(zhì)用中鹽洗滌液去除，用高鹽緩沖液洗脫純質(zhì)粒DNA（參見"QIAGEN Plasmid Kit procedures"）。得到的DNA用異丙醇沉淀濃縮和脫鹽后，離心收集。