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KI小鼠模型

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KI小鼠模型

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   上海達(dá)為科生物科技有限公司,位于上海長江軟件園,公司目前具備較好的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺(tái),能夠?yàn)閺V大客戶提供醫(yī)學(xué)科研樣本檢測(cè)、合作研究、開發(fā)及生產(chǎn)服務(wù)。

公司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室、先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)設(shè)備和經(jīng)驗(yàn)豐富的科研技術(shù)人員。技術(shù)團(tuán)隊(duì)包括研究員(博士后)2人,助理研究員(博士)4人,核心研究員(碩士)15人,主要致力于基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)、生物化學(xué)、病理檢測(cè)、基因檢測(cè)等技術(shù)在科研中的應(yīng)用與推廣。通過高度細(xì)分、較好的服務(wù)平臺(tái),為廣大客戶提供了完善的技術(shù)解決方案和服務(wù)。目前,,涉及臨床醫(yī)學(xué)、腫瘤生物學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)等生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)等諸多領(lǐng)域。

我們的目標(biāo)是為了使您的工作更輕松、更快捷。為了實(shí)現(xiàn)一站式服務(wù)我們不斷更新實(shí)驗(yàn)方法和引進(jìn)新的產(chǎn)品,控制和降低各種成本,為您的研究加油。這既是一項(xiàng)長期而艱巨的工作,又是一項(xiàng)光榮的工作,同時(shí)也是我們企業(yè)發(fā)展的動(dòng)力源泉。

 

 

 

 

制作動(dòng)物模型 細(xì)胞培養(yǎng) 分子生物學(xué)檢測(cè) 病理學(xué)形態(tài)檢測(cè) 蛋白質(zhì)技術(shù) 免疫學(xué)檢測(cè) 提供培訓(xùn)服務(wù)各種檢驗(yàn)儀器設(shè)備、玻璃儀器及器具、一次性耗材等

1. KI小鼠模型的定義與技術(shù)原理

KI(Knock-in) 指通過基因編輯技術(shù)將特定外源序列(如點(diǎn)突變、報(bào)告基因、人類基因片段)精準(zhǔn)插入小鼠基因組特定位點(diǎn),實(shí)現(xiàn)對(duì)內(nèi)源基因的定向修飾。

  • 技術(shù)基礎(chǔ)

    • 同源重組(ES細(xì)胞打靶) :傳統(tǒng)方法,利用胚胎干細(xì)胞進(jìn)行基因靶向,穩(wěn)定性高但周期長(約6-8個(gè)月)。

    • CRISPR/Cas9:現(xiàn)代主流技術(shù),直接對(duì)受精卵編輯,效率高、周期短(可縮至4個(gè)月),支持大片段插入(最大300kb)。

       
  • 核心目的

    • 模擬人類疾病突變(如亨廷頓病CAG重復(fù)擴(kuò)展)

    • 插入報(bào)告基因(如EGFP、tdTomato)實(shí)現(xiàn)細(xì)胞示蹤

       
    • 構(gòu)建人源化模型(替換小鼠基因?yàn)槿祟愅葱蛄校?br style="box-sizing: border-box; margin: 0px; padding: 0px; max-width: 100%;"/>

       

2. KI小鼠模型的分類與典型品系

(1)疾病模擬型

疾病領(lǐng)域代表品系基因修飾表型特征
亨廷頓病HdhQ150 (UAB系列)人源化Htt外顯子1插入150 CAG重復(fù)進(jìn)行性運(yùn)動(dòng)障礙、神經(jīng)元包涵體
多系統(tǒng)wei縮未命名(結(jié)腸病理模型)未公開突變結(jié)腸壁變薄、糖原積累減少
神經(jīng)肌肉疾病Gle1 KI9核苷酸插入模擬剪接突變運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元功能障礙

 

(2)工具型

  • 報(bào)告基因模型

    • Cubn-sGFP-P2A-nLacZ(熒光示蹤)

    • Tubb3-2A-EGFP(神經(jīng)元標(biāo)記)

    • B-CAG-tdTomato cKI(Cre依賴型紅色熒光)

  • 條件性基因操作工具

    • Trpv1-Myc-IRES-Cre(疼痛神經(jīng)元特異調(diào)控)

    • Trdc-IRES-CreERT2(誘導(dǎo)型T細(xì)胞編輯)

(3)人源化免疫模型

  • 免疫缺陷宿主:NOD/LtSz-scid小鼠(缺乏T/B細(xì)胞,NK活性低)作為基礎(chǔ),支持人免疫細(xì)胞移植。

  • 人免疫系統(tǒng)重建
    聯(lián)合移植人胎胸腺/肝臟組織與CD34?干細(xì)胞,形成功能性人T/B細(xì)胞。


3. 核心應(yīng)用領(lǐng)域

(1)疾病機(jī)制解析

  • 神經(jīng)退行性疾病:亨廷頓病KI模型揭示CAG重復(fù)長度與病理嚴(yán)重度正相關(guān)。

  • 腫瘤研究:人源化PD-1-EGFP KI模型(B-PD-1-EGFP)用于腫瘤免疫微環(huán)境示蹤。

  • 代謝與器官病變:結(jié)腸特異性KI模型成功模擬人類組織wei縮和糖代謝異常。

(2)藥物研發(fā)平臺(tái)

  • 藥效評(píng)價(jià):人源化抗體生產(chǎn)模型(如全人源抗體KI小鼠)。

  • 藥代動(dòng)力學(xué):藥物代謝酶人源化模型(如CYP450家族替換)。

(3)前沿技術(shù)整合

  • 活體示蹤:EGFP/tdTomato報(bào)告基因?qū)崿F(xiàn)腫瘤轉(zhuǎn)移實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)。

  • 光遺傳調(diào)控:Cre依賴型KI小鼠結(jié)合光遺傳學(xué)精準(zhǔn)操控神經(jīng)回路。


4. 技術(shù)優(yōu)勢(shì)與局限性

優(yōu)勢(shì)

  • 精準(zhǔn)性:靶向位點(diǎn)整合避免轉(zhuǎn)基因隨機(jī)插入的不可控性。

  • 生理相關(guān)性:人源化模型保留內(nèi)源調(diào)控機(jī)制(如啟動(dòng)子控制)。

  • 多功能拓展:支持條件性誘導(dǎo)(CreERT2)、雙報(bào)告基因標(biāo)記等復(fù)合設(shè)計(jì)。

局限性

  • 技術(shù)復(fù)雜度:大片段插入(>20kb)需多輪靶向,失敗率高。

  • 物種差異殘留:人源化模型仍受小鼠微環(huán)境影響(如細(xì)胞因子不匹配)。

  • 成本與周期:CRISPR加速流程但定制模型仍需4-12個(gè)月。




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