如何通過質(zhì)譜實(shí)現(xiàn)糖肽結(jié)構(gòu)的完整分析？檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹

糖肽（glycopeptides）作為連接糖鏈與肽鏈的復(fù)合分子，廣泛存在于細(xì)胞膜蛋白、分泌蛋白和免疫相關(guān)蛋白中，對(duì)維持蛋白穩(wěn)定性、調(diào)控信號(hào)通路及介導(dǎo)免疫識(shí)別具有重要作用。其復(fù)雜的結(jié)構(gòu)構(gòu)成對(duì)分析技術(shù)提出了jígāo要求。質(zhì)譜，憑借其高靈敏、高分辨與分子級(jí)別解析能力，已成為糖肽結(jié)構(gòu)研究的核心平臺(tái)。本文將梳理實(shí)現(xiàn)糖肽完整結(jié)構(gòu)解析的關(guān)鍵策略，包括位點(diǎn)定位、糖鏈解析與異構(gòu)體區(qū)分，幫助科研人員提升糖肽研究效率與數(shù)據(jù)質(zhì)量。

一、糖肽結(jié)構(gòu)分析的核心難點(diǎn)

糖肽結(jié)構(gòu)信息豐富但異常復(fù)雜，主要體現(xiàn)在以下三方面：

1、糖鏈異質(zhì)性

一個(gè)糖基化位點(diǎn)可能連接多種糖鏈結(jié)構(gòu)，涵蓋不同的核心結(jié)構(gòu)、延伸模式和末端修飾，導(dǎo)致信號(hào)高度多樣。

2、位點(diǎn)分布不確定

N-糖基化主要發(fā)生在N-X-S/T結(jié)構(gòu)中，而O-糖基化缺乏一致的序列特征，需借助質(zhì)譜高精度碎裂實(shí)現(xiàn)定位。

3、異構(gòu)體結(jié)構(gòu)識(shí)別困難

同分異構(gòu)糖鏈分子量一致，僅靠質(zhì)量信息無法區(qū)分其空間構(gòu)型和鍵連方式，需多維分離和特定碎裂策略支持。

二、富集策略：提升低豐度糖肽信號(hào)

在復(fù)雜生物樣本中，糖肽含量遠(yuǎn)低于非修飾肽，因此必須進(jìn)行選擇性富集以降低背景干擾并提升檢出能力。

※ 富集技術(shù)概覽：

• 凝集素親和層析：利用糖鏈與凝集素的特異性結(jié)合富集特定結(jié)構(gòu)糖肽；

• HILIC（親水作用色譜）：根據(jù)糖肽較強(qiáng)親水性進(jìn)行有效分離與保留；

• 金屬氧化物顆粒（如TiO?）：可同時(shí)富集糖基化與磷酸化修飾肽段，適用于多修飾聯(lián)用分析。

三、分離策略：解析異構(gòu)結(jié)構(gòu)的前提

高分辨率分離是區(qū)分糖肽異構(gòu)體的基礎(chǔ)，可顯著降低共洗脫干擾，提升結(jié)構(gòu)解析精度。

※ 關(guān)鍵分離方式：

• 反相高效液相色譜（RP-HPLC）：按肽段疏水性分離，有助于解析肽段序列信息；

• HILIC分離：強(qiáng)化糖鏈結(jié)構(gòu)差異的解析，尤其適合同位點(diǎn)多糖型糖肽分析；

• 多維分離（2D-LC）：串聯(lián)HILIC和RP，可實(shí)現(xiàn)糖鏈與肽段在兩個(gè)維度上的有效解耦。

通過合理的分離策略，可極大提升糖肽檢測(cè)的分辨力與動(dòng)態(tài)范圍，增強(qiáng)質(zhì)譜圖譜的結(jié)構(gòu)解析能力。

四、碎裂模式：結(jié)構(gòu)信息獲取的核心

糖肽質(zhì)譜碎裂模式直接影響結(jié)構(gòu)信息的完整性與可解析性，需根據(jù)分析目的選擇合適策略，或進(jìn)行多模式聯(lián)用。

※ 常用碎裂技術(shù)解析：

• CID（碰撞誘導(dǎo)解離）：優(yōu)先裂解糖鏈，利于糖結(jié)構(gòu)解析，但易丟失位點(diǎn)信息；

• HCD（高能碰撞解離）：兼顧糖鏈與肽段碎片，提供b/y離子，有助于綜合分析；

• ETD/EThcD（電子轉(zhuǎn)移解離）：保留糖鏈完整結(jié)構(gòu)，適合jīngquè定位糖基化位點(diǎn)；

• UVPD/UVMPD等新興技術(shù)：結(jié)合高能光源實(shí)現(xiàn)特異性裂解，增強(qiáng)異構(gòu)體結(jié)構(gòu)差異識(shí)別能力。

