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無細胞蛋白表達服務

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北京義翹神州科技股份有限公司是一家從事生物試劑研發(fā)、生產、銷售并提供技術服務的生物科技公司。所有產品都是自主研發(fā)和生產的,主要業(yè)務包括重組蛋白、抗體、基因和培養(yǎng)基等產品,以及重組蛋白、抗體的開發(fā)和生物分析檢測等服務,同時也為制藥公司或生物技術公司提供單克隆抗體候選藥物的臨床前規(guī)模生產服務。義翹神州的產品能夠覆蓋生命科學研究的多個領域,為分子生物學、細胞生物學、免疫學、發(fā)育生物學、干細胞研究等基礎科研方向和創(chuàng)新藥物研發(fā)提供“一站式”生物試劑產品和技術服務。




抗體檢測

無細胞蛋白表達服務

無細胞蛋白合成系統(tǒng)(Cell-Free Protein Synthesis system,CFPS)是以外源DNA或mRNA為模板,通過在細胞抽提物的酶系中添加氨基酸、能量物質等實現蛋白的體外合成。將原本需要幾天完成的表達過程縮短至幾小時,整體過程更加快速、高效。義翹神州自主研發(fā)的無細胞表達系統(tǒng),經過充分驗證,可為您提供優(yōu)質的VHH及scFv快速表達服務,加速您的研發(fā)進程。
無細胞蛋白表達服務

無細胞蛋白合成服務優(yōu)勢

無細胞蛋白表達服務

無細胞表達服務流程

無細胞蛋白表達服務

無細胞合成服務內容

無細胞蛋白表達服務

無細胞蛋白表達服務

無細胞合成系統(tǒng)示意圖

案例展示

高純度VHH表達

無細胞蛋白表達服務

VHH synthesized by CFPS with purity by SDS-PAGE and SEC-HPLC >95%.            

高通量scFv表達

無細胞蛋白表達服務

From gene to purified 50 scFvs, Sino Biological completed synthesis by CFPS in only 5 days.

 

無細胞合成與HEK293細胞表達的VHH體外抗原結合活性一致


anti-IL6R VHH
無細胞蛋白表達服務
anti-IL6R VHHCell-FreeHEK293
EC50(μg/mL)0.0260.034

Measured by its binding ability in a functional ELISA. Immobilized IL6R at 0.5 μg/ml (100 μL/well) can bind anti-IL6R nanobody expressed by CFPS system and HEK293 Cell respectively.

anti-TROP2 VHH
無細胞蛋白表達服務
anti-TROP2 VHHCell-FreeHEK293
EC50(μg/mL)0.1790.164

Measured by its binding ability in a functional ELISA. Immobilized TROP2 at 0.5 μg/ml (100 μL/well) can bind anti-TROP2 nanobody expressed by CFPS system and HEK293 Cell respectively.



無細胞表達系統(tǒng)--新一代蛋白表達技術

無細胞表達系統(tǒng)的基本原理是利用來源于細胞的轉錄翻譯等元件,搭配能量體系和原料體系,共同在體外組成能夠直接從DNA合成蛋白質的反應體系。

無細胞表達系統(tǒng)具備很多基于細胞合成蛋白的優(yōu)勢,如快速省時,不需培養(yǎng)細胞,幾小時就可獲得蛋白。同時在高通量蛋白篩選、快速蛋白合成、非天然氨基酸引入甚至AI自動化合成蛋白等領域具有巨大的潛力和應用價值。


無細胞蛋白合成服務常見問題解答


無細胞合成(CFPS)體系相對于細胞體系有哪些優(yōu)勢?

無細胞表達系統(tǒng)的優(yōu)勢主要體現在:
• 可自動化操作簡便、快捷——成本低(無需培養(yǎng)細胞和細菌相關的場地設施)、表達時間短(3h)、單位表達量高。
• 蛋白表達工程化(Cell-free protein engineering)——無細胞合成系統(tǒng)作為一個開放式的系統(tǒng),可以向體系中自由添加所需的成分以調控蛋白的正確合成。例如可以向系統(tǒng)中加入Fe2+、Mn2+和Cu2+等金屬離子促進含有對應離子蛋白的正確合成;可以有效表達抗菌肽等毒性蛋白并實現規(guī)?;康牡鞍椎纳a。
• 適合原型研究(cell-free prototyping),整體原料均為外加,活性物質之間發(fā)生的化學酶促反應使整個過程相對可控。

真核來源的蛋白是否必須用真核表達系統(tǒng)?

并非如此,真核來源的蛋白除了傳統(tǒng)的哺乳動物表達系統(tǒng),還可以利用無細胞蛋白合成。無細胞系統(tǒng)是一套酶促級聯反應,可以添加很多其他組分甚至是真核來源的提取物來實現真核蛋白的表達。如果某些目標蛋白(比如抗體功能性片段scFv和VHH)的功能不依賴翻譯后修飾,在這種情況下,不管是無細胞系統(tǒng)還是HEK293系統(tǒng),兩者表達的活性無明顯差異。

無細胞合成系統(tǒng)是否適用于高通量,表達量如何?少量蛋白的檢測是否也適用?

無細胞表達系統(tǒng)非常適合高通量表達,其產量高可到 mg/mL 級別,抗體和抗體功能性片段是 100 μg/mL 級別。對于少量蛋白的檢測需要建立相應的檢測方法,如您想進一步了解,我們可以協助進行方法學的設計。

對于原核體系難以表達的真核來源蛋白,無細胞表達體系有什么優(yōu)勢嗎?

因為其開放式系統(tǒng)可以添加很多其他組分甚至是真核來源的提取物來實現真核蛋白的正確合成。例如我們聚焦的VHH、VHH-Fc等都可以實現無細胞系統(tǒng)中上清表達,但是這些蛋白在原核表達中往往以錯誤的形式存在。




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