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BV6010 硫氧還蛋白氧化還原酶試劑盒 谷胱gan肽系列

具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
  • 品牌 NobleRyder/諾博萊德
  • 型號 BV6010
  • 產(chǎn)地
  • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
  • 更新時間 2025/7/18 8:55:00
  • 訪問次數(shù) 92

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北京諾博萊德科技有限公司始創(chuàng)于2012年,總部位于北京海淀區(qū),專注于科研生物領(lǐng)域,是一家研發(fā)、銷售和服務(wù)于一體的企業(yè)。公司秉承“誠信為本,博采眾長”的發(fā)展理念,致力于為科研工作者提供高質(zhì)量的生物產(chǎn)品和服務(wù)。

諾博萊德的產(chǎn)品覆蓋面廣泛,包括以下

生化試劑:抗生素、蛋白質(zhì)、染色劑、培養(yǎng)基、緩沖試劑、對照品、標(biāo)準(zhǔn)品、磁珠;

即用型試劑:常規(guī)試劑溶液、即用型染色液、免疫學(xué)試劑、細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、檢測試劑盒、細(xì)胞分離液人或其他動物細(xì)胞;

通用耗材:移液管/架、吸頭、槍頭、移液器、離心管/盒/架、PCR耗材、濾紙、口罩手套、冷/凍存管/盒、培養(yǎng)板/皿/瓶、蓋/載玻片、刀片、包埋盒/框、封片劑、石蠟、鏡油等產(chǎn)品被國內(nèi)科研工作者廣泛應(yīng)用。

 

生化試劑,即用型試劑,分子生物學(xué),細(xì)胞生物學(xué)

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100T/96S
貨號 BV6010 應(yīng)用領(lǐng)域 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥
主要用途 硫氧還蛋白氧化還原酶試劑盒


硫氧還蛋白氧化還原酶(thioredoxin reductase, TrxR試劑盒說明書

微量法 100T/96S


正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定測定意義:

TrxR 是一種NADPH 依賴的包含FAD 結(jié)構(gòu)域的二聚體硒酶,屬于吡啶核苷酸-二硫化物氧化還原酶家族成員,與硫氧還蛋白以及 NADPH 共同構(gòu)成了硫氧還蛋白系統(tǒng)。TrxR GR 活性類似,催化 GSSG 還原生成GSH,是谷胱gan肽氧化還原循環(huán)關(guān)鍵酶之一。

測定原理:

TrxR 催化NADPH 還原DTNB 生成TNB NADP+,TNB  412 nm 有特征吸收峰,通過測定 412nm波長處TNB 的增加速率,即可計算TrxR 活性。

硫氧還蛋白氧化還原酶試劑盒 谷胱gan肽系列

組成:

產(chǎn)品名稱

BV6010-100T/96S

Storage

試劑一:液體

120ml

4℃

試劑二:液體

2ml

4℃避光

試劑三:粉劑

1

4℃

說明書

一份

 

試劑三:粉劑×1 管,4℃保存。臨用前加入 2ml 蒸餾水溶解。


具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)


自備儀器和用品:

低溫離心機(jī)、可調(diào)節(jié)移液器、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96 孔板、和蒸餾水。

粗酶液提取:

1. 組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(ml) 15~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1ml 試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿。8000g,4℃離心 10min,取上清置冰上待測。

2. 細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104 個):試劑一體積(ml 500~10001 的比例(建議 500 萬細(xì)胞加 1ml 試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒,總時間 3min);然后 8000g, 4℃,離心 10min,取上清置于冰上待測。

3. 血清等液體:直接測定。

TrxR 測定操作:

1. 分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30 min,調(diào)節(jié)波長到 412nm,用蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑一在 25℃(一般物種)或者 37℃(哺乳動物)預(yù)熱 30min。

3. 空白管:取微量玻璃比色皿或 96 孔板,加入 20μl 試劑二,20μl 試劑三,160μl 試劑一,迅速混勻后于412 nm 測定 10 s  310 s 吸光度,記為 A1 A2。A 空白管=A2-A1。

4. 測定管:取微量玻璃比色皿或 96 孔板,加入 20μl 試劑二,20μl 試劑三,140μl 試劑一,20μl 上清液,迅速混勻后于 412 nm 測定 10 s 310 s 吸光度,記為A3 A4。A 測定管=A4-A3。

注意:空白管只需測定一次。

TrxR 活性計算公式:

