CC96191 JM108 感受態(tài)
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱 上海語(yǔ)純生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) CC96191
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2024/11/4 16:21:22
- 訪問(wèn)次數(shù) 245
產(chǎn)品標(biāo)簽
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
JM108 來(lái)源于 JM106 菌株,最初是作為黏粒文庫(kù)的宿主被改造而成。 JM108 菌株缺失核酸內(nèi)切酶
(endA),提高了質(zhì)粒 DNA的產(chǎn)量和質(zhì)量;重組酶缺陷型 (recA)減少插入片段的同源重組概率,保證
了插入 DNA 的穩(wěn)定性。JM108 菌株最大的特點(diǎn)是擴(kuò)繁質(zhì)粒產(chǎn)量大,純度高,且質(zhì)量穩(wěn)定,特別是
超螺旋質(zhì)粒比例較高,超螺旋質(zhì)粒所占比例一般>90%(gyrA96 突變型說(shuō)明 JM108 菌株的 DNA
gyrase 基因被突變,導(dǎo)致拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ的功能受影響,增加了超螺旋質(zhì)粒的比例),非常適合后續(xù)
的動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)(超螺旋質(zhì)??商岣呒?xì)胞轉(zhuǎn)染的效率)。此外該菌株具有萘啶酮酸抗性。吐
露港生物開(kāi)發(fā)的 JM108 感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,pUC18 質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率 108 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
JM108 感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:FendA1 recA1 gyrA96 thi-1 relA1 glnV44 Δ(lac-proAB) hsdR17 (rK- mK+)
存儲(chǔ)條件
-80 ℃保存;請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無(wú)外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動(dòng),熱激 90s 后,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無(wú)菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過(guò)夜。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保優(yōu)良轉(zhuǎn)化效率,整個(gè)操作過(guò)程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。