核自身抗原SP140抗體

1.特異性——免疫原

用于產(chǎn)生抗體的免疫原類型顯著影響抗體對靶蛋白的特異性。選擇針對不合適或質(zhì)量差的免疫原產(chǎn)生的抗體將導(dǎo)致不可靠且可能無法重現(xiàn)的結(jié)果。應(yīng)注意選擇針對已充分表征的免疫原產(chǎn)生的抗體。

2.肽

合成肽免疫原很少折疊成天然蛋白質(zhì)的類似三級結(jié)構(gòu)。此外，除非在合成過程中添加到肽中，否則它們不會表現(xiàn)出任何翻譯后修飾。因此，使用肽產(chǎn)生的抗體可用作蛋白質(zhì)印跡的有用試劑，因為由于樣品處理過程中的變性和還原，靶蛋白具有線性化的表位。當(dāng)抗體需要區(qū)分具有高度保守氨基酸序列的兩種蛋白質(zhì)時，肽也可用作免疫原。在這些情況下，產(chǎn)生到差異區(qū)域的肽增加了制造差異抗體的可能性。

3.天然蛋白質(zhì)

如果將純化的蛋白質(zhì)用作免疫原，則針對它們產(chǎn)生的抗體可能無法識別蛋白質(zhì)印跡中變性蛋白質(zhì)的線性表位。一些使用天然蛋白質(zhì)產(chǎn)生的抗體只能識別蛋白質(zhì)表面的天然氧化構(gòu)象表位。對于單克隆抗體尤其如此。

SP140 is an 867 amino acid cytoplasmic and nuclear protein that is highly expressed in spleen and peripheral blood leukocytes. SP140 is a component of the nuclear body that may be involved in trafficking between the nucleus and the cytoplasm.

1、制備抗原。

2、選擇實驗動物。

3、動物免疫。

4、試取血進行測試，看看是否成功免疫。

5、如果成功免疫，殺死實驗動物，采集全部血清。

6、純化出抗體。

7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
一）抗原制備

Ig 是免疫球蛋白，對異種動物而言，是良好的抗原物質(zhì)?？梢源碳ぎ惙N動物產(chǎn)生抗 Ig 血清，

經(jīng)適當(dāng)提取后，產(chǎn)生抗 Ig 抗體，又叫第二抗體或抗抗體。在多數(shù)的間接標(biāo)記反應(yīng)中，均需制備

抗 Ig 抗體。

（二）材料與試劑

1．提取的動物 Ig

2．弗氏佐劑和弗氏不佐劑

3．實驗動物 兔

4．其它材料及試劑

細(xì)胞硫氧還蛋白還原酶2（mito thioredoxin reductase 2）活性比色法定量檢測試劑盒

動物糖解法糖基分解試劑盒

酵母感受態(tài)細(xì)胞凍存試劑盒

載玻片細(xì)胞IGF 蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒

通用型副傷A（Salmonella Paratyphi A）定量PCR擴增檢測試劑盒

直腸腫瘤標(biāo)記K－ras糞便檢測突變熒光分析試劑盒

酵母鎂ATP酶（Mg＋＋ －ATPase）活性比色法定量

動物組織氧化應(yīng)激活性氧（ROS）魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒

石蠟切片總游離菲律賓（FILIPIN）熒光直接染色試劑盒

動物細(xì)胞/組織糖磷酸變位酶（phosphoglucomutase；PGM）電泳分析試劑盒

CDK6蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒

麥芽汁β-葡聚糖含量熒光定量檢測試劑盒

非同位素AP－BCIP/NBT法DNA南方雜交試劑盒

細(xì)胞甘油二脂酰激酶（DAG KINASE）酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒

純化線粒體蛋白質(zhì)濃度定量測定試劑盒

真核翻譯起始因子4E抗體

干擾素α10抗體

熱休克蛋白27家族蛋白3抗體

KIAA2022蛋白抗體

抗體

β淀粉樣肽（1-28）抗體

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