NBS2022 EZ poly™DT轉(zhuǎn)染試劑
- 公司名稱 上海諾寧生物科技有限公司
- 品牌 NoninBio
- 型號 NBS2022
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時(shí)間 2023/12/14 20:27:40
- 訪問次數(shù) 112
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
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EZ poly™DT轉(zhuǎn)染試劑
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 包裝規(guī)格 |
NBS2022-0.5ml | EZ poly™DT轉(zhuǎn)染試劑 | 0.5ml |
NBS2022-1ml | EZ poly™DT轉(zhuǎn)染試劑 | 1ml |
NBS2022-5ml | EZ poly™DT轉(zhuǎn)染試劑 | 5x1ml |
產(chǎn)品簡介:
EZ poly™DT轉(zhuǎn)染試劑是一款適用于難轉(zhuǎn)細(xì)胞的DNA專用轉(zhuǎn)染試劑，可用于質(zhì)粒DNA的高效傳送。它具有很強(qiáng)的DNA轉(zhuǎn)染能力，與其它轉(zhuǎn)染試劑相比，具有轉(zhuǎn)染效率高、不受血清影響、毒性低、穩(wěn)定性好、轉(zhuǎn)染簡單易行、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。
應(yīng)用范圍:
EZ poly™DT轉(zhuǎn)染試劑可適用于眾多難轉(zhuǎn)染細(xì)胞株的 DNA轉(zhuǎn)染、瞬時(shí)轉(zhuǎn)染及穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。適用于多種貼壁細(xì)胞系，特別適用于各種難轉(zhuǎn)細(xì)胞如BMDC、4T1、CT26、DC2.4等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞，均可得到較高的轉(zhuǎn)染效率，且重復(fù)性好。
保存條件:
2-8℃保存一年
運(yùn)輸：
常溫運(yùn)輸
質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)染:
以24孔板為例，請參考表1的轉(zhuǎn)染規(guī)模調(diào)整，步驟如下:
1 | 細(xì)胞接種: 每孔接種0.5~1.0×105個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞培養(yǎng)12~24小時(shí)，使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度達(dá)到60~70%融合度 |
2 | 質(zhì)粒稀釋: 將0.4 µg質(zhì)粒稀釋于Opti-MEM培養(yǎng)基中，終體積10 µL |
3 | 復(fù)合物制備: 按比例取適量EZ poly™DT轉(zhuǎn)染試劑稀釋于Opti-MEM培養(yǎng)基中，終體積10 µL，室溫孵育5分鐘后與質(zhì)粒稀釋液混勻 |
4 | 室溫靜止20分鐘 |
5 | 每孔20 µL復(fù)合物加入細(xì)胞培養(yǎng)板中，混勻，37℃培養(yǎng)18~48小時(shí)后檢測基因表達(dá)，無需更換培養(yǎng)基 |
質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)染優(yōu)化:
可通過改變細(xì)胞密度、DNA濃度以及EZ poly™DT轉(zhuǎn)染試劑濃度對轉(zhuǎn)染進(jìn)行優(yōu)化。保證細(xì)胞融合度在60%以上，EZ poly™DT轉(zhuǎn)染試劑(µL):DNA (µg)可以在1:1和5:1之間調(diào)整。
表1. 不同培養(yǎng)板所需轉(zhuǎn)染試劑和DNA的用量
培養(yǎng)板 | 單孔面積 | 接種 培養(yǎng)基 | Opti-MEM 稀釋后終體積 | DNA轉(zhuǎn)染 | |
試劑用量 | DNA | ||||
96孔板 | 0.3cm2 | 200µL | 2×5µL | 0.4µL | 0.2µg |
24孔板 | 2.0cm2 | 500µL | 2×10µL | 0.8µL | 0.4µg |
12孔板 | 4.0cm2 | 1mL | 2×20µL | 1.6µL | 0.8µg |
6孔板 | 10.0cm2 | 2mL | 2×50µL | 2.0µL | 1.0µg |
60mm | 20.0cm2 | 5mL | 2×0.1mL | 8.0µL | 4.0µg |
100mm | 60.0cm2 | 15mL | 2×0.3mL | 24µL | 12µg |
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