產(chǎn)品描述 ：

Balance CD 293 培養(yǎng)基適用于懸浮培養(yǎng)條件下的HEK293細胞（如293-F,293-T, Expi-293F 等）的高密度生長和瞬時轉(zhuǎn)染表達。 Balance CD 293 培養(yǎng)基含有細胞生長所需的全部營養(yǎng)成 份，無需添加任何添加物即可使用。（注意：此培養(yǎng)基不包含抗生素以及血清）

產(chǎn)品特點 :

? 瞬時轉(zhuǎn)染專用培養(yǎng)基，適用于HEK293細胞高密度懸浮培養(yǎng)

? 無蛋白、無動物源、化學成分限定

? 即用型*培養(yǎng)基,無需添加額外成分 基礎參數(shù)外觀：澄清透明紅色液體 滲透壓：275±15 mOSM pH:6.9-7.4 無菌檢測:無菌 內(nèi)毒素： <5 EU/mL 儲存條件：2-8℃，避光 效期：12個月 產(chǎn)品用途：僅用于科學研究，不適用于人類或動物的診斷和治療

產(chǎn)品使用方法:

細胞馴化 1 ）直接馴化 大部分情況下，培養(yǎng)于其他培養(yǎng)基中的細胞，可以直接適應Balance CD 293 medium，只要 按照日常傳代方式（稀釋）更換培養(yǎng)基即可。

2）漸進式馴化 注意：選用低代次、處于對數(shù)生長期的細胞進行馴化

①在原培養(yǎng)基中復蘇細胞并繼續(xù)使用該培養(yǎng)基傳代2到3次至細胞生長穩(wěn)定，當細胞密度達到 2x106 cells/ml后進行傳代，傳代細胞密度控制在0.5-0.6×106 cells/mL，5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng) 基或其他無血清培養(yǎng)基與Balance CD 293培養(yǎng)基的比例為75:25；

②將細胞置于37℃，5% CO2，轉(zhuǎn)速為110-175 rpm的恒溫搖床中進行培養(yǎng)；

③當細胞密度3-4天后達到3x106 cells/ml且細胞活率>90%，傳代時5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其 他無血清培養(yǎng)基與Balance CD 293培養(yǎng)基的比例為50:50，細胞密度控制在0.5×106 cells/mL。如細胞生長慢，可離心上清，留20%條件培養(yǎng)基，加入80%的5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他 無血清培養(yǎng)基與Balance  CD 293 培養(yǎng)基比例為75:25的混合培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)；

④重復步驟③逐步增加Balance CD 293培養(yǎng)基所占的比例(5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無 血清培養(yǎng)基與Balance  CD 293 培養(yǎng)基的比例為25:75至10:90）直到全部的Balance  CD 293 培養(yǎng)基；

⑤經(jīng)過在全部的 Balance  CD 293 培養(yǎng)基中的幾次傳代培養(yǎng)，傳代后3-4天細胞的密度可以達 到2-3×106 cells/mL，細胞活率大于90%，這說明細胞已經(jīng)*適應了Balance  CD 293 培養(yǎng)基。 之后進行細胞的傳代培養(yǎng)時，細胞的起始密度可以降到0.3×106 cells/mL，一般傳代2-3次后再 進行轉(zhuǎn)染實驗。

注意: 一般細胞馴化過程中，前三代細胞的狀態(tài)可能不是很好，但一般從第四代開始狀態(tài)會有 改善 細胞傳代 1） 取細胞培養(yǎng)樣品，人工或儀器測定細胞密度以及活率； 2） 計算傳代所需的細胞用量，建議起始細胞密度為0.2-0.4×106 cells/mL。建議復蘇的細胞至 少培養(yǎng)兩代后再用于其他用途。傳代培養(yǎng)體積建議為15-20 mL（100 mL的培養(yǎng)瓶）或50-60 mL （250 mL 的培養(yǎng)瓶）； 3） 將細胞置于37℃，5%CO2，轉(zhuǎn)速為110-175 rpm的恒溫搖床中進行培養(yǎng)，3-4天傳代一次。 細胞轉(zhuǎn)染在Balance CD 293培養(yǎng)基中，采用商業(yè)化轉(zhuǎn)染試劑（例如 Gibco 293Fectin™ ExpiFectamine™ 293 Transfection Kit ）或 PEI 可以實現(xiàn)對 HEK293 細胞的高效轉(zhuǎn)染。