SILAC質(zhì)譜檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹

SILAC質(zhì)譜技術(shù)是一種基于質(zhì)譜的高通量定量分析方法，通過(guò)使用穩(wěn)定同位素標(biāo)記氨基酸，能夠jīngquè地對(duì)比不同樣品中dànbáizhì的表達(dá)差異。隨著質(zhì)譜技術(shù)的發(fā)展，SILAC質(zhì)譜已成為蛋白zhìzǔxué研究中的一種核心技術(shù)，廣泛應(yīng)用于癌癥研究、藥物篩選、細(xì)胞信號(hào)通路分析、疾病機(jī)制研究等多個(gè)領(lǐng)域。通過(guò)該技術(shù)，研究人員不僅能夠定量分析不同樣品中dànbáizhì的豐度變化，還能夠了解在不同生物條件下細(xì)胞內(nèi)dànbáizhì的動(dòng)態(tài)變化和相互作用，揭示生命活動(dòng)背后的分子機(jī)制。這項(xiàng)技術(shù)的核心思想是通過(guò)在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，使用含有穩(wěn)定同位素的氨基酸（如氮-15或碳-13標(biāo)記的氨基酸）替代普通氨基酸，使得細(xì)胞中合成的dànbáizhì在質(zhì)譜分析中具有不同的質(zhì)量。這些標(biāo)記的氨基酸不會(huì)影響dànbáizhì的功能和結(jié)構(gòu)，因此能夠無(wú)偏地反映生物體內(nèi)的真實(shí)情況；隨后，采用質(zhì)譜儀對(duì)標(biāo)記的dànbáizhì進(jìn)行分析，基于同位素的質(zhì)量差異進(jìn)行jīngquè定量，進(jìn)而對(duì)不同樣品中dànbáizhì的表達(dá)差異進(jìn)行比較。SILAC質(zhì)譜憑借其高靈敏度、高準(zhǔn)確性以及無(wú)標(biāo)記物干擾等優(yōu)勢(shì)已經(jīng)成為dànbáizhì定量分析中的重要工具，通過(guò)jīngzhǔn的定量分析，SILAC技術(shù)幫助科研人員揭示dànbáizhì的動(dòng)態(tài)變化，深入理解生物機(jī)制。

一、SILAC質(zhì)譜技術(shù)的原理

SILAC質(zhì)譜技術(shù)的基本原理是通過(guò)在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，分別使用不同的穩(wěn)定同位素標(biāo)記氨基酸進(jìn)行標(biāo)記，常見(jiàn)的標(biāo)記氨基酸包括賴(lài)氨酸（Lys）和jīngānsuān（Arg）。在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中，研究人員會(huì)將目標(biāo)細(xì)胞分別培養(yǎng)在含有標(biāo)記氨基酸和普通氨基酸的培養(yǎng)基中，這樣在細(xì)胞合成dànbáizhì時(shí)，含有標(biāo)記氨基酸的dànbáizhì會(huì)與未標(biāo)記的dànbáizhì在質(zhì)量上有所區(qū)別。這些含有穩(wěn)定同位素標(biāo)記的dànbáizhì和未標(biāo)記的dànbáizhì在質(zhì)譜分析時(shí)表現(xiàn)出不同的質(zhì)荷比（m/z），使得它們能夠在同一實(shí)驗(yàn)中被同時(shí)檢測(cè)和定量。

在SILAC實(shí)驗(yàn)中，通常會(huì)使用兩種或三種不同的標(biāo)記組分進(jìn)行實(shí)驗(yàn)對(duì)比。例如，在一種實(shí)驗(yàn)中，細(xì)胞被培養(yǎng)在普通培養(yǎng)基中，合成的dànbáizhì未經(jīng)過(guò)標(biāo)記；在另一個(gè)實(shí)驗(yàn)中，細(xì)胞則被培養(yǎng)在含有標(biāo)記氨基酸的培養(yǎng)基中，合成的dànbáizhì帶有穩(wěn)定同位素標(biāo)簽。通過(guò)質(zhì)譜分析，不同樣品中相同的肽段會(huì)因?yàn)闃?biāo)記氨基酸的存在而在質(zhì)譜圖上形成具有不同質(zhì)荷比的兩個(gè)峰，研究人員通過(guò)對(duì)比這兩個(gè)峰的強(qiáng)度來(lái)定量不同樣品中該dànbáizhì的表達(dá)差異。

