使用說明。
1. 本產(chǎn)品主要用于細(xì)胞培養(yǎng)上清等體積較大的液體樣品中外泌體的分離純化。
2. 樣品準(zhǔn)備。 細(xì)胞培養(yǎng)上清轉(zhuǎn)入離心管， 3000 g， 4 ℃離心 5 min， 棄沉淀， 上清轉(zhuǎn)移至新的離心
管中，用于外泌體純化。
3. 磁珠準(zhǔn)備。取出試劑盒中的瓶裝磁珠，震蕩混勻（Vortex） 30 sec， 利用移液器吸取 0.2 ml 磁珠，
加入 50 ml 離心管中， 3000 g， 4 ℃離心 2 min， 棄上清。
4. 磁珠洗滌。 加入 10 ml， 4 ℃預(yù)冷的 PBS，震蕩混勻（Vortex） 30 sec， 3000 g， 4 ℃離心 5 min，
棄上清。

5. 外泌體純化體系。

6. 外泌體純化體系配制。 根據(jù)外泌體純化體系表，配制外泌體純化體系， 若樣品體積不足 15.6 ml
時(shí)， 可以用 ddH2O 補(bǔ)齊體積。也可以按照比例減少試劑盒中各試劑的用量（請(qǐng)勿隨意更改各
試劑比例， 易導(dǎo)致外泌體純化失?。?，構(gòu)建小體系外泌體純化系統(tǒng)，但每個(gè)樣品中磁珠用量不
得少于 0.2 ml，否則降低外泌體純化效果。
7. 孵育。 外泌體純化體系配制完成后， 置于旋轉(zhuǎn)混合器中， 4 ℃旋轉(zhuǎn)混合 60 min。
8. 磁珠收集。 孵育完畢將離心管轉(zhuǎn)入離心機(jī)， 3000 g， 4 ℃離心 5 min， 沉淀磁珠， 棄上清； 或?qū)?br/>離心管置于磁力架上， 4 ℃靜置 5-10 min， 使磁珠聚集， 棄上清。
9. 殘余液體去除。將裝有磁珠沉淀的離心管轉(zhuǎn)入離心機(jī)， 3000 g， 4 ℃離心 1 min， ， 用移液器吸
盡管中殘余液體。
10. 外泌體洗脫。加入 0.3-1.0 ml Buffer EXE（PBS 或 ddH2O，洗脫液體積較大時(shí)，得到的外泌體
濃度較低，反之， 則高）， 劇烈振蕩（Vortex） 30 sec。
11. 外泌體收集。 7000 g， 4 ℃離心 2 min， 將離心管置于磁力架上（可以有效聚集磁珠，防止磁珠
散落在溶液中，降低外泌體純度） ， 轉(zhuǎn)移上清至新的 EP 管中，即為純化的外泌體溶液。
12. 過濾。 利用 PBS 潤洗針式過濾器 A 和 B（即用這兩種濾器過濾 5 ml PBS） ， 并利用針式過濾
器 A 過濾外泌體溶液，除去體積較大雜質(zhì)。 濾液再用針式過濾器 B 過濾，除去體積較小的雜
質(zhì)，得到高純度的外泌體溶液。
13. 純化的外泌體溶液可立即用于粒徑檢測(cè)（NTA 分析），或保存在-80 ℃。