島津企業(yè)管理（中國）有限公司
使用BioSpec-nano定量蛋白質(zhì)
檢測(cè)樣品：蛋白質(zhì)
檢測(cè)項(xiàng)目：定量分析
方案概述：蛋白質(zhì)溶液中包含表面活性劑、還原劑、變性劑等各種共存物質(zhì)，這些物質(zhì)會(huì)影響定量分析，需要選擇適合樣品的分析方法。
蛋白質(zhì)溶液中包含表面活性劑、還原劑、變性劑等各種共存物質(zhì)，這些物質(zhì)會(huì)影響定量分析，需要選擇適合樣品的分析方法。
紫外吸收法（測(cè)定280 nm處的光密度(OD)）是使用分光光度法定量總蛋白濃度的簡(jiǎn)單的方法。該技術(shù)基于蛋白質(zhì)中的芳香族氨基酸在280 nm時(shí)的具有紫外吸收特性,無需預(yù)處理,分析操作簡(jiǎn)單。但是，不同種類的蛋白質(zhì)即使?jié)舛认嗤?，吸光度也有所差異，此外，?dāng)存在核酸等在相同波長(zhǎng)范圍內(nèi)有光吸收的物質(zhì)時(shí)，定量會(huì)受到影響。相比之下，BCA法(BCA:Bicinchoninic Acid）是一種在不同蛋白質(zhì)之間顯色差異較小的蛋白定量方法。該方法的原理是Cu(I)離子在蛋白質(zhì)存在的條件下會(huì)與二喹啉甲酸配位鍵合顯示紫色，濃度范圍大，靈敏度高。
如上所述，蛋白質(zhì)的定量方法有很多種，但在生物藥物的生產(chǎn)中，需要更簡(jiǎn)單、更加微量的蛋白質(zhì)定量方法。本文介紹了使用最小可測(cè)定1~2uL樣品量的生命科學(xué)紫外可見分光光度計(jì)BioSpec-nano，通過OD280 nm法和BCA法等2種方法定量分析免疫球蛋白(lgG）濃度的案例。
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