質(zhì)譜如何揭示蛋白質(zhì)的氨基酸順序？檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹

引言：dànbáizhì結(jié)構(gòu)解析的核心路徑

dànbáizhì的功能由其結(jié)構(gòu)決定，而結(jié)構(gòu)的dìyī層級(jí)便是其氨基酸的線性排列順序，即一級(jí)結(jié)構(gòu)。質(zhì)譜技術(shù)，尤其是液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS），已成為解析dànbáizhì的核心手段。與傳統(tǒng)Edman降解不同，質(zhì)譜具備高通量、自動(dòng)化和可檢測(cè)翻譯后修飾等優(yōu)勢(shì)，廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)研究和生物制藥質(zhì)量控制中。

一、質(zhì)譜測(cè)序的基本原理：從肽段到序列

質(zhì)譜并不是直接“讀出”dànbáizhì序列，而是通過(guò)分析多肽碎片的質(zhì)量-電荷比（m/z）和碎裂模式，推斷氨基酸組成。核心原理包括：

1、蛋白酶解：使用yídànbáiméi等特異性酶將蛋白切割為規(guī)則的多肽段。

2、色譜分離（LC）：在質(zhì)譜進(jìn)樣前對(duì)多肽進(jìn)行高效液相色譜分離，減少?gòu)?fù)雜性。

3、一級(jí)質(zhì)譜（MS1）：測(cè)定多肽段的完整分子量，獲得母離子峰信息。

4、二級(jí)質(zhì)譜（MS2）：對(duì)母離子進(jìn)行碰撞誘導(dǎo)解離（CID/HCD等），形成一系列具有特定碎裂規(guī)律的子離子（如b、y離子）。

5、序列重建：通過(guò)比對(duì)碎片質(zhì)量差，確定相鄰氨基酸差值，從而逐步拼接出肽段序列。

二、dànbáizhì質(zhì)譜測(cè)序流程概覽

步驟1：樣本準(zhǔn)備

提取dànbáizhì樣本，并進(jìn)行還原、烷基化處理，使結(jié)構(gòu)展開(kāi)、巰基封閉。

步驟2：酶解成肽

使用yídànbáiméi將蛋白切割為特定規(guī)則肽段（如在K、R殘基后切割）。

步驟3：液相分離（LC）

將多肽混合物進(jìn)行高效液相色譜分離，增強(qiáng)分辨率和信號(hào)質(zhì)量。

步驟4：質(zhì)譜檢測(cè)（MS1+MS2）

肽段進(jìn)入質(zhì)譜儀后，優(yōu)良行母離子掃描（MS1），隨后選擇高豐度母離子進(jìn)入碰撞池，生成碎裂離子并記錄MS2譜圖。

步驟5：數(shù)據(jù)分析與序列識(shí)別

利用MaxQuant、PEAKS、Byonic等生信軟件比對(duì)譜圖與蛋白數(shù)據(jù)庫(kù)，實(shí)現(xiàn)肽段鑒定和氨基酸序列解析。

三、質(zhì)譜解析氨基酸序列的關(guān)鍵優(yōu)勢(shì)

四、百泰派克生物科技dànbáizhì測(cè)序服務(wù)

作為zhuānyè蛋白組學(xué)技術(shù)服務(wù)提供商，百泰派克生物科技構(gòu)建了完整的dànbáizhì一級(jí)結(jié)構(gòu)測(cè)序平臺(tái)：

• 使用高分辨質(zhì)譜設(shè)備（如Orbitrap Exploris、Fusion Lumos）確保測(cè)序精度

• 標(biāo)準(zhǔn)化的前處理流程，包括自動(dòng)化酶解、純化與樣本富集

• 多重定量策略支持（TMT、Label-Free、SILAC）與修飾檢測(cè)模塊

• 提供結(jié)構(gòu)序列還原、突變檢測(cè)與修飾定位的完整報(bào)告

• 可與化學(xué)蛋白組學(xué)、代謝組等平臺(tái)聯(lián)動(dòng)，推進(jìn)功能研究

質(zhì)譜技術(shù)通過(guò)“解讀”多肽碎裂模式，為dànbáizhì一級(jí)結(jié)構(gòu)解析提供了強(qiáng)大而高效的工具。它不僅能揭示氨基酸順序，還能識(shí)別翻譯后修飾、變異位點(diǎn)與剪接差異，為生命科學(xué)與生物醫(yī)藥研究提供重要數(shù)據(jù)支持。如您正在進(jìn)行蛋白結(jié)構(gòu)研究、靶點(diǎn)驗(yàn)證或藥物開(kāi)發(fā)，歡迎選擇百泰派克生物科技，我們將為您提供高質(zhì)量、高通量的dànbáizhì測(cè)序整體解決方案。

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一、蛋白測(cè)序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測(cè)序系統(tǒng)對(duì)dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測(cè)序分析服務(wù)，包括對(duì)dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對(duì)于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測(cè)序法的dànbáizhì從頭測(cè)序服務(wù)，對(duì)蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測(cè)定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測(cè)定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測(cè);

6.測(cè)序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學(xué)、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1 .高通量定量蛋白分析:多對(duì)照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測(cè)較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.技術(shù)優(yōu)良，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問(wèn)題?？稍趩渭?xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測(cè)51個(gè)目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測(cè)細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別。通過(guò)我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測(cè)平臺(tái)

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測(cè)和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過(guò)CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查，軟件審計(jì)追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊(cè)和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測(cè)分析服務(wù)；

2.獲國(guó)家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測(cè)平臺(tái)，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

質(zhì)譜如何揭示蛋白質(zhì)的氨基酸順序？檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