五、數(shù)據(jù)分析：從譜圖到結(jié)構(gòu)的推斷邏輯

糖肽的質(zhì)譜數(shù)據(jù)解析需依賴特定算法與數(shù)據(jù)庫(kù)支持，并輔以人工審核以確保結(jié)構(gòu)解析的準(zhǔn)確性。

※ 關(guān)鍵步驟包括：

• 搜索引擎匹配：利用Byonic、pGlyco等專用算法識(shí)別糖基化肽段；

• 糖鏈數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)照：與已知糖鏈結(jié)構(gòu)庫(kù)（如GlyTouCan）比對(duì)推斷糖鏈組成與連接方式；

• 異構(gòu)體結(jié)構(gòu)識(shí)別：結(jié)合保留時(shí)間、離子強(qiáng)度與多碎片離子圖譜進(jìn)行人工驗(yàn)證；

• 定量分析與統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：實(shí)現(xiàn)不同條件下糖肽表達(dá)變化的比較與功能注釋。

六、結(jié)構(gòu)解析工作流程：標(biāo)準(zhǔn)化助力高通量研究

實(shí)現(xiàn)糖肽結(jié)構(gòu)的完整解析，需要多個(gè)環(huán)節(jié)協(xié)同運(yùn)作，構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)化流程：

1、樣本預(yù)處理與糖肽富集

2、多維分離增強(qiáng)分辨率

3、多模質(zhì)譜碎裂獲取全譜結(jié)構(gòu)信息

4、數(shù)據(jù)庫(kù)與AI輔助結(jié)構(gòu)推斷

5、人工確認(rèn)與生物學(xué)意義賦值

該流程已在多種研究場(chǎng)景中驗(yàn)證有效，包括疾病標(biāo)志物篩選、免疫組化機(jī)制研究與糖基化抗體質(zhì)量控制等。

糖肽作為dànbáizhì翻譯后修飾的重要組成，承載著豐富的生物學(xué)功能信息。通過優(yōu)化富集、分離、碎裂與數(shù)據(jù)解析流程，現(xiàn)代質(zhì)譜技術(shù)可實(shí)現(xiàn)糖肽結(jié)構(gòu)的高精度、系統(tǒng)化解析，揭示其在生理和疾病中的真實(shí)角色。作為zhuānyè的dànbáizhì組與糖基化分析服務(wù)機(jī)構(gòu)，百泰派克生物科技構(gòu)建了覆蓋從樣品制備、分離檢測(cè)到結(jié)構(gòu)解析的完整糖肽質(zhì)譜平臺(tái)。平臺(tái)配置高分辨質(zhì)譜系統(tǒng)與多模碎裂能力，支持N-糖、O-糖及多重修飾糖肽的高通量解析，廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)研究、臨床轉(zhuǎn)化與生物制藥開發(fā)。如需獲取糖肽質(zhì)譜方案或定制服務(wù)，歡迎聯(lián)系我們！

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一、蛋白測(cè)序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測(cè)序系統(tǒng)對(duì)dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測(cè)序分析服務(wù)，包括對(duì)dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對(duì)于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測(cè)序法的dànbáizhì從頭測(cè)序服務(wù)，對(duì)蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.采用目前世界上*的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測(cè)定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測(cè)定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測(cè);

6.測(cè)序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學(xué)、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1 .高通量定量蛋白分析:多對(duì)照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測(cè)較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.技術(shù)*，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題?？稍趩渭?xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測(cè)51個(gè)目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測(cè)細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測(cè)平臺(tái)

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測(cè)和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查，軟件審計(jì)追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊(cè)和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測(cè)分析服務(wù)；

2.獲國(guó)家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測(cè)平臺(tái)，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

如何通過質(zhì)譜實(shí)現(xiàn)糖肽結(jié)構(gòu)的完整分析？檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