蛋白純度分析技術(shù)優(yōu)缺點(diǎn)對(duì)比檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹

蛋白純度是生物制藥、dànbáizhì組學(xué)及基礎(chǔ)生命科學(xué)研究中的核心質(zhì)量指標(biāo)。伴隨生物制品開(kāi)發(fā)與蛋白藥物上市的加速推進(jìn)，蛋白純度分析技術(shù)也不斷演進(jìn)。目前，常用的分析技術(shù)包括SDS-PAGE、液相色譜（RP-HPLC與SEC）、毛細(xì)管電泳（CE）、質(zhì)譜（MS）和紫外-可見(jiàn)光光譜（UV-Vis）。

一、SDS-PAGE

SDS-PAGE是經(jīng)典的電泳方法，利用蛋白在聚丙烯酰胺凝膠中根據(jù)分子質(zhì)量遷移的特性實(shí)現(xiàn)分離，廣泛應(yīng)用于蛋白純度的初步評(píng)估。

1、優(yōu)點(diǎn)

SDS-PAGE具有操作簡(jiǎn)便、成本低廉、檢測(cè)結(jié)果直觀的優(yōu)勢(shì)。其染色靈敏度高，能夠檢測(cè)到納克級(jí)別的蛋白，即使在樣品量有限的條件下也能獲得可靠結(jié)果。由于其結(jié)果直觀，科研人員能夠快速初步判斷蛋白樣品是否含有雜質(zhì)。此外，SDS-PAGE的普及度高，實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)設(shè)備即可勝任，適合大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室初步篩查使用。

2、缺點(diǎn)

SDS-PAGE也存在局限。其分辨率有限，難以分離分子量相近的蛋白，特別是對(duì)復(fù)雜樣品中的微小雜質(zhì)識(shí)別能力不足。此外，染色和脫色步驟復(fù)雜，易引入人為誤差，導(dǎo)致半定量結(jié)果偏差。該方法對(duì)不同樣品的適應(yīng)性不強(qiáng)，對(duì)于需要高靈敏度和高分辨率檢測(cè)的研究或生產(chǎn)過(guò)程，其能力明顯不足。

二、液相色譜（RP-HPLC與SEC）

液相色譜技術(shù)（包括反相高效液相色譜和尺寸排阻色譜）在蛋白純度分析中已成為主流方法之一。RP-HPLC利用疏水作用力分離蛋白，SEC則基于分子大小進(jìn)行分離。

1、優(yōu)點(diǎn)

液相色譜具有高分辨率和良好的定量能力，適合復(fù)雜樣品的分析。RP-HPLC尤其適合疏水性蛋白和多肽，檢測(cè)靈敏度高，可實(shí)現(xiàn)微克級(jí)別蛋白的分離檢測(cè)。SEC則能評(píng)估蛋白聚集和單體狀態(tài)，是質(zhì)量控制中的重要手段。此外，液相色譜儀器自動(dòng)化程度高，支持高通量分析，可顯著提升實(shí)驗(yàn)效率和結(jié)果重現(xiàn)性。該方法還能夠與多種檢測(cè)器聯(lián)用（如質(zhì)譜），為后續(xù)深入分析奠定基礎(chǔ)。

2、缺點(diǎn)

液相色譜設(shè)備昂貴，維護(hù)和操作復(fù)雜，且樣品前處理要求嚴(yán)格。RP-HPLC采用高有機(jī)溶劑可能導(dǎo)致蛋白結(jié)構(gòu)破壞，從而影響功能和純度評(píng)估；SEC分辨率相對(duì)較低，對(duì)于分子量接近的蛋白分離效果不理想。此外，該技術(shù)對(duì)操作人員的技能要求較高，需要合理設(shè)計(jì)梯度和流速，優(yōu)化分離條件，以獲得理想結(jié)果。

三、毛細(xì)管電泳（CE）

毛細(xì)管電泳以其高分辨率和自動(dòng)化程度著稱，近年來(lái)在蛋白純度分析中的應(yīng)用逐漸增多，特別是在生物制藥領(lǐng)域。

1、優(yōu)點(diǎn)

CE具有jígāo分辨率，能夠區(qū)分電荷、大小或構(gòu)象不同的蛋白，適合復(fù)雜混合物的分離分析。其樣品消耗量極低，適合痕量樣品分析，且分析速度快，有利于提高實(shí)驗(yàn)室工作效率。自動(dòng)化平臺(tái)可以減少人為誤差，提高數(shù)據(jù)一致性與可重復(fù)性。此外，該技術(shù)對(duì)檢測(cè)限要求高、檢測(cè)范圍寬，特別適合需要高靈敏度與精密度的蛋白純度檢測(cè)。

2、缺點(diǎn)

CE技術(shù)對(duì)樣品緩沖體系和條件的敏感性較高，實(shí)驗(yàn)前需進(jìn)行嚴(yán)格優(yōu)化以確保分離效果。部分蛋白可能因構(gòu)象或電荷特性差異導(dǎo)致分離困難。盡管自動(dòng)化程度高，但設(shè)備價(jià)格較高，對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境和操作人員培訓(xùn)有較高要求。此外，CE方法在大規(guī)模樣品處理上的通量和適應(yīng)性相較液相色譜有限。