二、SILAC質(zhì)譜的關(guān)鍵步驟

SILAC質(zhì)譜技術(shù)通常包括以下幾個(gè)關(guān)鍵步驟：

1、細(xì)胞培養(yǎng)與標(biāo)記

首先，將目標(biāo)細(xì)胞分別培養(yǎng)在含有穩(wěn)定同位素標(biāo)記氨基酸和普通氨基酸的培養(yǎng)基中，常見(jiàn)的標(biāo)記氨基酸有氮-15（15N）標(biāo)記的賴(lài)氨酸和jīngānsuān，或碳-13（13C）標(biāo)記的氨基酸。這些氨基酸將被細(xì)胞用來(lái)合成dànbáizhì，確保所有新合成的dànbáizhì都包含標(biāo)記的氨基酸。

2、dànbáizhì提取與消化

在細(xì)胞培養(yǎng)后，收集并提取細(xì)胞中的總dànbáizhì。dànbáizhì提取后，通常通過(guò)yídànbáiméi或其他酶類(lèi)對(duì)dànbáizhì進(jìn)行酶解，切割成肽段。由于不同肽段的分子量不同，它們?cè)谫|(zhì)譜分析中會(huì)表現(xiàn)出不同的質(zhì)荷比，因此能夠根據(jù)這些信息定量每種肽段的豐度。

3、肽段分離

使用高效液相色譜（HPLC）或其他分離技術(shù)對(duì)酶解后的肽段進(jìn)行分離，這一過(guò)程可以有效減少樣品中的復(fù)雜性并為后續(xù)的質(zhì)譜分析提供更高的解析度。

4、質(zhì)譜分析

通過(guò)質(zhì)譜儀（如LC-MS/MS）對(duì)分離得到的肽段進(jìn)行分析。質(zhì)譜儀可以準(zhǔn)確測(cè)量不同肽段的質(zhì)荷比（m/z）并通過(guò)串聯(lián)質(zhì)譜（MS/MS）進(jìn)一步分析肽段的氨基酸序列。通過(guò)比較不同樣品中肽段的信號(hào)強(qiáng)度，研究人員可以定量分析不同樣本中dànbáizhì的表達(dá)差異。

5、數(shù)據(jù)分析與定量

質(zhì)譜數(shù)據(jù)通常需要使用專(zhuān)門(mén)的軟件（如MaxQuant、Mascot等）進(jìn)行分析，比較標(biāo)記組和對(duì)照組中相同dànbáizhì肽段的信號(hào)強(qiáng)度，進(jìn)而推算出dànbáizhì在不同樣品中的相對(duì)豐度。數(shù)據(jù)分析不僅可以幫助識(shí)別差異蛋白，還可以揭示dànbáizhì在不同生物條件下的動(dòng)態(tài)變化。

三、SILAC質(zhì)譜的優(yōu)勢(shì)

1、高準(zhǔn)確性和高靈敏度

SILAC質(zhì)譜技術(shù)可以高精度地定量dànbáizhì的表達(dá)差異，即使是在復(fù)雜的生物樣品中也能夠準(zhǔn)確區(qū)分不同樣品中dànbáizhì的豐度變化。

2、無(wú)需外源性標(biāo)記物

與傳統(tǒng)的dànbáizhì定量方法不同，SILAC技術(shù)使用的穩(wěn)定同位素標(biāo)記氨基酸是天然的氨基酸衍生物，因此不會(huì)對(duì)細(xì)胞的生物學(xué)功能造成干擾，這使得SILAC技術(shù)在活細(xì)胞環(huán)境中非常適用。

3、高通量分析

通過(guò)SILAC質(zhì)譜，研究人員可以在一個(gè)實(shí)驗(yàn)中同時(shí)分析多個(gè)樣品，進(jìn)行高通量的dànbáizhì定量。它能夠同時(shí)識(shí)別和定量數(shù)千個(gè)dànbáizhì，極大地提高了實(shí)驗(yàn)效率。

