StarLighter SYBR Green qPCR Mix (Universal)
StarLighter 染料法 qPCR 預(yù)混液（通用型）
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
StarLighter SYBR Green qPCR Mix 是一款含基因工程酶的 qPCR 試劑。 該基因工程酶耐受高濃度的 SYBR Green I 染料，反應(yīng)體系中加入足夠多的 SYBR Green I 染料， 能夠降低熒光信號(hào)達(dá)到閾值所需的循環(huán)數(shù) (Ct值），提高信噪比、線(xiàn)性和靈敏度。StarLighter SYBR Green qPCR Mix 擴(kuò)增特異性強(qiáng)， 能有效減少非特異性擴(kuò)增， 數(shù)據(jù)結(jié)果更加可靠。 產(chǎn)品能有效擴(kuò)增復(fù)雜模板， 能有效應(yīng)對(duì)高 GC 或高 AT 的目的片段。

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1. 擴(kuò)增特異性強(qiáng)，數(shù)據(jù)結(jié)果可靠；
2. 擴(kuò)增效率高，Ct 值提前；
3. 信噪比高，靈敏度高；
4. 高 GC 或高 AT 的片段擴(kuò)增效果好；
5. 耐受抑制劑能力強(qiáng)。

產(chǎn)品應(yīng)用
1. 基因表達(dá)分析；
2. 低拷貝數(shù)基因檢測(cè)；
3. 基因敲除驗(yàn)證；
4. 基因表達(dá)驗(yàn)證；
5. RNA 拷貝數(shù)檢測(cè)（病毒及病菌等檢測(cè)）。

產(chǎn)品性能
1、擴(kuò)增特異性強(qiáng)，性能表現(xiàn)優(yōu)異

與眾多國(guó)內(nèi)外品牌 qPCR Mix 相比，啟衡星 SYBR Green qPCR Mix 表現(xiàn)出超好的性能。

Fig.1 不同試劑的 qPCR 結(jié)果準(zhǔn)確性比較。以人的 cDNA 為模板，使用同廠家試劑，擴(kuò)增長(zhǎng)度為 219 bp 的片段，GC%=64%  (TR 基因 )。分別得到 StarLighter SYBR Green qPCR Mix 與各品牌的擴(kuò)增和熔解曲線(xiàn)圖；SL—StarLighter SYBR Green qPCR  Mix，得到優(yōu)秀的擴(kuò)增曲線(xiàn)，熒光信號(hào)強(qiáng)，溶解曲線(xiàn)及電泳條帶單一 、準(zhǔn)確。

2、擴(kuò)增效率高，線(xiàn)性范圍好，低拷貝檢測(cè)靈敏度高

Fig.2 不同試劑對(duì)連續(xù)梯度稀釋模板的定量結(jié)果比 較。 以 KAPA Ion Torrent Library Quantification Kit  中濃度為 8.3 pM 的標(biāo)準(zhǔn)品作為 S1，依次 5 倍稀釋 得到 (S2-S10) 為模板，分別用 StarLighter SYBR  Green qPCR Mix 與供應(yīng)商 KP 進(jìn)行 qPCR 定量獲得 的擴(kuò)增曲線(xiàn)及熔解曲線(xiàn)圖。StarLighter SYBR Green  qPCR Mix，從 S1-S10 擴(kuò)增效率 (Eff =100.48%）好， 擴(kuò)增曲線(xiàn)優(yōu)異， 熒光信號(hào)強(qiáng)，溶解曲線(xiàn)單一。

3、熒光信號(hào)強(qiáng)，靈敏度高

Fig.3 不同試劑擴(kuò)增曲線(xiàn)的熒光強(qiáng)度比較。 使用同 樣模板和引物，使用市面上各品牌的 qPCR 試劑得 到擴(kuò)增曲線(xiàn)圖，右圖為去掉 Rox 后的各品牌的熒光 信號(hào)值比較，供應(yīng)商 K 與 StarLighter SYBR Green  qPCR Mix 熒光信號(hào)強(qiáng)度更高。

4、Ct 值出現(xiàn)更早

Fig.4 不同試劑 qPCR 結(jié)果的 Ct 值比較。以人 DNA 為模板，使用不同廠家試劑，擴(kuò)增長(zhǎng)度為 219 bp 的片段，GC%=64% (TR  基因）; 在產(chǎn)物經(jīng)電泳驗(yàn)證為目的片段的前提下，擴(kuò)增曲線(xiàn)去掉 Rox 校正后，StarLighter SYBR Green qPCR Mix Ct 值更小， 靈敏度更高。

5、高 GC 或高 AT 的片段擴(kuò)增效果好

Fig.5 不同試劑定量高 AT 片段的結(jié)果比較。以人的 DNA 為模板，使用不同廠家試劑，擴(kuò)增長(zhǎng)度為 198 bp 的片段， AT%=64.4% (hPRTl 基因）； 從擴(kuò)增效率上看，StarLighter SYBR Green qPCR Mix，Eff=l00.87％ 為更優(yōu)；供應(yīng)商 TY3， Eff=94.63%；供應(yīng)商 K，Eff=98.33%。

Fig.6 不同試劑定量高 GC 片段的結(jié)果比較。以人的 DNA 為模板，使用不同廠家試劑，擴(kuò)增長(zhǎng)度為 322 bp 的片段， GC%=75.5% (ApoE 基因）；從擴(kuò)增效率上看，StarLighter SYBR Green qPCR Mix，Eff=101.31％ 為更優(yōu)；供應(yīng)商 TY3， Eff=150.10%；供應(yīng)商 A，Eff = NA （更高濃度無(wú)擴(kuò)增）。

6、耐受抑制劑能力強(qiáng)

v> Fig.7 不同試劑定量含抑制劑模板的結(jié)果比較。以 人的 DNA 為模板，使用不同廠家試劑，擴(kuò)增長(zhǎng)度 為 393 bp 的片段，GC%=35.6% (F8-exon 10 基因）； 以天根磁珠法提取試劑盒提取的 DNA  為模板，原始模板濃度為 100 ng/µL，作為 S1，之后依次使用同樣稀釋液按梯度稀釋 10 倍分別得 到 S2、S3、S4。從擴(kuò)增效率看，StarLighter SYBR  Green qPCR Mix，Eff=94.37% 為更優(yōu)；供應(yīng)商 K， Eff=NA（ 更高濃度無(wú)擴(kuò)增）。StarLighter SYBR  Green qPCR Mix 擴(kuò)增效率符合要求，供應(yīng)商 K 的 S1 模板未擴(kuò)增。

7、 試劑穩(wěn)定易保存

4℃ 保存穩(wěn)定性

Fig 8 A

常溫與 37°C 保存穩(wěn)定性

反復(fù)凍融

Fig 8 D

Fig.8 StarLighter SYBR Green qPCR Mix 穩(wěn)定性測(cè)試的結(jié) 果展示。以人的 DNA 為模板，擴(kuò)增長(zhǎng)度為 123 bp 的片段 (UBC 基因），GC%=52%，未見(jiàn)明顯信號(hào)強(qiáng)度降低和 Ct  值延遲。

圖 A ：試劑 4℃ 保存至 39 天；

圖 B ：試劑室溫保存至 8 天；

圖 C ：試劑 37℃保存至 8 天；

圖 D ：試劑反復(fù)凍融至 35 次；