產(chǎn)品描述 CW003培養(yǎng)基適用于sf9、High Five等昆蟲細胞懸浮培養(yǎng)和瞬時表達，含有細胞生長的全 部營養(yǎng)成分，無需添加物即可使用。 產(chǎn)品特點 ? 產(chǎn)品不含血清 ? 即用型*培養(yǎng)基，無需添加額外成分 ? 支持sf9、High Five等昆蟲細胞的懸浮培養(yǎng)馴化與高密度培養(yǎng) ? 支持桿狀病毒載體表達系統(tǒng)生產(chǎn)重組基因蛋白 基礎(chǔ)參數(shù)外觀 澄清透明淡黃色或黃色液體 滲透壓 375-420 mOsm/kg pH 6.0-6.4 無菌檢測 無菌 內(nèi)毒素 <5 EU/mL 儲存條件 2-8℃，避光 效期 12個月 產(chǎn)品用途 僅用于科學(xué)研究，不適用于人類或動物的診斷和治療 產(chǎn)品使用方法 細胞馴化與傳代 1） 培養(yǎng)條件 溫度：27oC；推薦搖床轉(zhuǎn)速：110-130 rpm；傳代細胞密度控制在0.8-1.2×106 cells/mL。 2） 直接馴化 大部分情況下，培養(yǎng)于其他培養(yǎng)基中的sf9、High Five細胞，可以直接適應(yīng)至CW003培養(yǎng) 基，只要按照日常傳代方式（稀釋）更換培養(yǎng)基即可。 3） 漸進式馴化 注意：選用低代次、處于對數(shù)生長期的細胞進行馴化。 ①在原培養(yǎng)基中復(fù)蘇細胞并繼續(xù)使用該培養(yǎng)基傳代2到3次至細胞生長穩(wěn)定，使用原培養(yǎng)基 +CW003培養(yǎng)基（CW003比例從25%至90%）逐漸馴化，傳代細胞密度控制在0.8-1.1×106 cells/mL，每48h進行傳代。②待細胞在含90%以上CW003培養(yǎng)基生長正常后，可嘗試將細胞傳代至* CW003培養(yǎng)基 中，并連續(xù)傳代3-4次，如細胞保持穩(wěn)定生長，即已適應(yīng)至CW003培養(yǎng)基。 細胞復(fù)蘇 1） 迅速取出凍存的細胞，在37℃水浴條件下進行快速解凍（可以在水中輕輕晃動，時間控制 在120s以內(nèi)），至凍存管內(nèi)剩余小塊冰晶。 2） 在生物安全柜中，將融化的細胞全部轉(zhuǎn)移至無菌離心管中，加入10 mL預(yù)熱至37℃的培養(yǎng) 基，離心換液（175 g，5 min）去除全部上清，加入20-30mL預(yù)熱至37℃新鮮培養(yǎng)基重懸，后 轉(zhuǎn)移至搖瓶培養(yǎng)。 細胞凍存 1） 凍存細胞時，要選擇處于對數(shù)生長期、狀態(tài)良好，活力≥98%的的細胞； 2） 事先計算好凍存的細胞管數(shù)和所用的培養(yǎng)基的體積，凍存密度為2.5-3.5×107 （通常凍存 濃度為1.0-2.0×107）cells/ml/支； 3） 細胞凍存液配制： 45%新鮮培養(yǎng)基+45%原培養(yǎng)基（上清）+10%DMSO，充分混勻，存放于4℃，一般為當 天用當天制備； 4） 以175 g，5 min的條件離心收集細胞，棄上清，用凍存培養(yǎng)基（ 4℃ ）重懸細胞； 5） 將重懸的細胞液迅速分裝細胞到無菌的凍存管中，每支1ml，并貼好標簽； 6） 將細胞凍存管放到程序降溫凍存盒（注意填充異丙醇，4℃預(yù)冷）中，置于-80℃ 冰箱(每 分鐘下降1℃)，過夜存放后將細胞轉(zhuǎn)入液氮罐中進行保存。