四、質(zhì)譜（MS）

質(zhì)譜技術(shù)是生命科學(xué)研究中dànbáizhì定性和定量分析的核心工具之一，尤其在復(fù)雜樣品的蛋白純度與結(jié)構(gòu)表征中展現(xiàn)出dútè優(yōu)勢(shì)。

1、優(yōu)點(diǎn)

質(zhì)譜具有jígāo的靈敏度和分辨率，能夠檢測(cè)到極低豐度的蛋白雜質(zhì)，并提供詳細(xì)的分子質(zhì)量、翻譯后修飾和異構(gòu)體信息。通過(guò)與液相色譜聯(lián)用（LC-MS），可在復(fù)雜樣品中實(shí)現(xiàn)高效分離與高精度定量，適合對(duì)目標(biāo)蛋白進(jìn)行深入解析。此外，質(zhì)譜能夠揭示蛋白結(jié)構(gòu)信息，如肽段序列、糖基化位點(diǎn)和氧化修飾等，為蛋白藥物開(kāi)發(fā)和質(zhì)量控制提供強(qiáng)大支持。

2、缺點(diǎn)

質(zhì)譜分析對(duì)樣品前處理和儀器維護(hù)要求jígāo，且數(shù)據(jù)分析需依賴復(fù)雜的軟件和經(jīng)驗(yàn)豐富的分析師。設(shè)備投資成本高，維護(hù)費(fèi)用和運(yùn)行成本亦不容小覷。質(zhì)譜分析通常需要與液相色譜等技術(shù)結(jié)合，增加了整體流程的復(fù)雜度和耗時(shí)。此外，不適合作為快速篩查手段，僅適用于對(duì)dànbáizhì純度和結(jié)構(gòu)有深入需求的應(yīng)用場(chǎng)景。

五、紫外-可見(jiàn)光光譜（UV-Vis）

UV-Vis技術(shù)因其簡(jiǎn)單、快捷，常被用于蛋白定量及粗略純度評(píng)估，在實(shí)驗(yàn)室日常檢測(cè)中依然占據(jù)一席之地。

1、優(yōu)點(diǎn)

該方法快速、經(jīng)濟(jì)，無(wú)需復(fù)雜樣品制備，可直接測(cè)量蛋白在280nm處的吸光值，估算蛋白濃度和初步純度。設(shè)備普及度高，適用于大量樣品的初篩。對(duì)科研人員而言，UV-Vis幾乎無(wú)需zhuānyè培訓(xùn)，即可完成蛋白初步檢測(cè)，便于后續(xù)實(shí)驗(yàn)安排。

2、缺點(diǎn)

UV-Vis對(duì)目標(biāo)蛋白和雜質(zhì)的區(qū)分能力差，檢測(cè)結(jié)果往往為間接推測(cè)。若樣品中含有核酸或其他共吸光物質(zhì)，結(jié)果會(huì)出現(xiàn)顯著偏差。此外，該技術(shù)靈敏度和特異性均較低，無(wú)法滿足對(duì)高純度要求的實(shí)驗(yàn)與質(zhì)量控制，尤其在復(fù)雜混合樣品中，其局限性尤為突出。

蛋白純度分析技術(shù)多樣，各有側(cè)重。實(shí)際應(yīng)用中需結(jié)合樣品類型、研究目標(biāo)、分析需求與預(yù)算綜合選擇。SDS-PAGE適合初步篩查，液相色譜和毛細(xì)管電泳可滿足高分辨率和定量需求，質(zhì)譜適合深入解析和復(fù)雜樣品分析，UV-Vis則適用于快速初篩。科研與工業(yè)界常將多種技術(shù)結(jié)合使用，以獲得全面、準(zhǔn)確的蛋白純度評(píng)估結(jié)果。在生物醫(yī)藥和蛋白組學(xué)研究飛速發(fā)展的jīntiān，百泰派克生物科技持續(xù)關(guān)注dànbáizhì分析技術(shù)的zuì新進(jìn)展，致力于為科研人員和企業(yè)提供高質(zhì)量、zhuānyè化的HPLC測(cè)定蛋白純度服務(wù)。

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一、蛋白測(cè)序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測(cè)序系統(tǒng)對(duì)dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測(cè)序分析服務(wù)，包括對(duì)dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對(duì)于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測(cè)序法的dànbáizhì從頭測(cè)序服務(wù)，對(duì)蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測(cè)定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測(cè)定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測(cè);

6.測(cè)序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學(xué)、bǎxiàngdàn白zhìzǔxué、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1 .高通量定量蛋白分析:多對(duì)照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測(cè)較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.技術(shù)優(yōu)良，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問(wèn)題。可在單細(xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測(cè)51個(gè)目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測(cè)細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別。通過(guò)我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測(cè)平臺(tái)

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測(cè)和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過(guò)CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查，軟件審計(jì)追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊(cè)和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測(cè)分析服務(wù)；

2.獲國(guó)家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測(cè)平臺(tái)，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

蛋白純度分析技術(shù)優(yōu)缺點(diǎn)對(duì)比檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