(1). 按蛋白濃度計算

活性單位定義:在 25℃或者 37℃中,每毫克蛋白每分鐘催化 1nmol DTNB 還原為 1 個酶活單位。

TrxRnmol/min /mg prot=A 測定管-A 空白管)÷ε÷d×V 反總÷(Cpr×V )÷T

= 147×A 測定管-A 空白管÷Cpr

(2). 按樣本質(zhì)量計算

活性單位定義:在 25℃或者 37℃中,每克樣本每分鐘催化 1nmol DTNB 還原為 1 個酶活單位。

TrxRnmol/min /g 鮮重)=A 測定管-A 空白管)÷ε÷d×V 反總÷(W×V ÷V 樣總)÷T

= 147×A 測定管-A 空白管÷W

(3) 按細(xì)胞數(shù)量計算

活性單位定義:在 25℃或者 37℃中,每 104 個細(xì)胞每分鐘催化 1nmol DTNB 還原為 1 個酶活單位。

TrxRnmol/min/104 cell=A 測定管-A 空白管)÷ε÷d×V 反總÷(細(xì)胞數(shù)量×V ÷V 樣總)÷T

= 147×A 測定管-A 空白管)÷ 細(xì)胞數(shù)量

(4) 按液體體積計算

活性單位定義:在 25℃或者 37℃中,每毫升液體每分鐘催化 1nmol DTNB 還原為 1 個酶活單位。

TrxRnmol/min /ml=A 測定管-A 空白管)÷ε÷d×V 反總÷V ÷T

= 147×A 測定管-A 空白管

εTNB 412nm 處的微摩爾消光系數(shù),0.0136 L/μ mol/cm;d:比色皿光徑,1cmV 反總:反應(yīng)體系總體積(L),200μl=2×10-4 LCpr:上清液蛋白質(zhì)濃度(mg/ml),需要另外測定;W :樣品質(zhì)量;V 樣:加入反應(yīng)體系中上清液體積(ml),20μl=0.02 ml;V 樣總:提取液體積,1 mlT:反應(yīng)時間(min),5 min

b.使用 96 孔板測定的計算公式如下

(1). 按蛋白濃度計算

活性單位定義:在 25℃或者 37℃中,每毫克蛋白每分鐘催化 1nmol DTNB 還原為 1 個酶活單位。

TrxRnmol/min /mg prot=A 測定管-A 空白管)÷ε÷d×V 反總÷(Cpr×V )÷T

= 294×A 測定管-A 空白管÷Cpr

(2). 按樣本質(zhì)量計算

活性單位定義:在 25℃或者 37℃中,每克樣本每分鐘催化 1nmol DTNB 還原為 1 個酶活單位。

TrxRnmol/min /g 鮮重)=A 測定管-A 空白管)÷ε÷d×V 反總÷(W×V ÷V 樣總)÷T

= 294×A 測定管-A 空白管÷W

(3) 按細(xì)胞數(shù)量計算

活性單位定義:在 25℃或者 37℃中,每 104 個細(xì)胞每分鐘催化 1nmol DTNB 還原為 1 個酶活單位。

TrxRnmol/min/104 cell=A 測定管-A 空白管)÷ε÷d×V 反總÷(細(xì)胞數(shù)量×V ÷V 樣總)÷T

= 294×A 測定管-A 空白管)÷ 細(xì)胞數(shù)量

(4) 按液體體積計算

活性單位定義:在 25℃或者 37℃中,每毫升液體每分鐘催化 1nmol DTNB 還原為 1 個酶活單位。

TrxRnmol/min /ml=A 測定管-A 空白管)÷ε÷d×V 反總÷V ÷T

= 294×A 測定管-A 空白管

εTNB 412nm 處的微摩爾消光系數(shù),0.0136 L/μ mol/cmd96 孔板光徑,0.5cm;V 反總:反應(yīng)體系總體積(L),200μl=2×10-4 LCpr:上清液蛋白質(zhì)濃度(mg/ml),需要另外測定;W :樣品質(zhì)量;V 樣:加入反應(yīng)體系中上清液體積(ml),20μl=0.02 ml;V 樣總:提取液體積,1 ml;T:反應(yīng)時間min 5 min

注意事項:

1. 測定前須先取 12 個樣做預(yù)實驗,哺乳動物組織及血液制品TrxR 活力測定時,一般須用蒸餾水稀釋5 倍左右;測定過程操作須迅速。

2. 試劑二和試劑三配制好后 3 天內(nèi)使用完。

硫氧還蛋白氧化還原酶試劑盒 谷胱gan肽系列




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