4、動(dòng)態(tài)分析

SILAC技術(shù)能夠用于研究dànbáizhì在不同生物學(xué)狀態(tài)下的動(dòng)態(tài)變化，如細(xì)胞周期、藥物處理、疾病狀態(tài)等；這使得SILAC技術(shù)不僅適用于靜態(tài)的dànbáizhì定量，也適合于動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)dànbáizhì的調(diào)控。

四、SILAC質(zhì)譜的應(yīng)用

1、癌癥研究

在癌癥研究中，SILAC質(zhì)譜可以幫助研究人員比較癌細(xì)胞與正常細(xì)胞之間dànbáizhì表達(dá)的差異，識(shí)別可能的癌癥標(biāo)志物或治療靶點(diǎn)。通過(guò)對(duì)腫瘤微環(huán)境中dànbáizhì變化的分析，SILAC技術(shù)有助于揭示癌癥的發(fā)生機(jī)制及其發(fā)展的分子路徑。

2、藥物篩選與靶點(diǎn)發(fā)現(xiàn)

SILAC技術(shù)在藥物篩選中發(fā)揮著重要作用。通過(guò)比較藥物處理前后細(xì)胞中dànbáizhì的表達(dá)變化，研究人員可以識(shí)別藥物的作用靶點(diǎn)并了解其作用機(jī)制；此外它還能用于藥物效果的定量評(píng)估，推動(dòng)新藥開(kāi)發(fā)。

3、細(xì)胞信號(hào)通路分析

SILAC技術(shù)能夠定量分析細(xì)胞內(nèi)dànbáizhì的動(dòng)態(tài)變化，揭示細(xì)胞信號(hào)通路的激活狀態(tài)。在研究細(xì)胞如何響應(yīng)外部信號(hào)（如生長(zhǎng)因子、激素等）的過(guò)程中，SILAC技術(shù)提供了寶貴的定量數(shù)據(jù)，幫助科學(xué)家深入理解細(xì)胞內(nèi)的調(diào)控機(jī)制。

4、疾病機(jī)制研究

SILAC質(zhì)譜可用于比較健康組織和病變組織中dànbáizhì的表達(dá)差異，幫助識(shí)別與特定疾病相關(guān)的差異dànbáizhì；例如在神經(jīng)退行性疾病、免疫疾病等研究中，它有助于發(fā)現(xiàn)潛在的疾病生物標(biāo)志物，為早期診斷和治療提供依據(jù)。

百泰派克生物科技采用guójìxiānjìn的SILAC質(zhì)譜分析技術(shù)，結(jié)合豐富的項(xiàng)目經(jīng)驗(yàn)和jīngzhàn的技術(shù)支持，為您的研究提供從實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、數(shù)據(jù)分析到結(jié)果解讀的quánfāngwèi服務(wù)。我們的服務(wù)不僅具備高靈敏度和高準(zhǔn)確性，還能有效應(yīng)對(duì)復(fù)雜的樣品分析需求，確保為您的研究提供可靠、全面的支持。

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一、蛋白測(cè)序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測(cè)序系統(tǒng)對(duì)dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測(cè)序分析服務(wù)，包括對(duì)dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對(duì)于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測(cè)序法的dànbáizhì從頭測(cè)序服務(wù)，對(duì)蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測(cè)定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測(cè)定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測(cè);

6.測(cè)序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、蛋白zhìzǔxué

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC，提供定量蛋白zhìzǔxué、bǎxiàngdàn白zhìzǔxué、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種蛋白zhìzǔxué分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白zhìzǔxué服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1 .高通量定量蛋白分析:多對(duì)照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測(cè)較低豐度蛋白，線(xiàn)性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.技術(shù)優(yōu)良，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問(wèn)題?？稍趩渭?xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測(cè)51個(gè)目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測(cè)細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專(zhuān)有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別。通過(guò)我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測(cè)平臺(tái)

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測(cè)和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過(guò)CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查，軟件審計(jì)追蹤，為客戶(hù)提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊(cè)和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測(cè)分析服務(wù)；

2.獲國(guó)家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，為客戶(hù)提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋蛋白zhìzǔxué、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測(cè)平臺(tái)，滿(mǎn)足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶(hù)的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

SILAC質(zhì)譜檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