BD Phosflow裂解/固定緩沖液(5X)558049
- 公司名稱(chēng) 江蘇省科學(xué)器材有限公司
- 品牌 BD/美國(guó)
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地 美國(guó)
- 廠(chǎng)商性質(zhì) 代理商
- 更新時(shí)間 2025/7/29 13:39:22
- 訪(fǎng)問(wèn)次數(shù) 50
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BD Phosflow裂解/固定緩沖液(5X)558049,BD Phosflow™ Lyse/Fix Buffer 5X
用途
本產(chǎn)品用于全血裂解與固定,適用于細(xì)胞內(nèi)流式細(xì)胞術(shù)分析。例如,在使用激酶激活劑(如佛波酯)刺激細(xì)胞后,BD Phosflow™ 裂解/固定緩沖液可一步完成紅細(xì)胞裂解與白細(xì)胞固定,使研究者能夠快速滅活激酶、磷酸酶和/或蛋白酶,從而檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的真實(shí)磷酸化狀態(tài)。
特性
經(jīng)測(cè)試可保留細(xì)胞的光散射特性
適用于人源及小鼠全血樣本
在淋巴細(xì)胞亞群分析中,全血裂解效果與密度梯度離心法分離PBMCs相當(dāng)
兼容性說(shuō)明
多數(shù)情況下,磷酸化特異性抗體可與細(xì)胞表面標(biāo)志物(如CD標(biāo)志物)同步染色。但請(qǐng)注意,并非所有表面標(biāo)志物均與本產(chǎn)品兼容。
BD Phosflow裂解/固定緩沖液(5X)558049,BD Phosflow™ Lyse/Fix Buffer 5X
推薦的實(shí)驗(yàn)流程
流式細(xì)胞術(shù)操作步驟
樣本處理
使用EDTA或肝素抗凝管采集正常人外周血,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求加入相應(yīng)激活劑處理。
工作液配制
2. 將BD Phosflow™裂解/固定緩沖液(5X濃縮液)按1:5比例用去離子水/蒸餾水(室溫)稀釋為1X工作液,37°C預(yù)熱。工作液需現(xiàn)配現(xiàn)用,實(shí)驗(yàn)剩余溶液應(yīng)棄置。
裂解固定
3. 按1:20比例(血樣:工作液)混合抗凝血與預(yù)熱的1X工作液,強(qiáng)力顛倒混勻8-10次,37°C水浴孵育10分鐘。
細(xì)胞洗滌
4. 500×g離心8分鐘,棄上清,用Hank's solution洗滌細(xì)胞一次。
透膜處理
5. 渦旋重懸細(xì)胞,邊震蕩邊緩慢加入透膜試劑(如預(yù)冷的BD Phosflow™ Perm Buffer II),冰上孵育30分鐘后離心。
抗體標(biāo)記
6. 洗滌細(xì)胞兩次,用BD Pharmingen™ Staining Buffer染色緩沖液重懸。
7. 加入相應(yīng)抗體室溫避光染色30-60分鐘,洗滌后準(zhǔn)備上機(jī)檢測(cè)。