StarLighter Probe qPCR Mix (Universal)
StarLighter 探針?lè)?qPCR 預(yù)混液（通用型）
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
StarLighter Probe qPCR Mix (Universal) 是一款基于探針?lè)蓪?duì)各種來(lái)源的 DNA 樣本進(jìn)行快速定量、實(shí)時(shí)分析的通用試劑盒。試劑盒基于性能優(yōu)異的熱啟動(dòng)基因工程改造 Taq DNA polymerase 以及優(yōu)化的緩沖液，可以有效降低非特異性擴(kuò)增，大大增加 qPCR 擴(kuò)增效率，適用于進(jìn)行高靈敏的 qPCR 檢測(cè)。該試劑盒定量范圍寬，可以對(duì)靶基因進(jìn)行準(zhǔn)確的定量、定性和 SNP 檢測(cè)；本產(chǎn)品具有重復(fù)性好，可信度高，并兼容各種不同類(lèi)型的 qPCR 探針的特點(diǎn)。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1. 擴(kuò)增特異性強(qiáng)，數(shù)據(jù)結(jié)果可靠；
2. 高 GC 模板擴(kuò)增能力強(qiáng)；
3. 擴(kuò)增效率高，Ct 值提前；
4. 信噪比高，低拷貝檢測(cè)靈敏度高。
產(chǎn)品應(yīng)用
1. 基因表達(dá)分析；
2. SNP 和等位基因分型；
3. 測(cè)序和微陣列結(jié)果的驗(yàn)證。
產(chǎn)品性能
1、擴(kuò)增特異性強(qiáng)，數(shù)據(jù)結(jié)果可靠

Fig.1 不 同 試 劑 定 量 結(jié) 果 的 準(zhǔn) 確 性 比 較。 用 StarLighter Probe qPCR Mix (Universal) 和其他供應(yīng)商 試劑，以攜帶 ApoE3 基因亞型（無(wú) ApoE2 基因亞型） 的人類(lèi)基因組為模板進(jìn)行定量（利用 ARMS-qPCR  技術(shù)對(duì) ApoE 兩個(gè)基因亞型 ApoE2、 ApoE3 進(jìn)行分 型）。啟衡星試劑有效擴(kuò)增攜帶 ApoE3 基因亞型（高 GC)， 供應(yīng)商 K 未能擴(kuò)增。 ApoE 基因（擴(kuò)增片段長(zhǎng) 度 197 bp，GC 含量 71%)。

2、高GC模板擴(kuò)增能力強(qiáng)

Tab.1 使用 StarLighter Probe qPCR Mix (Universal) 試劑，利用攜帶 ApoE3 基因亞型的人類(lèi)基因組為模板進(jìn)行定量，與供應(yīng) 商 K 相比，啟衡星探針?lè)?/span> qPCR Mix 可以很好檢出，供應(yīng)商 K 未檢出。

Fig.2 不同試劑定量高 GC 含量片段的結(jié)果比較。以人基因 組為模板，模板濃度分別為 50 ng、5 ng、0.5 ng、0.05 ng， 擴(kuò)增 ApoE3 基因，擴(kuò)增片段長(zhǎng)度 197 bp， GC 含量 71%。 使用 StarLighter Probe qPCR Mix (Universal) 試劑可得到有效 擴(kuò)增，而供應(yīng)商 K 無(wú)擴(kuò)增 (Ct>45)。

3、擴(kuò)增效率高，線型范圍好

StarLighter Probe qPCR Mix (Universal) 與供應(yīng)商 K 對(duì)內(nèi)參基因 Actin 定量比較，Ct 值比供應(yīng)商 K 提前且擴(kuò)增效率好。

Fig.3 不同試劑對(duì)連續(xù)梯度稀釋模板的定量結(jié)果比較。以人基因組為模板，模板濃度分別為 50 ng、5 ng、0.5 ng、0.05  ng，對(duì)內(nèi)參基因 Actin 進(jìn)行定量，擴(kuò)增片段長(zhǎng)度 179 bp，使用 StarLighter Probe qPCR Mix (Universal) 可有效擴(kuò)增 Actin  基因，擴(kuò)增效率和 R2 值均優(yōu)于競(jìng)品。Ct 值比供應(yīng)商 K 提前 約 1-1.5 個(gè) cycle。

4、靈敏度高、 適用于低拷貝檢測(cè)

Fig.4 StarLighter Probe qPCR Mix 定量低拷貝樣品的結(jié)果展示。以人類(lèi)基因組為模板，模板起始濃度為 100 ng，然后依次 5 倍梯度稀釋?zhuān)褂?/span> StarLighter Probe qPCR Mix (Universal) 試劑進(jìn)行 qPCR 定量。當(dāng)模板濃度低至 0.032 ng 時(shí)，內(nèi)參基因 Actin 和目的基因 ApoE3 仍能得到有效擴(kuò)增，且起始模板量的 log 值和其 Ct 值線性關(guān)系良好。

5、穩(wěn)定性高

Fig.5 StarLighter Probe qPCR Mix 穩(wěn)定性測(cè)試的結(jié)果展示。A 試劑反復(fù)凍融至少 30 次；B 試劑 37℃ 放置至 5 天；C 試劑室 溫放置至 28 天；D 試劑 4℃放置至 43 天，以人 DNA 為模板，對(duì) Actin 和 ApoE 基因進(jìn)行定量，未見(jiàn)明顯信號(hào)強(qiáng)度降低和 Ct 值延遲（本實(shí)驗(yàn)在 Thermo Q6 儀器上完成）。