試劑名稱：LysoSensor Green DND-189溶酶體綠色熒光探針；溶酶體綠色熒光探針LysoSensor DND-189

儲存：-20℃干燥避光保存至少1年，冰袋運輸。

產(chǎn)地：西安強化生物

分子式：C24H22N4O2

分子量：398.46

一、描述與基本特性：

溶酶體綠色熒光探針LysoSensor DND-189用于測量活細胞中酸性細胞器（如溶酶體）pH值。

該探針在酸性環(huán)境中熒光增強，其 pKa 值約為 5.2 。

它適用于多種細胞類型，包括貼壁細胞和懸浮細胞 。

該探針的激發(fā)波長為 443 nm，發(fā)射波長為 505 nm，通常在熒光顯微鏡下觀察 。

此外，LysoSensor Green DND-189 也可用于流式細胞術(shù)和熒光光度計分析 。

注意事項：溶解性是在室溫下測定的，如果溫度過低，可能會影響其溶解性。

二、實驗操作流程

【試劑準備】

工作液配制：1 mM原液用培養(yǎng)基或緩沖液稀釋至≥1 μM（建議起始濃度），現(xiàn)配現(xiàn)用。

優(yōu)化建議：根據(jù)細胞膜通透性調(diào)整濃度，避免假陽性。

【染色步驟】

細胞類型：貼壁細胞

操作流程：

1. 細胞爬片至80%密度；

2. 37℃預熱工作液替換培養(yǎng)基，孵育30 min–2 h；

3. 新鮮培養(yǎng)基洗滌，熒光顯微鏡觀察。

細胞類型：懸浮細胞

操作流程：

1. 離心去上清，預暖工作液重懸；

2. 37℃孵育30 min–2 h；

3. 離心洗滌，重懸后檢測。

【儀器要求】

核心設備：熒光顯微鏡（濾光片：Ex 430–460 nm, Em 500–540 nm）。

擴展應用：流式細胞儀（需驗證熒光衰減）、熒光酶標儀（動力學分析）。

三、與其他溶酶體探針對比

探針名稱：LysoSensor Green DND-189

Ex/Em (nm)：443/505

pKa： 5.2

特點：酸性增強，高靈敏度

適用場景：pH動態(tài)監(jiān)測

探針名稱：LysoTracker Green DND-26

Ex/Em (nm)：504/511

pKa：-

特點：非pH依賴性，長效標記

適用場景：溶酶體定位

探針名稱：LysoSensor Yellow/Blue

Ex/Em (nm)：384/540

pKa：4.2

特點：雙發(fā)射，寬pH響應

適用場景：定量pH校準

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用于科研相關領域，不能用于人體實驗！

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