產(chǎn)品詳情：

PureCube 100 INDIGO Ni-Agarose系列采用了全新的INDIGO配基。這款產(chǎn)品能夠在20 mM DTT和20 mM EDTA環(huán)境下穩(wěn)定純化帶有His標(biāo)簽的蛋白（圖1）。和其他市面上同類產(chǎn)品比較，PureCube 100 INDIGO Ni-Agarose的也具有更高的蛋白結(jié)合能力（圖２）。

圖1：PureCube 100 INDIGO Ni-Agarose 適用于 20 mM EDTA和20 mM DTT環(huán)境體系。 SDS-PAGE顯示通過E.coli 表達(dá)的GFP通過 PureCube 100 INDIGO Ni-Agarose純化（純化體系含有20 mM EDTA和20 mM DTT）獲得很高的產(chǎn)量(>80 mg/ml) 和很高的純度。

圖2：PureCube 100 INDIGO Ni-Agarose 系列優(yōu)于競爭者同類產(chǎn)品。His標(biāo)簽GFP 通過三種填料進(jìn)行純化. 緩沖液環(huán)境： pH 7.4, 10 mM DTT, 20 mM EDTA. 咪唑濃度: 結(jié)合: 10 mM, 清洗: 20 mM, 洗脫: 250 mM.

這款新型的INDIGO配基不會被EDTA洗脫，也不會在清洗的過程中被高pH的NaOH破壞。在不需要任何重生的前提下，PureCube 100 INDIGO Ni-Agarose可被反復(fù)使用８次以上，而其純化的效率卻沒有任何降低（圖３）。

圖3：PureCube 100 INDIGO Ni-Agarose 可被反復(fù)使用多次而無須再生，純化效率并無明顯變化. 8份同樣的含有GFP樣品通過1毫升 PureCube 100 INDIGO Ni-Agarose進(jìn)行純化8輪純化. 每輪之間純化體系只簡單使用緩沖液清洗（PBS 和10 mM咪唑）.

M: 參照

L: 細(xì)胞裂解液

S: 含有GFP的細(xì)胞裂解液

Cube Biotech提供的PureCube 100 INDIGO Ni-Agarose是以50%懸浮液狀態(tài)。為了方便通過Western Blot實驗驗證His標(biāo)簽蛋白，我們也提供高特異性His抗體—PentaHis antibody.

產(chǎn)品優(yōu)勢：

（1）100 µm 瓊脂糖微球提供高流速；

（2）在去污劑和多種添加劑成分環(huán)境下依然保持有效，洗脫幾次后其純化的效率幾乎不會降低，實用pH為４－９；

（3）高結(jié)合率（高達(dá)８０ mg/ml）和高純度；

（4）高流速下仍保持高純度蛋白純化能力；

（5）即使在低目標(biāo)蛋白濃度環(huán)境下保持高回收率；

（6）可直接適用于真核細(xì)胞培養(yǎng)液

針對pull-down實驗，Cube Biotech同時提供新型PureCube INDIGO Ni-MagBeads磁性微球產(chǎn)品系列。此系列同樣系列采用了全新的INDIGO配基并結(jié)合鎳離子。此系列產(chǎn)品在高達(dá)20 mM DTT 和 20 mM EDTA環(huán)境體系里具有很高的目標(biāo)蛋白結(jié)合能力（圖4）。每批PureCube INDIGO Ni-MagBeads均以25%懸浮液狀態(tài)出貨。

圖4：使用 PureCube INDIGO Ni-MagBeads來純化His標(biāo)簽蛋白，即使在高達(dá)10 mM DTT和 20 mM EDTA的環(huán)境下仍可以得到很高的產(chǎn)量和純度：15 mL E.coli 細(xì)胞裂解液含有重組綠色熒光蛋白（GFP）和人 JNK1蛋白通過 250 µL PureCube INDIGO Ni-MagBeads 純化. 整個實驗過程中使用的緩沖液含有 10 mM DTT 和 20 mM EDTA. 每毫升磁珠最終純化總量 89 mg 的GFP 和48 mg JNK1 . （MW: 分子量; E1-E3: 洗脫部分 1-3）

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